Analizè asid amine
Ki sa ki analizè asid amine?
Yo rele enstriman ki itilize pou detèmine konpozisyon asid amine oswa kontni pwoteyin, peptides ak lòt preparasyon pharmaceutique. analizeur asid amine.
Analizè asid amine itilizasyon kromatografi echanj kasyon separasyon ak derivatizasyon apre kolòn avèk ninidrin pou analize kontni idroliza pwoteyin ak divès konpozan asid amine lib. Estrikti debaz enstriman an sanble ak HPLC òdinè a men li optimize pou analiz asid amine an detay, tankou pwoteksyon nitwojèn, tiyo inaktif, degazaj sou entènèt, gradyan elisyon, ak kontwòl gradyan tanperati kolòn.
Prensip travay analizeur asid amine
Akòz diferans ki genyen nan estrikti, asidite, polarite, ak gwosè molekilè konpozan asid amine yo, yo ka separe de kolòn echanj kasyon an. La konpozan asid amine ka eliye sekans lè l sèvi avèk tanpon ak konsantrasyon ion pH diferan, ak Lè sa a, melanje youn pa youn ak yon lòt kouran nan reyaktif ninhydrin, apre sa yo koule ansanm nan tib la reyaksyon espiral. Reyaksyon devlopman koulè a te pote soti nan yon sèten tanperati, tipikman 115 a 120 degre Sèlsiyis, sa ki lakòz fòmasyon nan yon pwodwi ble-vyolèt ak absòpsyon maksimòm nan 570 nm. Hydroxyproline reyaji ak ninhydrin pou pwodui yon pwodwi jòn ak absòpsyon maksimòm nan 440 nm.
Analizatè asid amine yo anjeneral sibdivize an de sistèm, sistèm analiz idwoliz pwoteyin (sistèm sèl sodyòm) ak sistèm analiz gratis asid amine (sistèm sèl ityòm). Pami yo, sistèm analiz asid amine gratis itilize elisyon gradyan ak sitrat sodyòm oswa ityòm nan diferan konsantrasyon ak valè pH.
Sistèm sodyòm sèl la analize jiska apeprè 25 asid amine nan yon moman, ki pi vit epi ki gen pi bon dwat debaz. Sistèm sèl ityòm analize jiska apeprè 50 asid amine nan yon moman, ak vitès li pi dousman ak debaz la jeneralman pa osi bon ke sistèm sèl sodyòm lan.
Klasifikasyon analizeur asid amine
Analiz woutin asid amine refere a analiz de 20 pwoteyin-idrolize asid amine ak plis pase 40 asid amine gratis. Depi entwodiksyon li an 1958, la analizeur asid amine li te kontinyèlman mete ajou ak pyès ki nan konpitè modèn ak lojisyèl e kounye a li te devlope nan ekipman tès woutin otomatik ki esansyèl pou analiz asid amine nan manje modèn, manje, bioteknoloji, medikaman ak sante, ak endistri syans lavi.
Analizatè asid amine ka divize an de kalite dapre separasyon yo ak metòd deteksyon.
Premye kalite a se metòd klasik la ki baze sou separasyon kolòn echanj kasyon ak detèminasyon fotometrik derive ninidrin apre kolòn — kromatografi kolòn echanj iyon (IEC). Kalite metòd sa a te resevwa Pri Nobèl an 1972 epi li se estanda entènasyonal ak nasyonal la osi byen ke metòd abitraj ak metòd ki gen rapò ak etranje jodi a.
Dezyèm kategori a se tout metòd segondè-pèfòmans likid chromatografi (HPLC) ki baze sou ranvèse-faz chromatografi separasyon, pre-kolòn derivatization, fluoresans oswa UV deteksyon, ak iyon chromatografi (IC) metòd ak deteksyon anperometri dirèk nan separasyon anion-echanj.
Konparezon karakteristik metòd analiz asid amine
| IEC | HPLC | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| Prensip | Separasyon echanj kation, pòs-kolòn ninhydrin derivatization fotometrik detèminasyon | Kwomatografi likid segondè-pèfòmans, derivatizasyon pre-kolòn, detèminasyon metòd fotometrik | |||
| Réactif dérivé | Ninidrin | PITC | OPA | FMOC | AQC |
| Entèferans substrate | / | WI | WI | WI | WI |
| Depase reyaktif | Non entèferans | Bezwen retire | Non entèferans | Bezwen retire | Non entèferans |
| Detektè | Limyè vizib | UV | Fluorescent | Fluorescent | Fluorescent |
| Limit deteksyon | 3p a 50p mol | 50p mol | 1-5p mol | 1p mol | 3p mol |
| Advantage | Metòd la se matirite ak serye, ak avantaj ki genyen nan pi bon estabilite, repwodibilite, ak linearite pase metòd la HPLC, pa gen okenn entèferans matris, lavi kolòn long, ak kapasite nan analize 43 asid amine nan yon sèl fwa. | Enstriman an se multifonksyonèl e li gen yon sansiblite segondè nan kèk asid amine, ak yon tan analiz kout. | |||
| Dezavantaj | Kondisyon pèfòmans-wo pou machin nan tout antye, ki mande gradyan doub nan konsantrasyon ak tanperati kontwòl pwograme. Espesyalizasyon enstriman. | Estabilite nan reyaksyon derivatizasyon ak pwodwi yo souvan detounen pa matris ak reyaktif depase. Estabilite, repwodibilite, linearite, ak fyab nan metòd la pa bon jan sa yo ki nan metòd la ninhydrin. Kout lavi kolòn. Reyaktif derivasyon yo jeneralman chè ak metòd la se teknikman mande. | |||
An jeneral, IEC siperyè HPLC, ak enstriman IEC a se yon dedye otomatik analizeur asid amine.
Aplikasyon analizeur asid amine
Otomatik analizeur asid amine
A. Aplikasyon nan endistri famasetik la
Selil rechèch fizyoloji selil se inite debaz aktivite lavi a. Li konpoze de plizyè kalite pwoteyin, ak kontni an nan pwoteyin ak konpozisyon an ak kontni nan asid amine nan yo varye ak diferan kondisyon fizyolojik. Se poutèt sa, nan etid la nan fizyoloji selil, li nesesè analize pwoteyin asid amine nan selil la ak yon analizeur asid amine.
Nan laboratwa byochimik, analiz asid amine se nesesè yo etidye konpozisyon an ak estrikti nan pwoteyin ak mekanis nan aksyon anzim.
B. Aplikasyon nan Agrikilti
Lè kiltive bon varyete rekòt, li nesesè yo konsidere gwo sede ak adaptabilite nan tè a, imidite, klima, elatriye Li enpòtan tou pou konsantre sou amelyore kontni an nan pwoteyin. asid amine nan grenn.
Ajoute asid amine nan manje ka akselere pwodiksyon, kidonk itilize nan analizeur asid amine detèmine kontni an nan asid amine ka ede ajiste fòmil la oswa ajoute aditif manje.
Akòz polisyon nan anviwònman an pa pestisid, devlopman nan pestisid ki pa polisyon te resevwa gwo atansyon. Nan dènye ane yo, itilize nan asid amine kòm matyè premyè pou rechèch pestisid te fè gwo pwogrè, e kounye a, gen èbisid ki fèt ak glisin. Nan devlopman pestisid pou devlopman asid amine matyè premyè, itilize nan analizeur asid amine ede fè anpil analiz asid amine.
C. Aplikasyon nan endistri alimantè a
Nan amelyore pwosesis manje ak devlope nouvo pwodwi, devlopè yo dwe pran an kont valè nitrisyonèl ak bon gou nan manje a. Ak bon gou nan manje ki gen rapò ak asid amine, tankou asid glutamik ak asid methylik yo asid, sèl sodyòm li yo tounen, pandan y ap glisin ak alanin yo dous. Valè nitrisyonèl manje a sitou detèmine pa pwoteyin ak asid amine, kidonk li enpòtan pou mezire kontni asid amine yo nan pwosesis manje.
Nan amelyorasyon pwosesis, analiz asid amine bezwen konpare anvan ak apre amelyorasyon pwosesis pou detèmine si nouvo pwosesis la posib. Nan pwodiksyon jijman nouvo pwodwi yo, analizeur asid amine yo bezwen tou pou detèmine kantite asid amine nan nouvo pwodwi a pou detèmine valè nitrisyonèl li yo ak bon gou. Anplis de sa, fòtifikasyon manje tou mande pou ajoute asid amine nan manje a, kidonk analiz asid amine yo ta dwe tou fèt.
D. Aplikasyon nan endistri kwi a
Dousè ak rezistans nan kwi yo gen rapò ak kantite idroksiprolin li genyen, kidonk analizeur asid amine yo bezwen nan rechèch la nan pwosesis la bwonzaj detèmine kantite a nan idroksiprolin ak lòt asid amine.
E. Aplikasyon nan domèn eksplorasyon petwòl
Kontni asid amine nan wòch lwil oliv se youn nan done enpòtan pou detèmine richès depo lwil oliv, kidonk analizeur asid amine yo souvan itilize yo detèmine kontni an nan asid amine nan wòch lwil oliv nan rechèch devlopman petwòl.
Analizè asid amine itilize
Slideshare analizeur asid amine
A. Tretman echantiyon an
Pou detèminasyon an nan divès kalite kontni asid amine gratis nan echantiyon, enpurte grès yo ka retire ak Lè sa a, dirèkteman analize sou kolòn nan.
Pou detèminasyon an nan konpozisyon asid amine nan pwoteyin, echantiyon an dwe idrolize pa asid pou pwoteyin nan konplètman transfòme nan asid amine anvan yo analize sou kolòn nan.
B. Analiz echantiyon
Echantiyon yo trete yo chaje sou kolòn nan pou analiz. Kantite echantiyon yo dwe chaje sou kolòn nan detèmine pa sansiblite otoanalyzer yo itilize a. Anjeneral, li se apeprè 0.1μ mol nan chak asid amine, ak pwa sèk nan echantiyon idrolize a se sou 0.3 mg. Detèminasyon an dwe fèt nan pH 5-5.5, 100 ° C, ak tan reyaksyon an se 10-15 min.
Materyèl koulè wouj violèt ki kapab lakòz yo mezire kolorimetrik nan 570 nm. Konpoze jòn ki kapab lakòz yo mezire kolorimetrik nan 440 nm. Li pran sèlman apeprè 1 èdtan pou fè yon plen analiz asid amine. Plizyè douzèn echantiyon yo ka chaje nan enstriman an an menm tan ak analize otomatikman nan sekans, epi done yo bay yo kalkile otomatikman nan fen an. Degre enstriman an se ±1 a 3%. Separasyon ak detèminasyon asid amine pa kolòn echanj kasyon.
Prekosyon
a. Enstriman an gen yon pwosedi preparasyon 15 minit apre li fin limen l. Faz sa a sèvi sitou pou enstriman an otomatikman mete estati fonksyònman ak paramèt chak konpozan, teste estati kominikasyon estasyon travay la ak chak konpozan epi mete tanperati ak presyon an, kidonk pa mete fen nan pwosesis sa a atifisyèlman.
b. Asid amine pwoteyolitik yo ak asid amine likid fizyolojik yo (20 ak 43) ka analize kontinyèlman sou echantiyon oto, ki otomatikman rekonèt epi anrejistre pa enstriman an san okenn operasyon adisyonèl pa itilizatè a.
c. Apre yo fin analize yon seri echantiyon, enstriman an ap kòmanse yon pwogram apre pou mentni sistèm nan otomatikman, kidonk tanpri pa fèmen pwogram sa a atifisyèlman.
d. Pwogram sik la pa defo aktive otomatikman nan mòd sibstiti pou kenbe enstriman an an bon eta. Konsomasyon reyaktif pwogram sik la piti anpil (1 ml/èdtan), kidonk itilizatè a pa ta dwe chanje paramèt sa a.
e. Enstriman an fonksyone ak yon presyon nitwojèn 0.4 bar; si presyon nitwojèn nan twò wo, enstriman an ap domaje.
f. Tcheke si presyon chemen koule elyan an ak reyaktif derive a otomatik analizeur asid amine nòmal.
g. Pou pi bon antretyen enstriman an, li rekòmande pou ajoute youn oubyen de pwosedi netwayaj oubyen netwaye sistèm nan manyèlman anvan pwogram apre chak pakèt echantiyon.
h. Si enstriman an mete sou kote tanporèman, li rekòmande pou retire kolòn nan epi rense tiyo enstriman an nan yon gwo vitès, epi ranpli tiyo a ak 40% alkòl izopropilik.
i. Ranje konsantrasyon enjeksyon an se 0.4-4 nmol. Akòz gwo sansiblite machin nan, si konsantrasyon enjeksyon an twò wo, rezilta analiz yo ap afekte epi reaktè a ap fasil pou bouche.
Ki jan yo achte analizeur asid amine?
Si ou enterese nan nou an Analizè asid amine oswa ou gen nenpòt kesyon, tanpri ekri yon imèl bay info@antiteck.com, nou pral reponn ou pi vit ke posib.