HPLC zutabe-berogailua
Zer da HPLC zutabe-berogailua?
Askotan fase likidoaren analisia egiten dutenek ezagutu behar dute zutabe berogailua. Hau da zutabe tenperatura-ganbera Atxikipen kromatografiko egonkorragoa ahalbidetzen du, tenperatura-gorabeheren interferentziarik gabe, eta, ondorioz, kromatografia-erreproduzigarritasun hobea da. Aldi berean, bereizketa kromatografikoaren eraginkortasun hobea eta gailur forma simetrikoagoa du eta Van Diemen ekuazioaren masa-transferentzia terminoa hobetzen du. The HPLC zutabe-berogailua Kokapen malgua, instalazio azkarra, behaketa erraza eta ihesaren aurkako diseinu seguruaren abantailak ditu.
HPLC funtzionamendu-printzipioa
Nahastearen osagaiak banandu eta araztu egiten dira zutabe kromatografikoa fase geldi eta mugikorrekin elkarrekintzaz. Fase geldikoa zutabe kromatografikoan dagoen partikula porotsu oso txikia da. Fase mugikorra disolbatzaile edo disolbatzaileen nahasketa bat da, zutabean zehar presio handian behartuta. Lagina xiringa batekin injektatzen da eta fase mugikorrarekin nahasten da laginaren begiztarekin konektatutako balbula baten bidez, eta laginaren osagaiak zutabetik abiadura ezberdinetan pasatzen dira. Osagaien eta fase geldikorraren arteko adsortzio-ahalmen desberdinak direla eta, osagai bakoitza zutabetik irteten da txandaka eta detektagailu egokiak osagaien kontzentrazioa telekomunikazio zenbaki batean bihurtzen du ordenagailuaren HPLC softwarera igortzeko. Korrika amaitzean, kromatograma HPLC softwarean dago eskuragarri.
Zer den atxikipen-denbora HPLCn
The atxikipen-denbora HPLCn lagina zutabearen sarreratik irteerara igarotzeko behar den denbora da. Fase mugikor ezberdineko zutabe ezberdinetan eluitzen diren substantzia ezberdinek atxikipen-denbora desberdinak izango dituzte, beraz, atxikipen-denbora analisi kromatografikoaren parametro garrantzitsuenetako bat da.
Laginaren osagaiak bereizita injekzioaren hasieratik zutabearen ondorengo denborara, balio maximoaren osagaiaren kontzentrazioa denean, hau da, injekzioaren hasieratik denbora kromatografikoaren osagai baten gailurrera igaro zenean, gailurra igaro zenean, izenez ezagutzen dena atxikipen denbora osagai honena. The HPLCren atxikipen-denbora RT bidez adierazten da, askotan minututan (min) denbora-unitate gisa. Atxikipen denbora prozesu kromatografikoan faktore termodinamikoek zehazten dute. Eragiketa-baldintza kromatografiko jakin batzuetan, edozein substantziak atxikipen-denbora definitu du, desplazamendu-balio espezifikoaren eginkizun bera duena eta analisi kromatografiko kualitatiborako oinarri gisa erabil daitekeena.
Arreta jarri beharko zenioke HPLCn atxikipen-denboraren aldakuntza. In HPLC bereizketa, bada kromatografia likidoaren atxikipen-denbora laburregia da, bereizitako substantzia fase geldiaren gainean gaizki atxikitzen dela esan nahi du, eta posible da neurtu beharreko substantziaren determinazioa oztopatzea atxikitzen ez diren ezpurutasunekin nahastuz. Jakina, oso zehatzak ez diren detektagailuak erabiltzean ohikoa den egoera baino ez da, hala nola UV eta ELSD. Hala ere, fluoreszentzia edo masa-espektrometria bezalako espezifikotasun handiko detektagailu bat erabiltzen bada, interferentzia hori asko murriztu edo baztertuko da.
Zutabeen kromatografia motak
Kromatografia, kromatografia likido eta analisi kromatografiko gisa ere ezaguna, kimika analitikoan aplikazio zabalak dituen bereizketa eta analisi metodo bat da, kimika organikoa, biokimika eta beste arlo batzuk. Ohikoa metodo kromatografikoak zutabe-kromatografia, geruza mehe-kromatografia, errendimendu handiko kromatografia likidoa, gas-kromatografia eta fluido-kromatografia superkritikoa.
Zutabe-kromatografia mota desberdinak
A. Zutabe kromatografia metodoa
Jatorrizko metodo kromatografikoafase geldikorra kotoiz edo betetako beirazko hodi batean injektatzen duena iragazi Beheko muturrean dagoen paperak, laginak bustitako fase geldikorreko hautsa beirazko hodiaren gainean zabaltzen du eta fase mugikorrarekin elutzen du. Bi eluzio-metodo ohiko daude: bata goitik beherakoa da, disolbatzailearen grabitatearen araberakoa, eta bestea behetik gorakoa, kapilaritate-ekintzaren araberakoa.
Banaketaren ondoren frakzio purua biltzeko bi metodo ezberdin ere badaude. Metodo bat isurketa-disoluzioa zutabearen amaieran zuzenean onartzea da, eta beste metodoa fase geldikoa lehortzea eta, ondoren, banakako bandak mekanikoki bereiztea eta osagai molekulak ateratzea fase geldikoa disolbatzaile egoki batean bustiz.
Zutabe-kromatografia oso erabilia da nahasketak bereizteko, sintesi organikoko produktuak, extract naturalak eta makromolekula biologikoak bereizteko barne.
B. Geruza fineko kromatografia
Thin geruza kromatografia oso erabilia den metodo kromatografikoa da. Metodo kromatografiko honetan, fase geldikoa metalezko edo beirazko plaka batean estaltzen da geruza mehe bat osatzeko, eta lagina plakaren mutur batean ikusten da hodi kapilar batekin, boligrafoarekin edo beste tresna batekin, eta, ondoren, mutur orbantua jartzen da. fase mugikorrean murgilduta eta fase mugikorreko disolbatzailea xaflan zehar zabaltzen da ekintza kapilarren bidez.
Geruza meheko kromatografia metodo merke eta erabilerraza da, laginak gordina neurtzeko eta sintesi organikoko erreakzio-prozesuak detektatzeko erabiltzen dena.
C. Errendimendu handiko likido kromatografia (HPLC)
Gaur egun, errendimendu handiko kromatografia likidoa (HPLC) kromatografia analisi metodo erabilienetako bat da. Kromatografia likido sistema batek fase mugikorreko biltegi botila, infusio ponpa, injektore, zutabe, detektagailu eta grabagailu bat ditu, eta bere osaera orokorra gas kromatografiaren antzekoa da. HPLC infusio ponpak infusio bolumen egonkor eta orekatua behar du; injekzio sistemak injekzio erosoa eta kommutazio estua behar ditu; fase mugikorreko likidoaren biskositatea gasarena baino askoz txikiagoa denez, kromatografia likidoaren zutabea, oro har, lodiagoa da eta luzera gasarena baino askoz txikiagoa. kromatografia zutabea zutabearen presioa murrizteko. HPLC aplikazio sorta zabal batean erabiltzen da, analisi kuantitatibo eta kualitatiboko ia arlo guztietan.
D. Gas kromatografia
Gas-kromatografia helioa edo argona bezalako gasak garraiolari gisa (fase mugikorra deitzen zaio) eta nahaste-lagina zutabean betegarriarekin injektatzen duen (fase geldikorrekoa) bereizteko metodo bat da. Banatutako osagaiak seinale elektriko bihurtzen ditu detektagailu batek eta grabagailu batek grabatzen ditu.
E. Fluido superkritikoen kromatografia
Fluido superkritikoko kromatografia (SFC) prozesu kromatografiko bat da, fase mugikor gisa fluido superkritiko bat erabiltzen duena bereizketa eta analisia egiteko fase mugikorraren disolbatzaile-gaitasunean oinarrituz. 1980ko hamarkadan garatu eta hobetu den teknologia berria da. Fluido superkritikoen kromatografia baino errazagoa da zutabeen eraginkortasun handiagoa lortzea kromatografia likidoa.
HPLC eta zutabe-kromatografiaren arteko aldea
Kromatografia likidoa vs zutabe kromatografia
A. Mota desberdinak
a. Errendimendu handiko likido kromatografia (HPLC)
a) Adsorzio-kromatografia
b) Partizio Kromatografia
c) Ioi Kromatografia
d) Tamaina Baztertzeko Kromatografia
e) fase lotuko kromatografia
f) Afinitate Kromatografia
b. Kromatografia likidoaren metodoa
a) Adsorzio-kromatografiaren fase geldikorra adsorbentea da, eta kromatografiaren bereizketa-prozesua adsorbentearen gainazalean egiten da, fase geldikorraren barrualdean sartu gabe.
b) Partizio-kromatografian, fase mugikorra eta geldikorra likidoak dira. Lagin-molekulak azkar iristen dira bi fase likidoen arteko oreka-partiziora eta bi faseetako osagaien partizio-koefizienteen arteko aldea erabiliz bereizten dira, erauzketa-prozesu baten antzekoa dena.
c) Ioi-truke kromatografiak normalean ioi-truke erretxina bat erabiltzen du fase geldikor gisa. Oro har, laginaren ioiak modu itzulgarrian trukatzen dira fase geldikorreko ioiekin, eta kromatografiaren bereizketa osagai-ioi bakoitzaren truke-ahalmen desberdinei esker lortzen da.
B. Ezaugarri desberdinak
a. Errendimendu handiko likido kromatografia (HPLC)
a) Presio handia. Fase mugikorra likido bat da, eta zutabetik igarotzean erresistentzia handia jasaten du. Zutabetik azkar igarotzeko, presio handia aplikatu behar zaio eramaile-likidoari.
b) Abiadura handia. Analisi azkarra eta garraiatzaile-fluidoaren fluxu-tasa azkarra, kromatografia likido klasikoa baino askoz azkarragoa. Normalean, lagin bat 15-30 minututan aztertzen du, eta lagin batzuk 5 minututan ere osa daitezke. Analisiaren denbora ordubete baino gutxiagokoa izan ohi da.
c) Eraginkortasun handia. Banaketa-eraginkortasun handia. Fase geldikorra eta fase mugikorra hauta daitezke bereizketa-efekturik onena lortzeko, eta hau askoz handiagoa da destilazio-zutabe industrialen eta gas-kromatografiaren bereizketa-eraginkortasuna baino.
b. Kromatografia likidoaren metodoa
Fase mugikor gisa likidoa erabiliz, fase geldikoa hainbat forma izan daiteke, hala nola papera, plaka meheak eta ohe beteak.
Aplikazio desberdinak
| Errendimendu handiko kromatografia likidoa (HPLC) | Metodo likido kromatografikoa |
|---|---|
| Bereizmen handiko, sentsibilitate handiko, abiadura handiko, zutabeak behin eta berriz erabiltzearen eta efluenteen osagaien bilketa errazaren abantailak direla eta, errendimendu handiko kromatografia likidoa asko erabili da hainbat arlotan, hala nola biokimika, elikagaien analisia, ikerketa farmazeutikoa, ingurumen analisia. , eta analisi ez-organikoa, eta analisi biokimikoko problemak ebazteko metodorik itxaropentsuena bihurtu da. | Kromatografia likidoa giro-tenperaturan egiten da eta ez dago laginaren hegazkortasunak eta egonkortasun termikoak mugatuta. Pisu erlatibo erlatibo handia duten substantziak bereizteko eta aztertzeko aproposa da, lurruntzeko zailak, ez erraz lurrunkorrak edo beroarekiko sentikorrak diren konposatu ionikoak eta polimeroak, substantzia organikoen % 70 eta % 80 inguru hartzen dituztenak. |
Nola erosi HPLC zutabe-berogailua?
Gurea interesatzen bazaizu HPLC zutabe-berogailua edo zalantzaren bat baduzu, idatzi e-mail bat info@antiteck.com helbidera, ahalik eta azkarren erantzungo dizugu.