HPLC zutabe-berogailua

Edukia
1. Zer da HPLC zutabe-berogailua?
    1.1 HPLC lan-printzipioa
    1.2 Zer da atxikipen-denbora HPLCn
2. Zutabeen kromatografia motak
    2.1 Zutabe-kromatografia mota desberdinak
3. HPLC eta zutabe-kromatografiaren arteko aldea
    3.1 Kromatografia likidoa vs zutabe kromatografia
4. Nola erosi HPLC zutabe berogailua?

Askotan fase likidoaren analisia egiten dutenek ezagutu behar dute zutabe berogailua. Hau da zutabe tenperatura-ganbera Atxikipen kromatografiko egonkorragoa ahalbidetzen du, tenperatura-gorabeheren interferentziarik gabe, eta, ondorioz, kromatografia-erreproduzigarritasun hobea da. Aldi berean, bereizketa kromatografikoaren eraginkortasun hobea eta gailur forma simetrikoagoa du eta Van Diemen ekuazioaren masa-transferentzia terminoa hobetzen du. The HPLC zutabe-berogailua Kokapen malgua, instalazio azkarra, behaketa erraza eta ihesaren aurkako diseinu seguruaren abantailak ditu.

Nahastearen osagaiak banandu eta araztu egiten dira zutabe kromatografikoa fase geldi eta mugikorrekin elkarrekintzaz. Fase geldikoa zutabe kromatografikoan dagoen partikula porotsu oso txikia da. Fase mugikorra disolbatzaile edo disolbatzaileen nahasketa bat da, zutabean zehar presio handian behartuta. Lagina xiringa batekin injektatzen da eta fase mugikorrarekin nahasten da laginaren begiztarekin konektatutako balbula baten bidez, eta laginaren osagaiak zutabetik abiadura ezberdinetan pasatzen dira. Osagaien eta fase geldikorraren arteko adsortzio-ahalmen desberdinak direla eta, osagai bakoitza zutabetik irteten da txandaka eta detektagailu egokiak osagaien kontzentrazioa telekomunikazio zenbaki batean bihurtzen du ordenagailuaren HPLC softwarera igortzeko. Korrika amaitzean, kromatograma HPLC softwarean dago eskuragarri.

The atxikipen-denbora HPLCn lagina zutabearen sarreratik irteerara igarotzeko behar den denbora da. Fase mugikor ezberdineko zutabe ezberdinetan eluitzen diren substantzia ezberdinek atxikipen-denbora desberdinak izango dituzte, beraz, atxikipen-denbora analisi kromatografikoaren parametro garrantzitsuenetako bat da.

Laginaren osagaiak bereizita injekzioaren hasieratik zutabearen ondorengo denborara, balio maximoaren osagaiaren kontzentrazioa denean, hau da, injekzioaren hasieratik denbora kromatografikoaren osagai baten gailurrera igaro zenean, gailurra igaro zenean, izenez ezagutzen dena atxikipen denbora osagai honena. The HPLCren atxikipen-denbora RT bidez adierazten da, askotan minututan (min) denbora-unitate gisa. Atxikipen denbora prozesu kromatografikoan faktore termodinamikoek zehazten dute. Eragiketa-baldintza kromatografiko jakin batzuetan, edozein substantziak atxikipen-denbora definitu du, desplazamendu-balio espezifikoaren eginkizun bera duena eta analisi kromatografiko kualitatiborako oinarri gisa erabil daitekeena.

Arreta jarri beharko zenioke HPLCn atxikipen-denboraren aldakuntza. In HPLC bereizketa, bada kromatografia likidoaren atxikipen-denbora laburregia da, bereizitako substantzia fase geldiaren gainean gaizki atxikitzen dela esan nahi du, eta posible da neurtu beharreko substantziaren determinazioa oztopatzea atxikitzen ez diren ezpurutasunekin nahastuz. Jakina, oso zehatzak ez diren detektagailuak erabiltzean ohikoa den egoera baino ez da, hala nola UV eta ELSD. Hala ere, fluoreszentzia edo masa-espektrometria bezalako espezifikotasun handiko detektagailu bat erabiltzen bada, interferentzia hori asko murriztu edo baztertuko da.

Kromatografia, kromatografia likidoa eta analisi kromatografikoa izenez ere ezaguna, bereizketa eta analisi metodo bat da, eta aplikazio oso zabalak ditu kimika analitikoan, kimika organikoan, biokimikan eta beste alor batzuetan. Komuna metodo kromatografikoak zutabe-kromatografia, geruza mehe-kromatografia, errendimendu handiko kromatografia likidoa, gas-kromatografia eta fluido-kromatografia superkritikoa.

Jatorrizko metodo kromatografikoa, fase geldikoa beheko muturrean kotoiarekin edo iragazki-paperez betetako beirazko hodi batean injektatzen duena, laginak saturatutako fase geldikorreko hautsa beira-hodiaren goiko aldean zabaltzen du eta fase mugikorrarekin elutzen da. Bi eluzio-metodo arrunt daude: bata goitik behera disolbatzailearen beraren grabitatean oinarritzen da, eta bestea behetik gorako ekintza kapilarran oinarritzen da.

Banaketaren ondoren frakzio purua biltzeko bi metodo ezberdin ere badaude. Metodo bat isurketa-disoluzioa zutabearen amaieran zuzenean onartzea da, eta beste metodoa fase geldikoa lehortzea eta, ondoren, banakako bandak mekanikoki bereiztea eta osagai molekulak ateratzea fase geldikoa disolbatzaile egoki batean bustiz.

Zutabe-kromatografia oso erabilia da nahasketak bereizteko, sintesi organikoko produktuak, extract naturalak eta makromolekula biologikoak bereizteko barne.

Thin geruza kromatografia oso erabilia den metodo kromatografikoa da. Metodo kromatografiko honetan, fase geldikoa metalezko edo beirazko plaka batean estaltzen da geruza mehe bat osatzeko, eta lagina plakaren mutur batean ikusten da hodi kapilar batekin, boligrafoarekin edo beste tresna batekin, eta, ondoren, mutur orbantua jartzen da. fase mugikorrean murgilduta eta fase mugikorreko disolbatzailea xaflan zehar zabaltzen da ekintza kapilarren bidez.

Geruza meheko kromatografia metodo merke eta erabilerraza da, laginak gordina neurtzeko eta sintesi organikoko erreakzio-prozesuak detektatzeko erabiltzen dena.

Gaur egun, errendimendu handiko kromatografia likidoa (HPLC) gehien erabiltzen den analisi kromatografikoko metodoetako bat da. Kromatografia likidoko sistema bat fase mugikorreko gordailu botila, infusio ponpa, injektore, zutabe, detektagailu eta grabagailuz osatuta dago, eta bere konposizio orokorra gas-kromatografiaren antzekoa da. HPLC infusio-ponpak infusio bolumen egonkorra eta orekatua behar du; injekzio sistemak injekzio erosoa eta aldaketa estua behar ditu; fase mugikor likidoaren biskositatea gasarena baino askoz txikiagoa denez, kromatografia likidoaren zutabea oro har lodiagoa da eta luzera gas kromatografia zutabearena baino askoz txikiagoa da zutabearen presioa murrizteko. HPLC aplikazio ugaritan erabiltzen da, analisi kuantitatibo eta kualitatiboen ia eremu guztietan.

Gas-kromatografia helioa edo argona bezalako gasak garraiolari gisa (fase mugikorra deitzen zaio) eta nahaste-lagina zutabean betegarriarekin injektatzen duen (fase geldikorrekoa) bereizteko metodo bat da. Banatutako osagaiak seinale elektriko bihurtzen ditu detektagailu batek eta grabagailu batek grabatzen ditu.

Fluido superkritikoko kromatografia (SFC) prozesu kromatografiko bat da, fase mugikor gisa fluido superkritiko bat erabiltzen duena bereizketa eta analisia egiteko fase mugikorraren disolbatzaile-gaitasunean oinarrituz. 1980ko hamarkadan garatu eta hobetu den teknologia berria da. Fluido superkritikoen kromatografia baino errazagoa da zutabeen eraginkortasun handiagoa lortzea kromatografia likidoa.

a) Adsortzio-kromatografia

b) Partizio-kromatografia

c) Ioi-kromatografia

d) Tamaina baztertzeko kromatografia

e) lotura-faseko kromatografia

f) Afinitate-Kromatografia

a) Adsortzio-kromatografiaren fase geldikoa adsorbatzailea da, eta kromatografiaren bereizketa-prozesua adsorbatzailearen gainazalean egiten da, fase geldikorraren barnean sartu gabe.

b) Partizio-kromatografian, fase mugikorra zein geldikoa likidoak dira. Lagin-molekulak azkar iristen dira bi fase likidoen arteko oreka-partizioa eta bereizten dira bi faseetako osagaien zatiketa-koefizienteen diferentzia erabiliz, erauzketa-prozesu baten antzekoa dena.

c) Ioi-trukearen kromatografiak normalean ioi-trukeko erretxina bat erabiltzen du fase geldikor gisa. Orokorrean, lagin-ioiak fase geldikorreko ioiekin modu itzulgarrian trukatzen dira, eta kromatografiaren bereizketa osagai ioi bakoitzaren truke-ahalmen desberdinen ondorioz lortzen da.

a) Presio handia. Fase mugikorra likidoa da, zutabetik igarotzean erresistentzia handia jasaten duena. Zutabetik azkar pasatzeko, presio handia aplikatu behar zaio eramailearen likidoari.

b) Abiadura handia. Azterketa azkarra eta garraiatzaile fluidoaren fluxu azkarra, likido kromatografia klasikoa baino askoz azkarragoa. Normalean, lagin bat 15 eta 30 minututan aztertzen du, eta lagin batzuk 5 minututan ere osa daitezke. Analisi-denbora ordu 1 baino txikiagoa izan ohi da.

c) Eraginkortasun handia. Bereizketa eraginkortasun handia. Fase geldikorra eta fase mugikorra hauta daitezke bereizketa efektu onena lortzeko, hau da, destilazio industrialaren zutabeen eta gas-kromatografiaren bereizketa-eraginkortasuna baino askoz ere handiagoa.

Fase mugikor gisa likidoa erabiliz, fase geldikoa hainbat forma izan daiteke, hala nola papera, plaka meheak eta ohe beteak.

Gurea interesatzen bazaizu HPLC zutabe-berogailua edo zalantzaren bat baduzu, idatzi mezu elektroniko bat helbide honetara [posta elektroniko bidez babestua], ahalik eta azkarren erantzungo dizugu.