Pipetak eta pipeta puntak laborategi askotan likidoen bolumen espezifikoak transferitzeko eta neurtzeko erabiltzen dira. Pipetek zehaztasun mekanikoa dute egituran eta pipeta punta gainera, esanahi bera dauka laginarekin kontaktuan jartzen den pipeta zatia delako. Aholku okerrak aukeratzeak zehaztasun eza, kutsadura edo lagina galtzea dakar, non esperimentuetan zehaztasun handia behar den.
Pipeta puntak mota desberdinak dira eta bereziak daude pipeta puntak zenbait zailtasun gainditzeko, hala nola likido likatsuak, likido bolumen txikiak eta likido toxikoak. Beraz, oso garrantzitsua da pipeta-punta espezialitate egokia erabiltzea, emaitza onenak lortu ahal izateko.
Laborategian izan litezkeen zailtasun batzuetara egokitzeko garatzen diren pipeta-puntak daude.
Pipeta-puntuen espezialitate motak
Hona hemen gehien erabiltzen diren espezialitate-aholku batzuk eta egokienak diren proiektuak:
Atxikipen baxuko pipeta puntak
Atxikipen baxuko pipeta-puntak likidoa puntaren barruko hormetara itsasteko modu berezian egindako puntak dira. Esaterako, ohikoa da gainazaleko estaldura hidrofoboa erabiltzea ezkerreko likidoaren kantitatea minimizatzeko eta lagina ia osorik lortzeko. Aholku mota hau bereziki lagungarria da:
- Likido likatsuak: Pipetaren puntetara atxikitzen diren materialetako batzuk glizerola, entzimak edo bestelako likido likatsuak dira. Material hauek ondo banatzen dira atxikipen baxuko punten bidez.
- Bolumen txikiak: Mikrolitro eskalan egiten diren esperimentuetan, hondakin kopuru txiki batek emaitzan desberdintasun handiak eragin ditzake. Aholku hauek atxikipen baxua ahalbidetzen dute eta, beraz, zehaztasuna hobetzen dute ia likido guztiak ontzian utzita.
Iragazi pipeta puntak
Pipeta-puntetan iragazki-puntetan zigilu bat dago, pipetarekin kontaktuan jartzen den aerosol eta likido kopurua murrizten lagunduko duena. Horrek lantokian substantzia arriskutsuak edo pozoitsuak manipulatzeko egokiak bihurtzen ditu. Iragazkien aholkuen erabilera arruntak hauek dira:
- PCR eta qPCR: Aplikazio hauek DNA kopiatzea dakar eta, beraz, kutsaduraren aurrean oso zaurgarriak dira. Iragazkien puntek lagin batetik bestera DNA duten aerosolen interferentziak saihesten dituzte.
- Lagin erradioaktiboak edo toxikoak: Iragazki-puntuek, batez ere, erabiltzailea eta haren inguruko eremua aerosol arriskutsuetatik babesteko funtzioa betetzen dute pipetan substantzia arriskutsuak erabiltzean.
Zabaleko pipeta puntak
Pipeta-puntak zulo handiago batekin egiten dira, erraz moztu edo bildu daitezkeen laginetarako, hala nola zelulak, DNA edo proteinak. Aholku hauek laginaren tentsio mekanikoa murrizten dute. Aplikazioak honako hauek dira:
- Zelula-kulturak: Zelula esekidurak pipetatzean zelula batzuk beti mozten dira eta hori zelula-zenbaketa edo egiten ari den esperimentu motan ikusten da. Aholkuek zulo zabala dute ebakidura-indarrak minimizatzeko, prozeduran zehar zelulak kaltetzen ez dituzten neurrian.
- Genomika: Hori dela eta, zulo zabaleko puntak DNA zati handiak edo moztutako DNA genomikoa garraiatzeko erabil daitezke, haiek partekatu gabe.
Gel-kargatzeko pipeta puntak
Gel-kargatzeko puntak puntak luze eta meheak dira, elektroforesi-prozesurako gelan laginak kargatzeko bereziki erabiltzen direnak. Punta hauek diametro txikia dute, laginak agarosa edo poliakrilamida gelen putzuetan behar bezala pipetatzea ahalbidetzen duena. Aplikazio nagusiak hauek dira:
- DNA eta RNA elektroforesia: Laginak putzu txikietara transferitzen ari den bakoitzean, kontu handiz ibili behar da eta gelak kargatzeko aholkuak erabiltzeak laguntzen du lagina zuzenean dagokion putzura isurtzen dela ondoko putzuetara isuri gabe.
- Proteina gelak: Proteinen analisian, gelari aplikatu beharreko proteina kantitatea oso garrantzitsua da elektroforesi prozesua amaitu ondoren banda argiak lortzeko.
Luzera zabaleko pipeta-puntak
Pipeta-punta hauek ohikoak baino apur bat luzeagoak dira; 15 ml edo 50 ml-ko zentrifuga-hodietan barne ontzi sakonetan erabiltzen dira. Punta hauek ez dute lagina kutsatzen, pipeta-puntak ez baitu hodiaren hormak ukitzen. Aplikazio arruntak honako hauek dira:
- Putzu sakoneko plakak: Esaterako, putzu sakoneko plakek muturrak putzuaren hondora iristeko aukera ematen dute ondoko putzuetan sartu gabe.
- Bolumen handiko zentrifuga-hodiak: Aholku luzeak dira, hodi handien hondotik likidoak aspiratu eta banatzeko oso erabilgarriak direnak, nahitaez hodiak kutsatu beharrik gabe.
Pipeta-aholku espezialitate egokiak hautatzea
Puntu batzuk kontuan hartu behar dira aplikazio baterako pipeta-punta egokia aukeratzeko. Honako hauek dira erabakia hartzeko baliagarriak izan daitezkeen alderdi batzuk.
Lagin mota
Beraz, garrantzitsua da ulertzea tratatzen ari zaren likidoaren edo laginaren izaerak definitzen duela erabili beharreko punta mota. Laginak nolabait likatsuak edo likatsuak direnean, atxikipen baxuko aholkuak egokiak dira erabiltzeko. Zelula esekidura delikatuak izateko, zulo zabaleko puntek pipetatze prozesuan zelulak ez direla kaltetzen ziurtatzen dute.
Bolumen-eskakizunak
Laginaren tamainak azterketa batean erabili beharreko aholku motak ere adierazten ditu. Bolumen baxuko pipeteatzeko, adibidez, biologia molekularrean edo genomikan, erabilitako puntek eraldaketa txikia izan behar dute. Bolumen handietarako, hau da, zelula-kulturan euskarri-bolumen handiak edo beste soluzio batzuk mugitzean, punta arruntak, esate baterako, estandarrak edo luzera luzatuak aproposak dira.
Kutsadura-arriskua
Adibidez, PCR edo zelula-kulturetan kutsadura gurutzatua badago iragazkien aholkuak ondo etortzen dira. Pipetaren gainean sartzen diren aerosol kopurua murrizten dute eta laginen garbitasuna bermatzen dute.
Pipeta-aholku espezialitateak erabiltzeko praktika onak
Zure pipeta-puntu espezialitateei onena atera ahal izateko, kontu handiz ibili behar duzu likidoak nola maneiatzen dituzun. Jarraian, teknika hobetzen eta emaitza egokiak lortzen lagunduko dizuten aholku batzuk dituzu:
Aurretik busti ezazu punta
Azken lagina aspiratu behar da pipeta-punta aurrez bustita duela gutxienez bat edo bi aldiz laginak hartu baino lehen. Horrek punta barruan lurruntzea ezabatzen du eta kantitatea zulo batetik bestera transferentzia zehatza bermatzen du.
Tasa koherentean lan egin
Ziurtatu fluidoak aspiratzeko eta banatzeko abiadurak berdinak izan behar direla. Prozesu oso delikatuak dira eta ezin dira abiadura handian egin, honek burbuilak eta zipriztinak sortuko baititu eta horrek neurketa okerrak eta laginak galtzea ekarriko du.
Eutsi pipeta bertikalki
Likidoak pipetatzerakoan, pipeta posizio bertikalean edukitzea gomendatzen da, pipetaren puntan bolumen zuzena sartu dela ziurtatzeko. Beste modu bat da pipetaren mugimenduak nolabaiteko zehaztasunik eza sor dezakeela neurketan eta, beraz, zehaztasuna eragiten duela.
Ondorioa
Pipeta-punta bereziak bereziki onuragarriak dira laborategiko aplikazio jakin batzuetan. DNA laginak edo zelula-kulturak, ingurumenarentzat edo gizakientzat arriskutsuak diren produktu kimikoak direla, badago kutsadura murrizten eta zehaztasuna bermatzen duen espezialitate-puntu bat. Artikulu honetan, espezialitate-aholku ezberdinen berri emango zaizu eta laborategian pipetaren zehaztasuna eta abiadura hobetzeko onuragarriak izan daitezkeen.
Maiz egiten diren galderak
Q1: Nola funtzionatzen dute iragazkien aholkuek PCRn?
Iragazkien aholkuek astiro-astiro pipetatzea ahalbidetzen dute, pipetak egitean gerta daitezkeen zipriztinak saihestuz; horrela, lagin batean dagoena, hau da, DNA, ez da beste lagin batera transferitzen.
2.G.: Gela kargatzeko pipeta-puntak berrerabil daitezke?
Gel-kargatzeko puntak ez dira berriro erabili behar, lagin batetik bestera kutsadura gurutzatua egongo delako. Oso garrantzitsua da gogoratzea lagin bakoitza punta berri batekin bakarrik egin behar dela, hau da, kutsadura gurutzatua saihesteko.
3.G.: Nola ziurta daiteke pipeta-puntak erabiltzen dituzunean puntak antzuak direla?
Aholkuak modu aseptiko batean gorde behar dira eta mundu ideal batean ez dira aholkuak maneiatu behar antzutasuna arriskuan jartzeko.