ANTITECK - Laborategiko ekipamendua, industria automatizazioa, moldaketa medikoa eta giltza eskuan irtenbidea ematea.
kromatografia-zutabea

Kromatografia Zutabea

Laborategian erabiltzen den kromatografia-zutabea

Zer da kromatografia-zutabea?

ioi-truke-kromatografia
Zutabe kromatografikoa paketatutako zutabeetan eta hodi irekiko zutabeetan bana daiteke. Gehienak zutabe kromatografikoak metalezko edo beirazkoak dira. Hodi zuzenak, kiribildutako hodiak, U itxurako hodiak eta beste forma batzuk daude. Kromatografia likidoa normalean pilatutako zutabeak erabiltzen ditu. Zutabe kromatografikoen bereizketa-efektua aukeratutako fase geldiaren araberakoa da, baita zutabeen prestaketa eta funtzionamendu-baldintzen araberakoa ere.

kromatografia bereizteko eta analisirako bitarteko bat da, eta bereizketa da muina, beraz, bereizketaz arduratzen den zutabea sistema kromatografikoaren bihotza da. Eskakizunak zutabe kromatografikoa zutabe-eraginkortasun handia, selektibitate ona, analisi-abiadura azkarra, etab. HPLCrako komertzialki eskuragarri dauden partikula-bilketa ugari daude, hala nola, silize porotsua eta silizean oinarritutako loturiko fasea, alumina, polimero organikoen mikroesfera (ion truke erretxinak barne), karbono porotsua. , etab., bere partikulen tamaina, oro har, 3,5,7,10μm, etab. izan arren, zutabearen eraginkortasunaren balio teorikoa 5 ~ 160,000 / m-ra irits daiteke. Azterketa orokorrak plaka kopuruaren 5000 zutabe-eraginkortasuna baino ez du behar; homologoen analisia 500 izan daiteke; material bikoteak bereizteko zailtasun gehiago erabil daitezke 20,000 zutabe arte. Hori dela eta, 10 ~ 30 cm inguruko zutabeen luzera nahikoa da nahaste konplexuak aztertzeko.

Zutabearen eraginkortasuna zutabearen barruko eta kanpoko faktoreek eragiten dute, eta zutabearen eraginkortasun onena lortzeko, zutabearen kanpoaldeko bolumen hil txiki batez gain, zutabe egitura zentzuzko bat (paketatutako ohetik kanpo hildako bolumena gutxituz) eta kargatzeko teknologia. beharrezkoak dira. Kargatzeko teknika onena izanda ere, zutabearen erdiko zatian eta hormaren zatian betetzea beti desberdina da. Hormaren ondoan dagoen zatia solteagoa da, lubaki-fluxua ekoizteko errazagoa eta fluxu-abiadura azkarragoa da, eta horrek garbiketa-agentearen fluxu-formari eragiten dio eta banda espektrala zabaltzen du, hau da, hormaren efektua. Hodiaren horma-eremu hau hodiaren hormatik barrurantz zenbatutako partikulen tamainaren lodiera baino 30 aldiz handiagoa da. Kromatografia likidoko sistema orokor batean, zutabetik kanpoko efektuak zutabearen eraginkortasunean duen eragina hodiaren hormaren eragina baino askoz handiagoa da.

Nahiz eta kargatzeko teknika onena izan, zutabearen erdiko zatian eta hormaren zatian betetzea beti desberdina da. Hormaren ondoan dagoen zatia solteagoa da, lubaki-fluxua ekoizteko errazagoa eta fluxu-abiadura azkarragoa da, eta horrek garbiketa-agentearen fluxu-formari eragiten dio eta banda espektrala zabaltzen du, hau da, hormaren efektua. Hodiaren horma-eremu hau hodiaren hormatik barrurantz zenbatutako partikulen tamainaren lodiera baino 30 aldiz handiagoa da. Kromatografia likidoko sistema orokor batean, zutabetik kanpoko efektuak zutabearen eraginkortasunean duen eragina hodiaren hormaren eragina baino askoz handiagoa da.

Kromatografia-zutabearen egitura

anioi-truke-kromatografia
Zutabe kromatografikoa zutabe-hodi batek, presio-txapelak, ferrula (zigilatzeko eraztuna), bahe-plaka (iragazkia), juntadura, torlojuak eta abar ditu. zutabe-hodi gehienbat altzairu herdoilgaitzezkoa da, eta presioa 70 kg/cm2 baino handiagoa ez denean, horma lodiko beira edo kuartzozko hodiak ere erabil daitezke, eta hodiaren barruko hormak akabera maila handia behar du. Zutabe efektua hobetzeko eta hormaren efektua murrizteko, altzairu herdoilgaitzezko zutabeen horma leuntzeko. Fluorozko plastikoz estalitako altzairu herdoilgaitzezko zutabeen horman jendea ere badago barruko hormaren akabera hobetzeko, efektua leuntzearen berdina da. Silice fundituaren edo beirazko estalduraren erabilera ere badago, hodi finetako zutabeetarako. Zutabe kromatografikoaren bi muturretako zutabe-junturak bahe-plaka bat dute barruan, altzairu herdoilgaitzezko edo titaniozko aleazio sinterizatua 0.2~20μm (5~10&μm) irekidura duena, betegarriaren partikulen tamainaren arabera. betegarria isuri ez dadin.

Zutabe kromatografikorako bilgarriak

Zutabeen bilketa arrunta: karbono 18 zutabea [1] (ODS/C18), karbono 8 zutabea (MOS/C8), karbono 6 zutabea (Hexyl/C6), karbono 4 zutabea (Butyl/C4), karbono 1 zutabea (Metil/C1). ), anioi-trukearen zutabea (SAX), katioi-trukearen zutabea (SCX), fenilo-zutabea (feniloa), amino zutabea (Amino/NH2), zianuroan oinarritutako zutabeak (Cyano/CN/Nitrilo).

Adsortzio-zutabeen bilketa arrunta: silize gel zutabea.

Kromatografia-zutabe mota

Zutabe kromatografikoa analitiko eta prestatzaileetan banatu daitezke, haien erabileren eta tamaina ezberdinen zehaztapenen arabera, honela.

a. Ohiko zutabe analitikoa (zutabe konstantea), barne-diametroa 2 ~ 5 mm (normalean erabiltzen da 4.6 mm, etxeko 4 mm eta 5 mm), zutabearen luzera 10 ~ 30 cm.

b. Diametro estua zutabea (zulo estua, hodi finaren diametroa zutabea, erdi-mikrozutabea), barne diametroa 1 ~ 2mm, zutabearen luzera 10 ~ 20cm.

c. Zutabe kapilarra (mikrozutabea ere deitzen zaio), barne-diametroa 0.2 ~ 0.5 mm.

d. Zutabe erdi-prestatzaileak, barruko diametroa >5mm.

e. Laborategia prestatzeko zutabeak barne-diametroa 20~40mm-ko eta zutabearen luzera 10~30cm-koa.

f. Produkzioa prestatzeko zutabeen barne-diametroa zenbait hamarnaka zentimetrora irits daiteke. Zutabearen barne-diametroa, oro har, zutabearen luzeraren, paketatzearen partikulen tamainaren eta tolestutako emariaren arabera zehazten da, hodiaren horma efektua saihesteko helburuarekin.

Kromatografia-zutabearen erabilera

katioi-truke-kromatografia

Ioi-trukearen kromatografia

A. Instalazioa

a. Lehenik eta behin, zutabearen eta tresnaren konektoreak eta hoditeria bat datozela baieztatu beharko zenuke. Hildako bolumena murrizteko, erabili injekzio-balbularen, zutabearen eta detektagailuaren arteko konexiorako ahalik eta barne-diametro txikiena duen lerroa, eta kontrolatu injektorearen, zutabearen eta detektagailuaren arteko konexio-lerroaren luzera. Zutabea instalatu aurretik, egiaztatu fluxu-bide sistemako disolbatzailea ondo dagoela. Lagin konplexuagoak aztertzeko, babes-zutabe bat instalatzea gomendatzen da.

b. Zutabearen eta tresna-sistemaren arteko konexio onena egiteko, zutabearen interfazearekin bat datorren torloju-tapa eta konektore konikoduna erabiltzen saiatu behar duzu. Jatorrizko konektorea beste zutabe mota batzuekin parekatu bada denbora luzez, gomendagarria da zutabe berria konektatu aurretik bat etortzea egiaztatzea, zutabeari kalterik ez eragitea edo zutabeak ez-egokitzeak eragindako ihesak ez sortzeko.

c. Erabili osagarri unibertsalak, eskuz bakarrik estutu behar direnak giltza zehatzik gabe, 5000 psiko presioa erabiliz; tenperaturaren erabilera ez da 100 ℃ baino handiagoa izan behar.

B. Fase mugikorra

a. Erabili a fase mugikorra zutabearen bolumena gutxienez 20 aldiz zutabea guztiz orekatzeko laginaren detekzioa egin aurretik. Erabili beti maila kromatografikoko disolbatzaile bat fase mugikorrerako. Fase urtsua erabiltzen baduzu, egunero prestatu behar da fresko mantentzeko bakterioen ekoizpena saihesteko.

b. Fase mugikorra mintz mikroporotsu batetik iragazi behar da erabili aurretik, fase mugikorreko partikulen sistema kromatografikoan eta zutabean kalteak ezabatzeko. Buffera berriro iragazi behar da beste fase mugikor batzuekin nahastu ondoren, disolbagarritasunaren aldaketek eragindako prezipitazio berriak ekiditeko. Ur purua ez da erabili behar C18 zutabea garbitzeko fase mugikor gisa, zutabearen errendimenduari kalterik ekiditeko (zutabea garbitzeko % 5 disolbatzaile organikoa gehitzeak buffer gatza garbitzeko efektua lor dezake aldi berean. (Ere egin daiteke). zutabea erraztu orekatzeko).

c. Fase mugikorra desgasifikatu eta erabili behar da aire-burbuilen ondorioz ponparen eta detektagailuaren funtzionamendu okerra ekiditeko. Saiakuntzan erabilitako fase mugikorra zutabearen kontserbazioan erabiltzen den fase mugikorrarekin alderatuta nabarmen desberdina bada, orekatu egin behar da gainbanaketa modua erabiliz. Saihestu zutabea eta tresna-sistema kaltetzea, fase mugikorraren bat-bateko aldaketen ondorioz, zutabearen presioaren gehiegizko igoera eragiten dutenak edo fase mugikorreko buffer-gatzen kristalizazioa. Fase arrunteko zutabeek oreka-denbora luzeagoa behar dute alderantzizko faseko zutabeek baino.

C. Laginak prestatzea

a. Ahal den guztietan fase mugikorrarekin elkar disolbagarria den disolbatzaile batean disolbatu behar da lagina. Besterik zehaztu ezean, zutabearen bereizmena murriztu egingo da lagina disolbatzeko disolbatzaile indartsua erabiltzen bada.

b. Laginaren soluzioa aldez aurretik iragazi behar da orratz-iragazkia erabiliz lagina elikatu aurretik. Fase mugikorren konposizioaren maiz aldaketek zutabeen eraginkortasunaren murrizketa azkartuko dute.

c. Zutabe kromatografikoa presio handiko homogeneizazio metodo baten bidez kargatzen da eta presio handia jasan dezake. Bereizketa efektu onena lortzeko, mesedez, ez gainditu 200 kgf erabiltzean, eta saihestu bat-bateko presio igoera edo aldaketa bat-batean, bestela, silize-ontzien suntsipena eragingo du eta zutabearen bizitza murriztuko du. Funtzionamendu-tenperatura maximoak ez du 60 °C-tik gorakoa izan behar bestela eskatzen ez bada.

D. Gorde eragiketa

a. Fase mugikorrak azidoak edo gatz ez-organikoak baditu, lehenik eta behin ur deionizatuarekin garbitu behar da (zutabearen bolumena 20 aldiz). Ondoren, zutabea % 100 azetonitriloarekin edo metanolarekin kontserbatzen da. Azkenik, zutabea bere junturarekin zigilatu eta ingurune egonkor batean gorde.

b. Zutabearen eragin mekaniko zuzena edo erorketa saihestu behar da zutabearen errendimenduaren degradazioa saihesteko.

E. Zutabe kromatografikoen birsorkuntza

Zutabeak zutabearen bolumenaren 20 aldiz baliokide den disolbatzaile batekin garbitu ziren hurrengo hurrenkeran, eta zutabearen geziaren norabidean garbitzea gomendatzen da, ahal izanez gero atzera bota gabe. Garbiketan erabilitako disolbatzaileen erreferentzia-sekuentzia ura, metanola, kloroformoa eta isopropanola dira.

Nola erosi kromatografia-zutabea?

ANTITECK ematen laborategiko ekipoak, laborategiko kontsumigarriak, bizitza zientzien sektoreko ekipamenduak fabrikatzeko.
Gurea interesatzen bazaizu kromatografia zutabea edo zalantzaren bat baduzu, idatzi mezu elektroniko bat helbide honetara [posta elektroniko bidez babestua], ahalik eta azkarren erantzungo dizugu.


    Cookieak erabiltzen ditugu gure webgunean ahalik eta esperientzia onena eskaintzeko. Gune hau erabiltzen jarraituz gero, cookieen erabilera onartzen duzu.
    Onartu
    Pribatutasun politika