HPLC Kolòn Chofaj
Ki sa ki aparèy chofaj kolòn HPLC?
Moun ki souvan fè analiz faz likid dwe abitye ak la aparèy chofaj kolòn. Sa a se paske la chanm tanperati kolòn pèmèt retansyon kwomatografik ki pi estab san entèferans nan fluctuations tanperati, sa ki lakòz pi bon repwodiksyon kwomatografik. An menm tan an, li gen pi bon efikasite separasyon kwomatografik ak yon fòm pik pi simetrik ak amelyore tèm transfè mas nan ekwasyon Van Diemen. La HPLC aparèy chofaj kolòn gen avantaj ki genyen nan plasman fleksib, enstalasyon rapid, obsèvasyon fasil, ak yon konsepsyon san danje ki pa koule.
Prensip k ap travay HPLC
Konpozan yo nan melanj la yo separe ak pirifye nan la kolòn kwomatografik pa entèraksyon ak faz estasyonè ak mobil. Faz estasyonè a se yon ti materyèl patikil pore ki prezan nan kolòn kwomatografik la. Faz mobil lan se yon sòlvan oswa yon melanj de solvants ki fòse nan kolòn nan anba presyon ki wo. Se echantiyon an sou fòm piki ak yon sereng ak melanje ak faz mobil la atravè yon valv ki konekte nan bouk echantiyon an, ak eleman yo nan echantiyon an yo Lè sa a, pase nan kolòn nan nan diferan pousantaj. Akòz diferan kapasite adsorption ant eleman yo ak faz estasyonè a, chak eleman ap koule soti nan kolòn nan vire epi detektè ki apwopriye a konvèti konsantrasyon eleman an nan yon nimewo telekominikasyon pou transmisyon nan lojisyèl HPLC nan òdinatè a. Nan fen kouri a, chromatogram la disponib nan lojisyèl HPLC.
Ki sa ki se tan retansyon nan HPLC
The tan retansyon nan HPLC se tan ki nesesè pou echantiyon an koule soti nan antre nan sòti nan kolòn nan. Diferan sibstans ki sou kolòn diferan ak diferan faz mobil pral gen diferan tan retansyon, kidonk tan retansyon se youn nan paramèt ki pi enpòtan nan analiz kwomatografik.
Konpozan echantiyon separe depi nan konmansman an nan piki a nan tan an apre kolòn nan lè konsantrasyon nan eleman an nan valè a maksimòm, se sa ki, depi nan konmansman an nan piki a nan pik la nan yon eleman nan tan an kwomatografik pase lè pik la, ke yo rekonèt kòm la tan retansyon nan eleman sa a. La tan retansyon HPLC se RT eksprime, souvan an minit (min) kòm inite tan an. Tan retansyon an detèmine pa faktè tèmodinamik nan pwosesis kwomatografik la. Anba sèten kondisyon fonksyònman kwomatografik, nenpòt sibstans gen yon tan retansyon defini, ki gen menm wòl ak valè espesifik chanjman an epi yo ka itilize kòm baz pou analiz kalitatif kwomatografik.
Ou ta dwe peye atansyon sou varyasyon tan retansyon nan HPLC. Nan Separasyon HPLC, si la tan retansyon kwomatografi likid se twò kout, sa vle di ke sibstans nan separe mal kenbe sou tèt faz nan estasyonè, epi li posib entèfere ak detèminasyon an nan sibstans la yo dwe mezire pa melanje ak enpurte ki pa kenbe. Natirèlman, sa a se sèlman yon sitiyasyon komen lè w ap itilize detektè ki pa trè espesifik, tankou UV ak ELSD. Sepandan, si yo itilize yon detektè ki gen espesifikasyon segondè tankou fluoresans oswa espektometri mas, entèferans sa a pral redwi anpil oswa eskli.
Kalite kwomatografi kolòn
Kromatografi, ke yo rele tou kromatografi likid, ak analiz kromatografik, se yon metòd separasyon ak analiz ki gen aplikasyon trè laj nan chimi analitik, chimi òganik, byochimik, ak lòt domèn. Komen an metòd kwomatografik gen ladan chromatografi kolòn, chromatografi kouch mens, chromatografi likid segondè-pèfòmans, chromatografi gaz, ak chromatografi likid superkritik.
Diferan kalite kolòn kwomatografi
A. Metòd kromatografik kolòn
Orijinal la metòd kwomatografik, ki enjekte faz estasyonè a nan yon tib an vè plen ak koton oubyen filtre Papye nan bout ki pi ba a gaye poud faz estasyonè ki satire pa echantiyon an sou tèt tib an vè a epi li elye avèk faz mobil lan. Gen de metòd elisyon komen: youn se anwo-anba ki depann sou gravite sòlvan an li menm, epi lòt la se anba-anwo ki depann sou aksyon kapilè.
Genyen tou de metòd diferan pou kolekte fraksyon pi a apre separasyon. Yon metòd se aksepte solisyon an efluan dirèkteman nan fen kolòn nan, ak lòt metòd la se sèk faz estasyonè a ak Lè sa a, mekanikman separe gwoup yo endividyèl ak ekstrè molekil yo eleman pa tranpe faz nan estasyonè nan yon sòlvan apwopriye.
Kolomat kwomatografi se lajman ki itilize pou separasyon nan melanj, ki gen ladan separasyon nan pwodwi sentèz òganik, ekstrè natirèl, ak makromolekil byolojik.
B. Kromatografi kouch mens
Mens chromatografi kouch se yon metòd kwomatografi ki lajman itilize. Nan metòd kwomatografi sa a, faz estasyonè a kouvwi sou yon plak metal oswa vè pou fòme yon kouch mens, epi echantiyon an takte sou yon bout plak la ak yon tib kapilè, plim, oswa lòt zouti, apre yo fin takte fen a se. benyen nan faz mobil la ak sòlvan faz mobil la gaye sou plak la pa aksyon kapilè.
Kwomatografi kouch mens se yon metòd ki pa chè ak fasil-a-itilize ki itilize pou mezi a brit nan echantiyon ak deteksyon an nan pwosesis reyaksyon nan sentèz òganik.
C. Kromatografi likid pèfòmans segondè (HPLC)
Koulye a, nan Kwomatografi likid segondè-pèfòmans (HPLC) se youn nan metòd analiz kromatografik ki pi lajman itilize yo. Yon sistèm kromatografi likid konsiste de yon boutèy rezèvwa faz mobil, yon ponp perfusion, yon enjektè, yon kolòn, yon detektè, ak yon anrejistrè, epi konpozisyon jeneral li sanble ak kromatografi gaz. Ponp perfusion HPLC a mande yon volim perfusion ki estab e ekilibre; sistèm enjeksyon an mande yon enjeksyon pratik ak yon chanjman sere; kòm viskozite faz mobil likid la pi piti anpil pase viskozite gaz la, kolòn kromatografi likid la jeneralman pi epè epi longè li pi piti anpil pase viskozite gaz la. kolòn kwomatografi pou diminye presyon kolòn nan. Yo itilize HPLC nan yon pakèt aplikasyon, nan prèske tout domèn analiz kantitatif ak kalitatif.
D. Kromatografi gaz
Kwomatografi gaz se yon metòd separasyon lè l sèvi avèk gaz tankou elyòm oswa agon kòm gaz transpòtè (ki rele faz mobil), epi enjekte echantiyon melanj lan nan kolòn nan ak filler (ki rele faz estasyonè). Konpozan separe yo konvèti an siyal elektrik pa yon detektè epi anrejistre pa yon achiv.
E. Kromatografi likid superkritik
Kwomatografi likid sipèkritik (SFC) se yon pwosesis kwomatografik ki sèvi ak yon likid superkritik kòm faz mobil pou fè separasyon ak analiz lè w konte sou kapasite solvantizasyon faz mobil lan. Li se yon nouvo teknoloji devlope ak pèfeksyone nan ane 1980 yo. Kwomatografi likid superkritik li pi fasil pou reyalize pi wo efikasite kolòn pase chromatografi likid.
Diferans ant HPLC ak kolòn kwomatografi
Kwomatografi likid vs kwomatografi kolòn
A. Diferan kalite
a. Kromatografi likid pèfòmans segondè (HPLC)
a) Kromatografi adsorpsyon
b) Kromatografi patisyon
c) Kromatografi Ion
d) Kromatografi Esklizyon Gwosè
e) kromatografi faz lye
f) Kromatografi afinite
b. Metòd kromatografi likid
a) Faz estasyonè kromatografi adsorpsyon an se adsorban an, epi pwosesis separasyon kromatografi a fèt sou sifas adsorban an, san li pa antre andedan faz estasyonè a.
b) Nan kromatografi patisyon, tou de faz mobil ak estasyonè yo se likid. Molekil echantiyon yo byen vit rive nan patisyon ekilib ant de faz likid yo epi yo separe lè l sèvi avèk diferans nan koyefisyan patisyon konpozan yo nan de faz yo, ki sanble ak yon pwosesis ekstraksyon.
c) Kromatografi echanj iyon anjeneral itilize yon rezin echanj iyon kòm faz estasyonè. Anjeneral, iyon echantiyon yo echanje yon fason reversib ak iyon faz estasyonè yo, epi separasyon kromatografi a reyalize akòz diferan kapasite echanj chak iyon konpozan.
B. Karakteristik diferan
a. Kromatografi likid pèfòmans-wo (HPLC)
a) Gwo presyon. Faz mobil lan se yon likid, ki sibi gwo rezistans lè l ap koule nan kolòn nan. Pou l pase nan kolòn nan byen vit, yo dwe aplike gwo presyon sou likid transpòtè a.
b) Gwo vitès. Analiz rapid ak vitès koule likid transpòtè rapid, pi rapid pase kromatografi likid klasik la. Anjeneral, li analize yon echantiyon nan 15 a 30 minit, e gen kèk echantiyon ki ka menm fini nan 5 minit. Tan analiz la anjeneral mwens pase 1 èdtan.
c) Segondè efikasite. Segondè efikasite separasyon. Faz estasyonè a ak faz mobil lan ka chwazi pou reyalize pi bon efè separasyon an, ki plizyè fwa pi wo pase efikasite separasyon kolòn distilasyon endistriyèl yo ak kromatografi gaz.
b. Metòd kromatografi likid
Sèvi ak likid kòm faz mobil, faz estasyonè a ka nan divès fòm, tankou papye, plak mens, ak kabann plen.
Aplikasyon diferan
| Kwomatografi likid segondè-pèfòmans (HPLC) | Metòd chromatografik likid |
|---|---|
| Akòz avantaj ki genyen nan rezolisyon segondè, sansiblite segondè, gwo vitès, repete itilizasyon kolòn, ak koleksyon fasil konpozan efluan, segondè-pèfòmans likid kromatografi te lajman itilize nan divès domèn tankou byochimi, analiz manje, rechèch pharmaceutique, analiz anviwònman an. , ak analiz inòganik, e li te vin metòd ki pi pwomèt pou rezoud pwoblèm analiz byochimik. | Kwomatografi likid opere nan tanperati chanm epi li pa limite pa volatilité ak estabilite tèmik echantiyon an. Li se ideyal pou separasyon ak analiz sibstans ki gen gwo pwa molekilè relatif, difisil pou vaporize, pa fasil temèt oswa chalè sansib, konpoze iyonik ak polymère, ki konte pou apeprè 70% a 80% nan sibstans òganik. |
Kijan pou achte yon aparèy chofaj kolòn HPLC?
Si ou enterese nan nou an HPLC Kolòn Chofaj oswa ou gen nenpòt kesyon, tanpri ekri yon imèl bay info@antiteck.com, nou pral reponn ou pi vit ke posib.