Geruza Meheko Kromatografia Makina

Edukia
1. Zer da geruza meheko kromatografia makina?
    1.1 Zer da geruza meheko kromatografia?
        1.1.1 Geruza meheko kromatografiaren oinarrizko printzipioa
        1.1.2 Geruza meheko kromatografiaren sailkapena
2. Geruza meheko kromatografia-makinaren sailkapena
    2.1 Geruza meheko kromatografia-eskaner konbentzionala
    2.2 Geruza meheko irudi digitalaren analizatzailea
3. Geruza meheko kromatografia makina erabiltzea
4. Nola erosi geruza meheko kromatografia makina?

Geruza meheko kromatografia-makina mota bat da laborategiko eskanerra aleen analisi kuantitatiborako geruza meheko kromatografiaren printzipioa erabiliz.

Geruza meheko kromatografia bereizketa geruza lau eta mehe batean egiten delako du izena. Geruza meheko kromatografia Lagin nahasiak bereizteko, identifikatzeko eta kuantifikatzeko kromatografiko bereizketa teknika bat da, fase mugikor gisa disolbatzaile egoki bat erabiliz eta fase geldi gisa euskarri batean estalitako euskarria. 1940ko hamarkadaren amaieran garatutako metodo kromatografiko azkarra, sinplea eta mikroskopikoa da.

1938an, Izmailor eta Schraiber-ek alumina geruza mehe bat estali zuten mikroskopioko diapositiba batean, bereizi beharreko substantzia plaka mehean ikusi zuten eta desplegatze-agentea bertikalki jarri zuten ZX lagin-puntuan hodi kapilar batekin, eta hedatzeko agentea isuri zen. hodi kapilarretik, horrela, landare-alkohol-estraktu ugariren osagaiak arrakastaz bereizten ditu.

1950eko hamarkadan, K. Rehner-ek eta Miller-ek, aurreko ikerketan oinarrituta, silize gela adsorbatzaile gisa eta igeltsua aglutinatzaile gisa erabili zuten, silize gela beirazko plaka batean estali zuten geruza mehe bat egiteko eta substantzien bereizketa egin zuten, hau da, gainera geruza meheko kromatografia zentzu modernoan.

Geruza meheko kromatografia osagai bakoitzak xurgatzaile berari duen adsortzio-ahalmen desberdina aprobetxatzen du, fase mugikorren (disolbatzailea) fase geldikorrean zehar igarotzen den prozesuan (xurgatzailea), etengabe sortzen diren adsortzioa, desortzioa, birxurgapena eta birxurgapena, eta horrela lortzen da. osagai bakoitza elkarrengandik bereiztea.

Adsortzioa gainazalen propietate garrantzitsu bat da. Edozein fasek gainazal bat sor dezakete, eta adsortzioa faseetako baten substantziaren edo bertan disolbatutako solutuaren fenomeno intentsiboa da. Adsortzioa solidoen eta gasen arteko gainazaletan gerta daiteke, solidoen eta likidoen artean eta adsorbatutako likidoen eta gasen artean.

Adsortzio-prozesua itzulgarria da, eta adsorbatutako materiala baldintza jakin batzuetan desorbatu daiteke. Adsorbatzailearen gainazal jakin batean xurgatutako molekulen eta gainazal hori denbora-unitate berean irteten diren molekulen artean oreka dinamikoa ezar daiteke, adsortzio-oreka deritzona. Adsortzio-kromatografia-prozesua oreka-prozesu dinamikoa da, oreka eta desoreka, adsortzioa eta desortzioa etengabe sortzen dituena.

Substantzia baten molekulak solido baten gainazalean gera daitezen arrazoia da solidoaren gainazaleko molekulak (ioiak edo atomoak) eta solidoaren barruan dauden molekulak ez direla berdin erakartzen. Solidoaren barruan, molekulen arteko elkarreraginean dauden indarrak simetrikoak dira eta haien indar-eremuak elkar ezeztatzen dira. Solidoaren gainazalean dauden molekulen indarrak asimetrikoak dira, barruko aldea solidoaren barneko molekulen indar handi bat jasaten da eta gainazaleko geruzak indar txiki baten menpe, eta horrela gas edo solutuaren molekulak erakartzen dira. hondar-indar horren eraginez mugimenduan dagoen solidoaren gainazalarekin topo egiten dutenean geratzeko.

Silice-gela eta alumina euskarri gisa erabiltzeko printzipio nagusia, adibidez, adsortzio-indarraren eta zatiketa-koefizientearen arteko aldea da, nahastea bereiztea ahalbidetzen duena. Disolbatzailea xurgatzailean zehar mugitzen den heinean, laginaren osagaiak berekin eramaten ditu, etengabeko adsortzioa eta desortzioa, baita behin eta berriz zatitzea ere.

Geruza meheko kromatografia Banaketa geruza mehe-metodoa, adsortzio-geruza mehe-metodoa eta ioi-trukea geruza mehe-metodoa bana daiteke, fase geldikorraren izaeraren eta bereizketa-mekanismo desberdinen arabera. Horien artean, adsortzio-geruza meheko metodoa eta banaketa-geruza meheko metodoa erabiltzen dira gehien.

Banaketa geruza meheko metodoa likido bat erabiltzen du fase geldikor gisa. Geldiko fase likidoa euskarri bati (substantzia solido kimikoki inerte porotsu bati) aurretiaz lotzen zaio, ondoren, fase geldikoa plakan estaltzen da eta lagina zabaltzen da.

Fase geldikorrak (xurgatzailea) geruza meheko plaka baten gainazal leunean uniformeki zabaltzeko eta plakaren mutur batean aztertu beharreko lagin-disoluzioa lekuztatzeko prozesuari spotting deitzen zaio.

Laginaren soluzio-puntua jatorri-puntua deitzen da. Jarri plaka mehea zabaltzeko depositu itxi batean (ganbera), laginaren muturra disolbatzaile ofizial egokian murgildu, xurgatzailearen ekintza kapilarra plaka mehean, bereizitako osagaiak aurrera egiteko disolbatzaileari garapena deitzen zaio.

Garapenean zehar, laginaren osagaiak etengabe xurgatzen, desorbatzen, birxurgatzen eta desorbatzen dira fase geldiaren eta garatzeko disolbatzailearen artean. Fase finkoko osagai desberdinen adsortzio-ahalmen desberdina dela eta, xurgatzen errazak diren osagaiak nahiko poliki mugitzen dira, eta xurgatzen zailak diren osagaiak nahiko azkar mugitzen dira. Denbora-tarte baten ondoren, zabaltzen den agentearen aurrealdea aurrez zehaztutako posizio batera iristen denean, geruza meheko plaka kentzen da, eta adsortzio-ahalmen desberdina duten osagaiek elkarrengandik bereizita dauden lekuak sor ditzakete geruza meheko plakan. Osagaiak kolorerik gabeko substantziak badira, kolorearen garapenaren ondoren koka daitezke metodo fisiko edo kimikoen bidez.

Ioi-trukearen geruza mehearen metodoak ioi-trukearen erretxina erabiltzen du fase geldikor gisa. Normalean, ioi-trukearen erretxina 200-40O-ko sarean birrindu egiten da, eta, ondoren, beira, metal xafla edo beste materialen gainazalean estali egiten da plaka geruza mehe bat egiteko, eta ondoren lagina zabaltzen da.

Saiakuntzan dagoen substantziaren osagaiak ioi-trukearen erretxinarekin trukatzen dira. Truke-ahalmen handia duten osagaiak trukatzen dira lehenik, eta truke-ahalmen eskasa duten osagaiak garatzen dituen agenteak eraman eta gero berriro trukatzen dira, osagai desberdinak bereiz daitezen.

Geruza meheko kromatografia-eskaner konbentzionala uhin-luzera osoko eskaner bat da, 200-800 nm bitarteko uhin-luzera aukeran eskaintzen duena eta substantzia-edukia zehazten du laginak argiaren xurgapenaren intentsitatea detektatuz. Eskanerrak UV irradiazioak sortzen duen fluoreszentziaren intentsitatea ere detektatu dezake 254 nm edo 365 nm-tan, detekzio zehatza ahalbidetuz.

Eskaner konbentzionalen eskaneatze-metodoak izpi bakarreko eskaneatzea, izpi bikoitzeko eskaneatzea eta uhin-luzera bikoitzeko eskaneamenduan banatzen dira.

Izpi bakarreko eskaneatzeak izpi bakarra erabiltzen du. Tresna egitura sinplea da, baina oinarri-lerroa ezegonkorra da eta oso gutxitan erabiltzen da praktikan.

Izpi bikoitzeko eskanerreak uhin-luzera bereko bi izpi erabiltzen ditu aldi berean eskaneatzeko, izpi batek laginaren zabaltze-kanala eskaneatzen du eta beste habeak laginaren kanalaren ondoan dagoen eremu hutsa eskaneatzen du, hutsunearen xurgapena kendu ahal izateko, partzialki ezabatuz. geruza meheko plaka zabaltzeko norabidean hedapen irregularrak eragindako errorea. Hala ere, ezin du ezabatu hedapen-noranzkoan hedapen irregularrak eragindako errorea.

Uhin-luzera ezberdineko bi izpik txandaka eskaneatzen dute laginaren kanal-eremua. Uhin-luzera bat uhin-luzeraren hautapenean ezarri behar da laginaren xurgapen maximoaren posiziorako eta bestea xurgapen minimoaren posiziorako. Metodo honek, funtsean, plakaren hedapen irregularrean sortutako errorea ezaba dezake, beraz, eskaneatzeko oinarrizko lerroa oso egonkorra da.

Geruza meheko irudi digitalaren analisia geruza meheko analisi-teknika bat da, irudi digitaleko ekipoak erabiltzen dituena, geruza meheko plaka bateko puntu bakoitzaren argi-intentsitateari buruzko informazioa lortzeko eta, ondoren, lortutako irudia aztertzeko. Irudi digitalak bi gailu mota daude, kamerak eta eskanerrak, alegia. Eskaner digitalak irudi-teknologia progresiboa erabiltzen duenez, eskaner digitala eskaner progresiboa deitzen zaio geruza meheko ohiko eskaner baten puntuz puntu eskaneatzea bereizteko helburuarekin.

Geruza meheko eskaner konbentzionalak bezala, bi kamerek edo eskaner progresiboek argia detektatzeko sistemak dituzte, hau da, argi kantitatea seinale elektriko batean linealki bihurtzen duten osagaiak dira. Aldea da kamerek eta eskaner progresiboek seinale elektrikoa irudi informatizatu batean bihur dezaketela, non irudiko puntu indibidualen (pixel) kolore tonuek argiaren intentsitatea islatzen duten.

Hori dela eta, geruza meheko irudi digitala gizakiaren begien behaketa eta detekziotik hurbilago dago, eta emaitzak intuitiboagoak dira, identifikaziorako aproposa da, batez ere belar sendagaien hatz-marken mapak egiteko.

a. Nahastu fase geldikorraren zati 1 eta 3 ur zati mortero batean norabide batean. Azaleko aire-burbuilak kendu ondoren, isuri aplikaziora. Mugitu aplikazioa leunki estaltzeko beirazko plakan (0.2-0.3 mm-ko lodiera). Kendu estalitako beirazko plakaren geruza mehea, jarri mahai horizontalean giro-tenperaturan lehortzeko eta, ondoren, labean 110 ℃-tan 30 minutuz. Jarri lehortzeko labe batean eta utzi. Egiaztatu uniformetasuna erabili aurretik (argi transmititutako eta islatutako argiaren bidez aztertu daiteke).

b. Lagina geruza meheko plakan ikusi zen spotter batekin, orokorrean puntu biribil gisa. Laginaren oinarri-lerroa beheko ertzetik 2.0 cm-ra dago, lagin-puntuen diametroa eta puntuen arteko distantzia papereko kromatografia metodoaren berdina da, eta puntuen arteko distantzia orbanen hedapen gisa ikus daiteke ez eragiteko. detekzioa. Puntu-laginak kontuz ibili behar du geruza mehearen gainazala ez kaltetzeko.

c. Zilindroa aldez aurretik hedatzeko agentearekin saturatu behar baduzu, gehitu nahikoa hedatzeko agente zilindroari eta itsatsi horman iragazki-paper-zerrenda zilindroaren altuera eta zabalera berdinarekin, sartu mutur bat zabaltzeko agentean, itxi zilindroaren goiko estalkia eta sistema orekatua edo testuaren arabera funtzionatzea. Jarri lagina garapen-zilindroaren garapen-agentean, eta murgildu lagina garapen-agentean 0.5 ~ 1.0 cm-ko sakonerara plakaren beheko ertzetik (ez murgildu lagina garapen-agentean). Zilindroaren estalkia zigilatu. Kendu laminatua zehaztutako distantziara garatu ondoren (oro har 10-15 cm) eta lehortu. Ondoren, probatu espezie bakoitzaren xedapenen arabera.

d. Leku kromatografikoak detektatzeko eskaneatu behar badira a geruza meheko kromatografia makina edo geruza mehe batean puntu kromatografikoak zuzenean eskaneatuz kuantifikatuta, geruza meheko eskaneaketa metodoa erabiltzen da.

Gurea interesatzen bazaizu geruza meheko kromatografia makina edo zalantzaren bat baduzu, idatzi mezu elektroniko bat helbide honetara [posta elektroniko bidez babestua], ahalik eta azkarren erantzungo dizugu.