ANTITECK - Laborategiko ekipamendua, industria automatizazioa, moldaketa medikoa eta giltza eskuan irtenbidea ematea.
kapilar-elektroforesi-tresna

Elektroforesi kapilarra tresna

Laborategian erabiltzen den elektroforesi kapilarra

Edukia
1. Zer da elektroforesi kapilarra tresna?
    1.1 Elektroforesi kapilarren tresnaren funtzionamendu-printzipioa
    1.2 Elektroforesi kapilarren tresnaren historia
    1.3 Elektroforesi kapilarren tresnaren oinarrizko eraikuntza
    1.4 Elektroforesi kapilarren tresnaren lan-prozesua
    1.5 Elektroforesi kapilarren tresnaren ezaugarria
2. Elektroforesi kapilar tresnaren aplikazioa
3. Elektroforesi kapilarren tresna erabiltzea
4. Nola erosi kapilar elektroforesi tresna?

Zer da elektroforesi kapilarra tresna?

kapilar-elektroforesi-sistema
Elektroforesi kapilarra tresna laborategiko tresna bat da, osagaiak bereizten dituena, kuartzozko kapilar malgu bat bereizketa kanal gisa eta tentsio handiko DC eremu elektrikoa indar eragile gisa erabiliz eta, ondoren, osagaiak bereizten dituen emariaren desberdintasunen arabera (migrazio-tasa eremu elektrikoaren indarra unitateko) eta lagineko osagai bakoitzaren banaketa-portaera.

Elektroforesi kapilarren tresnaren funtzionamendu-printzipioa

Elektrolitoa elektroforesi zutabe kapilar batean kargatu eta exekutatzen denean, fluxu elektroosmotikoa sortzen da hodiaren horman silikonazko hidroxilo taldeen presentzia dela eta, eta zutabe kapilar osoaren barruko disoluzioa fluxu elektroosmotikoak bultzatuta noranzkoan mugitzen da. . Banatze-printzipioa eremu elektrikoaren eraginpean dagoen ioien migrazio-abiaduraren diferentzian oinarritzen da, hau da, teknika kromatografiko orokorrarekiko diferentzia nagusia, fase mugikor eta geldikako osagaien zatiketa-koefizientean baino.

Elektroforesi kapilarren tresnaren historia

Denbora-lerroa (urtea)Garapena
1967Lehenik eta behin disoluzio askeen elektroforesi zonala egiteko 3 mm-ko diametroko kapilaretan.
1974Elektroforesiaren bidez bereiztea 200~500μm-ko barruko diametroko kapilaretan.
1981Elektroforesia 75μm-ko barne-diametroko beirazko zutabe kapilar bat erabiliz lortu zen, 30kV-ko tentsioarekin.
1984Kromatografia elektrozinetiko kapilar mizelarra sartu zen.
1987Enfokatze isoelektriko kapilarra eta gel kapilar elektroforesia.
1988CE sartu zuen lehen mikrolikido erauzketa gisa, eta laserra sartu zuen CE detektagailuan, eta horrek asko hobetu zuen detekzio-sentsibilitatea.

Elektroforesi kapilarren tresnaren oinarrizko eraikuntza

Elektroforesi kapilar tresnaren osagai nagusiak DC tentsio handiko elikadura-hornidura, hodi kapilarra, elektrodoa eta elektrodo-bainua, garbiketa-sistema, detekzio-sistema eta datuak prozesatzeko sistema dira. Hodi kapilarren barruan dagoen buffer berdina bi botila tamponetan bilduta dago. Hodi kapilararen bi muturrak bi buffer botiletan jartzen dira, eta platinozko elektrodoak bi buffer botiletan sartzen dira. Esperimentuan zehar, bi buffer botiletako elektrolito-soluzioa likido-maila berean mantendu behar da eta hodi kapilarren muturrak likido-mailaren azpian sakonera berean sartu behar dira, muturren arteko presio-diferentziak eragindako sifone-efektua delako. hodi kapilarren disoluzioaren fluxua eragiten du, eta horrek analisiaren emaitzetan eragiten du.
kapilar-elektroforesi-makina

A. Zutabe kapilarra

Hornitutako zutabe kapilarra hodi biribilekoa izan ohi da, kimikoki eta elektrikoki geldoa, argi-transmisorea, malgua eta tolestu erraza izan behar duena. Zutabe kapilarren barne-diametroak 140 mikra baino txikiagoa izan behar du, eta horrek beroaren xahupen hobea izan dezake. Gaur egun, 25 eta 75 mikra arteko barne diametroa duten zutabe kapilarrak dira gehien hornitzen direnak.
Zutabe kapilarren materiala
a. Kuartzoa
Kuartzoa da zutabe kapilarrak egiteko erabiltzen den materiala. Kuartzoaren oinarrizko osagaia silizio dioxidoa da, kuartzo naturala eta kuartzo artifiziala banatzen dena.
b. Beira
Material guztien artean, beirak du elektroiragazkortasunik indartsuena. Hala ere, beirazko materialak ezpurutasunak ditu.
c. Politetrafluoroetilenoa
Politetrafluoroetilenoak UV iragazkortasuna eta elektroosmosi ahula bezalako propietateak ditu. PTFE erabiltzearen desabantailak hodiek barne-diametro uniformerik ez izatea, laginarekiko adsortzioa, bero-transferentzia txarra, etab.

B. Detektagailua

Detektagailuak UV edo laser bidez eragindako fluoreszentzia detektagailuak izan ohi dira.

C. Tentsio handiko elikadura-hornidura

0-30 kV, 200-300 mA tentsio handiko elikadura hornitua.

D. Laginketa-teknologia

a. Injekzio motorizatua, elektromigrazio injekzio bezala ere ezaguna.
b. Injekzio pneumatikoak, presio diferentzialaren injekzio gisa ere ezagutzen dena, sifoi-ekintzari egiten dio erreferentzia, sarrerako aldea presioa eginez eta irteerako aldea kenduz.

E. CE buffering-sistema

CE buffering-sistemaRange
Sodio fosfatoaren sistemaBuffer sorta zabala
Sodio borato sistemapH maila altua
Tris-HCI sistemapH maila baxua
Azido azetikoa-amonio azetato sistemaCE/MS sistema komunak

Elektroforesi kapilarren tresnaren lan-prozesua

a. Buffera zutabe kapilarrara bete.

b. Injektatzen duen muturra kubeta injekzioarekin ordezkatzen da.

c. Itzuli buffer biltegira.

d. Tentsio altua aplikatuta.

e. Osagaien bereizketa, fluxu eta banaketa desberdintasunengatik.

f. UV edo laser bidez eragindako fluoreszentzia detektagailua.

g. Datuak erregistratzeko eta prozesatzeko sistema.

h. Kromatograma.

Elektroforesi kapilar tresnaren aplikazioa

kapilar-gel-elektroforesi-tresna

Elektroforesi kapilarren sistema

A. Proba medikoak eta klinikoak

Aplikazioak elektroforesi kapilarra azterketa mediko eta klinikoetan pazienteen azterketa patologikoa, gaixotasunen diagnostikoa, gaixotasunen mekanismoen analisia eta metabolitoen azterketa in vivo daude. Azterketaren objektuak drogak, gaixotasunekin lotutako markatzaileak, gorputzeko fluido edo ehunetako ioiak, etab.

B. Drogak eta produktu naturalak

Droga edo produktu naturalen CE analisiak eta detekzioak droga sintetikoak, proteina drogak eta landareen osagai aktiboak dira nagusiki.

C. Elikadura eta nekazaritzako produktuak

Elikagaien segurtasun arazoei arreta handiagoa ematen zaielako, elikagaien segurtasunerako eta nekazaritzako produktuen probak egiteko erabiltzen diren CE metodoen kopurua handitu egin da urtez urte. Elikagaien segurtasunaren azterketak elikagaien gehigarriak, osagai jakin batzuk edo osagai kaltegarriak detektatzen ditu batez ere. Nekazaritzako produktuen probak pestiziden hondakinak eta osagai aktiboen probak barne hartzen ditu.

D. Biomolekulak

CEk abantaila du makromolekula biologikoak detektatzeko, hala nola proteinak, azido nukleikoak eta azukreak. Molekula txiki biologikoak edo bitarteko metabolikoak detektatzeko ere asko erabiltzen da.

E. Analisi kirala

CE zatiketa kiralerako erabil daiteke, hala nola, aminoazidoen edo molekula txikien bereizketa enantiomerikoa, droga molekulak eta zatiketa kiralaren agenteen konparazioa eta ebaluazioa.

F. Ingurumenaren jarraipena

Elektroforesi kapilarra kutsatutako ura zuzenean lagintzeko erabil daiteke aurretratamendurik gabe, eta, horrela, uretan dauden antibiotikoak, hormonak edo drogak eta metal astunak ioiak azkar detektatzeko.

Elektroforesi kapilarren tresna erabiltzea

Elektroforesi kapilarren makina

Elektroforesi kapilarren analisia injekzio-teknika maila altua behar du, eta injekzio-eragiketa hau da.

a. Zenbat eta txikiagoa izan laginaren sarrera-eremuko banda, orduan eta hobeto. Injekzio-metodoa edozein dela ere, lagin-disoluzioan txertatutako hodi kapilaren sakonera, oro har, hodi kapilarren luzera osoaren% 1 eta % 2 baino txikiagoa izan behar da. Honek laginaren soluzioaren errendimendua murrizten du hodi kapilarren adsortzio kapilarren bidez eta injekzio bolumena eragiten du. Lagin-hodiaren disoluzioa 5μL bada, injekzio bolumena 1 eta 50nL-koa izan behar du.

b. Injekzio denbora laburra izan behar da. Normalean, injekzio-denbora 0.5 eta 1 s-koa da, eta une horretan kapilarrari atxikitako lagin kopurua arbuiagarria da arnastearen bolumenarekiko. Elektroforesi kapilarren injekzio-denbora ± 0.1 s-koa izan daitekeen arren, soluzioren bat kapilarrari atxikiko zaio lagin-hodian sartzen denean, beraz, injekzio-denbora labur batek analisiaren erreproduzigarritasunari eragingo dio.

c. Laginaren aurrekontzentrazioa. Kapilarren bolumen totalak mugatuta, kontzentrazio oso diluitua duten laginetarako, elektroforesi kapilarrak ezin du laginaren bolumena handitu detekzio-sentsibilitatea hobetzeko HPLCk egin dezakeen bezala, baina neurri batzuk har daitezke hura hobetzeko.
a) Laginaren bufferaren eroankortasuna elektroforesiaren bufferarena baino nabarmen txikiagoa denean 100 aldiz baino gehiagotan, kapilarren bi muturretan tentsioa gehitzeak eremu elektriko handiagoa sor dezake laginaren eremuaren aurrean eta atzean, eta laginaren disoluzioko molekulak azkarrago migratzen ditu. Molekula hauek elektroforesi buffer-aren mugara iristen direnean, migrazio-abiadura moteldu egiten da eremu elektrikoa ahultzen delako, laginaren eremua estutu eta kontzentrazioa handitzen da eta kontzentrazio-helburua lortzen da.
b) Laginaren tamponak eta elektrodoen tamponak eroankortasun bera dutenean, eta laginaren kontzentrazioa diluitu eta gehiago diluitzeko egokia ez denean, lagina injektatu aurretik ur pixka bat arnastu daiteke, eta horrek kontzentrazio helburua ere lor dezake.
c) Edozein injekzio-metodoa hartzen den edozein dela ere, goiko metodoak lagina pilatu eta kontzentratu egin dezake. Dena den, pilaketa-eremuan potentzialaren beherakada handia dela eta, eremu horretan tenperatura igotzea ekarriko du.

d. Laginak elikatzeko eragiketa berehala hasi behar da kapilarra laginaren soluzioan sartu ondoren. Amaitu ondoren, kapilarra azkar mugitu behar da bufferera elektroforesia hasteko. Bestela, ekintza kapilarra eta sifoia gertatuko dira, akatsak eta banda espektrala zabaltzea eraginez.

e. Elektrodoa ez da hodi kapilarrarekin kontaktuan egon behar. Lagin-biltegiaren eta buffer-biltegiaren maila orekatu egin behar da.

f. Mantendu sistema ahalik eta konstanteena. Tenperaturak biskositateari zuzenean eragiten diolako eta laginaren jarioaren kantitate konstanteari eragiten diolako.

g. Lagin-disoluzioko disolbatzaileak elkarren artean disolbagarria izan behar du tamponarekin, eta lehenengoaren indar ionikoa bigarrenarena baino txikiagoa izan behar da.

h. Saihestu lagin-disoluzio eta tamponen lurrunketa eta galera.

Nola erosi elektroforesi kapilar tresna?

ANTITECK ematen laborategiko ekipoak, laborategiko kontsumigarriak, bizitza zientzien sektoreko ekipamenduak fabrikatzeko.
Gurea interesatzen bazaizu elektroforesi kapilarra tresna edo zalantzaren bat baduzu, idatzi mezu elektroniko bat helbide honetara [posta elektroniko bidez babestua], ahalik eta azkarren erantzungo dizugu.


    Cookieak erabiltzen ditugu gure webgunean ahalik eta esperientzia onena eskaintzeko. Gune hau erabiltzen jarraituz gero, cookieen erabilera onartzen duzu.
    Onartu
    Pribatutasun politika