Zelulen Kultura Platera

Edukia
1. Zer da zelula-hazkuntzako platera?
    1.1 Zelula-hazkuntzako plateraren zehaztapena
2. Zelula-hazkuntzako plater mota
3. Zelulen hazkuntzako plateraren erabilera
4. Zelula-kultur plateraren aplikazioa
    4.1 Azalera tratatzeko teknologia, hazkuntza-plakekin
    4.2 Zelula-hazkuntzako platera mikrobiologian
5. Nola erosi zelula-kulturako platera?

Zelulen hazkuntzako platera mikrobio- edo zelula-hazkuntzarako erabiltzen den laborategiko ontzia da, hondo lau baten antzeko disko batez eta tapa batez osatua, normalean beiraz edo plastikoz egindakoa. Petri plateren materialak bi kategoriatan banatzen dira, batez ere plastikoa eta beira, beira landare-materialerako erabil daiteke, mikrobio-kultura eta animalia-zelulen horma-kultura ere erabil daiteke. Plastikozkoak polietilenozkoak izan daitezke, eta botatzeko eta erabilera anitzekoak daude, bakterioak inokulatzeko, zedarritzeko eta bereizteko laborategiko eragiketetarako egokiak, eta landare materialak hazteko erabil daitezkeenak.

Jatorriz 1887an diseinatu zuen Julius Richard Petri (1852-1921), Robert Koch alemaniar biologoaren agindupean lan egiten zuen bakteriologoak, eta horregatik ere ezagutzen da ".Petri kaxa". Petri plakak hauskorrak eta hauskorrak dira, beraz, arretaz eta kontu handiz garbitu eta jarri behar dira. Hobe da platerak erabili ondoren garbitzea eta leku seguru eta finko batean gordetzea kalteak eta hausturak saihesteko.

Zelulen hazkuntzako platera epidemiak prebenitzeko estazioetarako, ospitaleetarako, produktu biologikoetarako, elikagaien industriarako, farmazia industriarako eta bakterioak isolatzeko eta hazteko beste unitateetarako, mikrobioen aurkako potentzia probarako eta proba kualitatiboetarako azterketa egokia da. Nekazaritzan, uretako eta bestelako ikerketa zientifikoak haziak ile-hortzak, landareak, intsektuak, arrain-espezieak eta eklosio-ikerketetarako erabiltzen dira. Industria elektronikoa edo ontzi gisa erabiltzen diren beste industria batzuk.

a. -ren erabilera ezberdinen arabera Petri plakak banatzen daiteke sartu zelula-hazkuntzako platerak bakterioen hazkuntzako platerak.

b. Fabrikazio-material ezberdinen arabera, zelula-kulturako platerak banatzen dira Kultura plastikoko platerak beira-kulturako platerak, baina inportatutako kultura platerak eta botatzeko kultura-platerak material plastikoak dira.

c. Tamainaren arabera, zelula-hazkuntzako platera 35mm, 60mm, 90mm eta 150mm diametroko plateretan bana daiteke.

d. Banaketa ezberdinen arabera, zelula-hazkuntzako platera 2 zatitako kultura plater batean bana daiteke, 3 zatitako kultura plater batean, etab.

e. Zelula-hazkuntzako platerak bi kategoriatan banatzen dira materialari dagokionez, plastikoa eta beira. The beirazko hondoko kultur platerak landare-materiala, mikrobio-hazkuntza eta animalia-zelulen aplanazio-kulturarako erabil daiteke, etab. Plastikozko zelula-hazkuntzako platerak gehienbat polietilenozkoak dira eta botatzeko eta erabilera anitzekoetan banatzen dira. Bakterioen inokulazio, delineazio eta bereizketa laborategiko eragiketetarako egokiak dira, eta landare-materialen hazkuntzarako ere erabil daitezke.

a. Zelulen hazkuntzako platera Erabili aurretik garbitu eta desinfektatu egin behar da, zelula-hazkuntzako plateren garbitasunak edo bestelakoak lanean eragin handiagoa duelako, eta horrek kultura-euskarriaren pH-an eragina izan dezake, eta produktu kimiko batzuk egonez gero, bakterioen hazkuntza galarazi dezakete.

b. Erosi berria zelula-hazkuntzako platerak ur beroarekin garbitu behar da lehenik, ondoren azido klorhidrikoaren % 1 edo 2 masa-frakzioko soluzio batean jarri ordu batzuetan material alkalino librea kentzeko, eta, ondoren, bi aldiz garbitu ur destilatuarekin.

c. Bakterioak landatu nahi badituzu, zelula-hazkuntzako plater bat jarri behar duzu presio handiko lurrunarekin (oro har 6.8 * 10 edo 5 aldiz Pa presio handiko lurrunarekin), 30 minutuko esterilizazioa 120 ℃-ko tenperaturan, giro-tenperaturan jarria lehortzeko. , edo bero lehor esterilizazioarekin, hau da, Petri kaxa labean jartzen da, tenperatura kontrola 120 ℃ inguruko kasuan 2 ordu mantentzeko, bakterio-zelulen begiak hil ditzakezu.

d. Esterilizatuta bakarrik zelula-hazkuntzako platerak inokulazio-kulturarako erabil daiteke.

Denean zelula-hazkuntzako platera ur-lurrun gehiago sortzen du, ur-lurruna estalkian kondentsatu eta ur-tantak sortuko dira. bada petri kaxa karratua da, ur tantek koloniak sakabanatu egingo dituzte, beraz, kolonia handi bat kolonia txiki askotan sakabana daiteke, eta horrek arazo handiak eragingo ditu bakterioen kulturan eta zenbaketari. Hori dela eta, euskarria gainean eta estalkia behean dagoela, ur tantak ez dira tantaka kolonietara isuriko.

Tratamendua kultur plakak kolageno desnaturalizatuarekin hainbat zelulen hazkuntza hobetzen du, hala nola, zelula epitelialek atxikitzeko duten gaitasuna. Kolageno desnaturalizatua estaltzen da auto-erauzitako kolagenoaren edo komertzialki saltzen diren ordezkoen (adibidez, Akamu, sigma, Thermo Fisher, etab.) disoluzio bat laborantza-plateran, gero soberan dagoen soluzioa aspiratu eta hondarra lehortzen utziz.

Kolagenoa gel desnaturalizatzaile gisa ere erabil daiteke, txitoaren enbrioi-ganglioen bizkarrezurreko ganglioen hazkunde sinaptikoa, ugatz-zelulen, amaren, gibeleko zelulen, gibeleko zelulen eta beste zelula epitelial batzuen hazkuntza eta bereizketa morfologikoa onartzen duena, eta beste ehunen espezifikoen adierazpena sustatzen duena. zelula isolatuetan funtzionatzen du, hiru dimentsioko (3D) zelula-hazkuntza tekniketan erabili ohi direnak. Kolagenoa medio batekin diluitzen da 1:10 proportzioan. Erabilitako kolageno-kopurua gradienteen esperimentuen bidez probatu daiteke zelula desberdinetarako kontzentraziorik onena lortzeko, eta gero pH-a 7.4ra doitzen da. Kolageno likidoa gel bihurtzen da, beraz, diluitzea eta banatzea azkarra izan behar da. Hobe, hazkuntza-medioa gelari gehitu ondoren, 4-4 orduz 24 °C-tan utziko da, zelulak gehitu aurretik gelak medioarekin oreka sortu nahi duela ziurtatzeko. Denbora horretan, fibronektina edo laminina bezalako proteina gehigarriak ere gehi daitezke.

Becton Dickinson-en matrize gelak bezalako matrize komertzialek, oro har, laminina, fibronektina eta proteoglikanoa dituzte, laminina ugariena izanik. Matrizeko beste produktu batzuk laminina F, haptoglobina, azetil heparina sulfatoa, EHS Natrix, ECL eta Cell-tak dira. Produktu horietako batzuen osaera kimikoa ez da erabateko determinazioa, baina araztua izan da; beste batzuk, ezaugarritzeko zailak diren substratuen nahasketak dira eta hazkuntza-faktore lotesle batzuk ere izan ditzakete. Matrize hauek erabil daitezke zelulen atxikimendua bizirauteko garrantzitsua bada eta atxikimendu horien osaera zehaztu beharrik ez badago, kulturan normalean erabiltzen diren tumore zelula-lerro batzuen kasuan bezala. Dena den, gai mekanikoak aztertzearen kasuan, matrize hauek konposizio guztiz definitu duten atxikimenduak erabiltzeko bidean tarteko etapa gisa soilik erabiltzen dira askotan. Hori dela eta, gero eta hedatuago dago konposizio ondo zehaztua eta garbitasun handiko laginak, hala nola gelatina eta kolagenoa, hiru dimentsioko (3D) zelula-kulturarako substratu gisa erabiltzea, mekanismoak aztertzeko.

Azaleko estaldura ez-aktiboa behar bada, zelula-mota zehatz batzuetarako matrize egokia emateko geruza bakarreko zelula-kultura mota egokiak kontuan hartu daitezke.

Substratuaren estalkiek zelulen eranskinean, hazten eta bereizten laguntzen dute. Zailak diren zelula batzuek, batez ere zelula-dentsitate baxuetan hazten zailagoak, zelula biziak behar dituzte haiek mantentzeko. Adibideak zelula am multifuntzionalen (iPS) eta NK zelulen kultura dira. Neurri batean, elikadura-geruzako zelulen metabolitoen isuriagatik edo kultura-euskarrietan eragin osagarria duten jariatutako hazkuntza-faktoreengatik izan daiteke, baina baita zelulen atxikimendu-azalera optimizatzen duten produktu zelularengatik ere.

Batzuetan, operadoreek ez dute nahi zelulak zelulak hazten direnean, matrize atxiki horietan eraldatu gabeko zelulek ez baitute erraz koloniak eratzen. Esaterako, zelula ama hematopoietikoak koloniak bereizteko hazten direnean, normalean zelula ama hematopoietikoak agar gel batean inokulatzen ditugu eta dagozkion zitokinekin osatzen ditugu.

Erantsi gabeko gainazal itsasgarriaren hautaketa-sistema honek bi faktore garrantzitsu ditu.

a. Behealdean atxikitzea prebenitzea zelula-hazkuntzako platera, behin zelulak hondoari atxikita, hedapena eta aposizioaren araberako hazkundea gertatzen delako.

b. Zelulak bahitzea, zatiketaren bidez sortutako zelula alaba batu daitezen (nahiz eta atxiki ez) koloniak eratzeko. Agar, agarosa edo metilzelulosa dira gaur egun gehien erabiltzen direnak. Lehenengo biak gelak dira eta bigarrena oso likatsua den sol bat. Metilzelulosa zelulak poliki-poliki hondoratu daitezkeen solutua denez, askotan kolageno geruza bat jartzen da haren azpian.

Petri plakak Biologian asko erabiltzen dira mikroorganismoak lantzeko, hala nola bakterioak, legamiak eta lizunak. Gainazal solido edo erdi-solidoetan hazten diren organismoentzat egokiena da.

Zelula-hazkuntza-euskarria normalean agar plaka bat izan ohi da, zenbait milimetrotako agar lodiko edo agarosa-geleko geruzekin, organismoak behar dituen mantenugaiak (adibidez, odola, gatza, karbohidratoak, aminoazidoak) eta nahi diren beste osagai batzuk (adibidez, koloratzaileak, adierazleak eta drogak). Agar-a eta gainerako osagaiak ur epeletan disolbatu eta erretilu batera bota hozten. Euskarria solidotu ondoren, inokulatu ("plating") organismoaren laginak.

Zelula-hazkuntzako platerak ondoren, organismoaren hazkuntzan zehar ordu edo egunez trabarik gabe uzten dira eta inkubagailu batean jar daitezke. Normalean estali edo goitik behera jartzen dira, aireko esporak kutsatzeko arriskua murrizteko.

Birus edo fago-kultura batek bakterio sorta bat Petri plakan hazi behar du lehenik, eta ondoren Petri plaka inokulu birikoaren euskarri bihurtzen da.

Petri plakak ikerketa mikrobiologikoan ohikoak diren arren, Petri plaka txikiagoak sarritan erabiltzen dira eskala handiko ikasketetarako, zeinetan Petri plaketan zelulak haztea nahiko garestia eta lan handia izan daitekeen.

Gurea interesatzen bazaizu zelula-hazkuntzako platera edo zalantzaren bat baduzu, idatzi e-mail bat info@antiteck.com helbidera, ahalik eta azkarren erantzungo dizugu.