Bwat frizè
Ki sa ki bwat frizè?
Kriyoprezèvasyon selilè se youn nan prensipal metòd prezèvasyon selilè. Lè w sèvi ak liofilizasyon teknoloji pou kriyoprezève selil nan nitwojèn likid a -196°C, selil yo ka retire tanporèman nan kwasans epi pwopriyete selilè yo ka prezève pou selil yo ka reviv pou eksperyans lè sa nesesè. Sa anpeche selil yo pèdi akòz kontaminasyon selil yo nan kilti a oswa lòt evènman inatandi epi li sèvi tou kòm yon ajan prezèvasyon selil. Lè selil yo konjele dirèkteman san okenn ajan pwoteksyon adisyonèl, kristal glas yo fòme nan dlo ni andedan selil yo ni nan anviwònman ekstèn lan, sa ki ka lakòz domaj mekanik, ogmantasyon elektwolit, chanjman nan presyon osmotik, dezidratasyon, chanjman PH, denaturasyon pwoteyin, elatriye, ki ka lakòz lanmò selilè. Se poutèt sa, lè w ap konjele epi estoke, yo ta dwe ajoute ajan pwoteksyon nan solisyon kilti a, sa ki ka bese pwen konjelasyon an. Anba kondisyon konjelasyon dousman, li ka fè dlo entraselulè a penetre soti nan selil yo anvan yo konjele. Depo nan nitwojèn likid ka diminye fòmasyon kristal glas. Nan pwen sa a, bwat frizè se yon bon chwa.
Poukisa li enpòtan pou jele selil iminitè yo?
Depo selil se ekstraksyon selil ki soti nan tisi imen oswa san atravè mwayen teknik espesyal, dirèkteman izole ak pirifye oswa apre kilti in vitro ak anplifikasyon, ki estoke nan anviwònman nitwojèn likid nan -196 ℃. Nan anviwònman tanperati ultra-ba sa a, tout reyaksyon byochimik nan selil yo sispann epi yo retire tanporèman nan eta kwasans lan, epi fonksyon ak aktivite selil yo pa afekte anpil, epi tan prezèvasyon yo ka rive nan plis pase 20 ane.
Kounye a, de kalite prensipal selil yo souvan itilize nan depo selil yo se selil souch ak selil iminitè. Pami yo, selil souch yo gen ladan selil souch ematopoyetik nan san kòd, selil souch kòd lonbrit, selil souch plasenta, selil souch adipoz, selil souch andometri, selil souch kaka dantè, elatriye; selil iminitè yo gen ladan selil iminitè san periferik ak selil iminitè nan kòd lonbrit.
Sere selil iminitè yo gen gwo siyifikasyon
A. Fè fas ak gwo ensidans kansè
Avèk gwo ensidans kansè jodi a, estoke selil iminitè yo se yon mezi pou sove lavi pou diminye risk kansè yo epi anpeche li rive an premye.
B. Fè fas ak reyalite yon sistèm iminitè ki ap bese apre pibète
Ògàn iminitè yo diminye avèk laj. Egzanp ki pi evidan an se glann timis la, ki kòmanse dejenere apre pibète, sa ki lakòz yon diminisyon nan selil T yo. Pwofesè Ryo Yasube nan Inivèsite Syans Tokyo nan Japon, ki gen lontan depi l ap etidye imunoloji, te di: "Pi gwo rezon pou bès nan iminite a se ogmantasyon nan laj." Apre iminite kò a rive nan pik li a laj 20 an, sistèm iminitè a piti piti desann avèk laj; a laj 40 an, iminite a se sèlman 1/2 nan pik li, epi a laj 70 an, li se sèlman 1/10 nan pik li. Sere selil iminitè yo ede entèveni nan pwosesis bès sistèm iminitè a.
C. Prevansyon maladi ki koze pa febli sistèm iminitè a
Devlopman anpil maladi gen yon relasyon sere avèk bès sistèm iminitè a. Akòz bès sistèm iminitè a nan vyeyès, granmoun yo gen tandans pou yo pran maladi iminodefisyans tankou enfeksyon, maladi otoiminitè, ak kansè. Se poutèt sa, gen kèk espesyalis ki konsidere vyeyès kòm yon "maladi iminitè epidemi". Youn nan konsekans grav bès sistèm iminitè a se ke "je granmoun yo" konfonn tisi oswa selil nòmal ak lènmi epi atake tisi sa yo, sa ki lakòz enflamasyon ak domaj, sa ki lakòz maladi otoiminitè tankou atrit rimatoyid ak lupus eritemato sistemik. Sere selil iminitè yo epi "ranpli" sistèm iminitè a tout tan ka ede anpeche maladi sa yo ki koze pa bès sistèm iminitè a.
D. Kontrekare aje kò a akòz n bès fonksyon iminitè a
Syantis yo dekouvri ke diminisyon fonksyon iminitè a gen rapò ak vyeyisman moun, e konsa yo pwopoze teyori iminitè vyeyisman an. Fonksyon sistèm iminitè a diminye avèk laj, epi lè li rive nan yon laj fin vye granmoun, li pa kapab rekonèt chanjman sibtil nan selil oswa molekil nan kò a, e menm si li kapab, li pa ka mobilize repons iminitè a pou retire yo efektivman. Kòm rezilta, ensidans selil malfezan yo ogmante nan vyeyès. Anplis de sa, diminisyon nan fonksyon iminitè a mennen nan yon febli nan efè estimilan sistèm iminitè a sou sistèm nève ak andokrinyen yo, sa ki lakòz yon diminisyon nan selil nè yo, pèt memwa, repons pi dousman, fonksyon estrès redwi, ak atrofi ak diminisyon fonksyon tèstikul gason yo ak ovè fi yo, pami lòt siy vyeyisman moun. Li estoke selil iminitè yo, ranplir yo lè sa nesesè, amelyore fonksyon iminitè a, touye epi retire selil malfezan yo, selil senesan yo, ak selil mouri yo, e konsa reyalize objektif anti-vyeyisman an.
Poukisa selil iminitè yo estoke nan bwat frizè?
A. Alokasyon rezonab
Periferik san iminitè selil depo yon sèl koleksyon san se jeneralman 150-200ml, apre separasyon an ak pirifikasyon nan eleman yo se sitou lenfosit, yon ti kantite monosit ak granulosit, elatriye, to an mwayèn rekiperasyon apeprè 80%, nòmal imen an. lenfosit yo jeneralman 1 × 10 ^ 6 ~ 2 × 10 ^ 6 / ml, kidonk selil iminitè final yo ka izole sou 1.5 × 10 ^ 8 ~ 3 × 10 ^ 8 8, se sa ki, 1.6 × 10 ^ 7 a 3.3 × 10 ^ 7 selil pa espesifikasyon konjelasyon tib.
Aktyèl aplikasyon teknoloji selil iminitè yo sitou gen ladan CIK, NK, NKT, CTL, CAR-T, CAR-NK, elatriye kantite selil ki nesesè pou yon aplikasyon sèl se apeprè 30 milyon dola, sa vle di, kantite tib aplikasyon an se 1 a. 2. 9 tib ka konplètman satisfè aplikasyon an kilti selil pou 3 a 4 fwa nan yon kou nan tretman an.
B. Jesyon fasil
Tib liyofilize ki gen selil yo pa ka mete dirèkteman nan nitwojèn likid epi yo bezwen yon espasè ak yon aparèy sipò nan mitan yo – yon bwat frizè. Modèl konvansyonèl la nan kasèt lyofilizasyon se yon bwat kare 9 × 9, kote 9 tib selil koresponn ak yon kolòn pou yon echantiyon, ki tou pratik pou jesyon ak itilizasyon nan lavni.
C. Redui gaspiyaj ak risk
Kapasite yon sèl tib lyofilizasyon fiks, epi twò kèk tib lyofilizasyon ka lakòz twòp selil nan yon sèl tib lè kantite selil yo aplike ki mennen nan fatra selil yo, ak selil yo ki gen twòp dansite lyofilizasyon yo nan yon eta pi pòv. apre reanimasyon ak kantite aplikasyon selil yo redwi. Twòp tib lyofilizasyon ankò fè kantite selil nan yon sèl tib ensifizan pou aplikasyon an, kidonk mande pou reanimasyon miltip, ak twòp solisyon lyofilizasyon ap mennen nan pi ba rekiperasyon epi tou fatra selil. An menm tan an, twòp tib lyofilizasyon vle di twòp kontak, ki gen tandans ogmante risk pou kontaminasyon pandan operasyon reanimasyon. Se poutèt sa, li pi bon pou aplike 1 a 2 tib pou chak reanimasyon epi fè tout itilizasyon selil yo.
Karakteristik nan bwat frizè
a. Kenbe echantiyon ou yo an sekirite
b. Jesyon echantiyon otomatik
c. Fasil pou kenbe
d. Opsyon ki pi pratik
e. Fasil pou itilize
f. Pa gen alkòl ak lòt sibstans likid
g. Pri ki pi ba konpare ak ekipman liofilizasyon ki baze sou alkòl
h. Pi gwo pousantaj rekiperasyon selilè ak viabilité selilè
i. Bon repwodiktibilite
j. Fasil pou itilize, fasil pou estandadize operasyon an
k. Diferan materyèl tankou bwat liofilizasyon plastik ak papye pou depo alontèm oswa kout tèm.
l. Idantifikasyon kote a ye sou kouvèti tout bwat liofilize yo.
m. Bwat plastik ki ka pase nan otoklav epi ki ka itilize nan yon tanperati ant -196°C ak +121°C.
n. Patisyon ak twou vantilasyon nan pati anba kasèt bwat liyofilizasyon an pou likid la ka koule ak lè a ka sikile.
o. Bay plizyè espesifikasyon, tankou 81 twou 2 pous, 100 twou 2 pous, elatriye.
Ki jan yo fè kriyoprezèvasyon selil?
Kriyoprezèvasyon selilè se yon teknik pou estoke selil nan yon anviwònman ki gen tanperati ki ba pou diminye metabolis selilè epi reyalize depo alontèm. Nan pifò liy selilè, selil yo akimile chanjman pandan y ap vyeyi epi evolye, sa ki lakòz yon "deriv kilti" fenotipik ak jenotipik, epi yon bon manipilasyon ak kondisyon konjelasyon apwopriye pandan pwosesis konjelasyon an ka diminye chanjman oswa pèt karakteristik selilè yo epi sèvi kòm yon zouti konsèvasyon selilè. Kidonk, yon konjelasyon ki kòrèk e ki reyisi jwe yon wòl trè enpòtan nan aplikasyon selil yo alontèm.
A. Kilti apwopriye ak koleksyon selilè dou
Selil yo ta dwe nan kondisyon kwasans optimal (nan faz logaritmik oswa eksponansyèl) anvan lyofilizasyon, e depreferans, mwayen an ta dwe chanje 24 èdtan anvan rekòt. Li rekòmande pou teste kilti yo pou kontaminan mikwòb yo, espesyalman mycoplasma, pou asire ke selil yo pa gen okenn kontaminasyon. Pandan koleksyon selil yo, manipilasyon eksperimantal yo ta dwe dou ke posib pou evite domaj selil yo.
B. Pwoteksyon apwopriye kont tanperati ki ba
Kounye a, teknik ki pi souvan itilize pou kriyoprezèvasyon selil yo se kriyokonservasyon nitwojèn likid, ki sitou itilize yon metòd konjelasyon dousman ak yon kantite lajan ki apwopriye nan ajan pwoteksyon pou friz selil yo epi redwi domaj nan selil yo pandan pwosesis konjelasyon an. Lè selil yo dirèkteman jele san okenn ajan pwoteksyon, dlo a andedan ak deyò selil yo pral byen vit fòme kristal glas, ki pral lakòz yon seri de reyaksyon negatif.
Polivinilpirolidòn, etilèn glikòl, metanol, ak metil asetamid se tout kriyopwotektè. Ki pi komen nan kriyoprezèvasyon selilè se dimetil silfoksid (DMSO) ak gliseròl, tou de gen ti pwa molekilè, gwo solubilite, penetre selil yo fasilman, bese pwen konjelasyon an, amelyore pèmeyabilite manbràn selilè yo nan dlo, epi sitou, yo pa siyifikativman toksik pou selil yo. Konsantrasyon abityèl DMSO a se 5 - 10% (v/v), epi konsantrasyon optimal la varye selon liy selilè a. Konsantrasyon final gliseròl nan medyòm konjelasyon an se 5 - 15%, ankò, konsantrasyon optimal la depann de liy selilè a. Pou amelyore siviv selil ki pi difisil pou konsève yo, konsantrasyon serom nan medyòm prezèvasyon an ka ogmante opsyonèlman lè w ap konjele yo. Pou yon kriyoprezèvasyon selilè ki pi rapid e ki pi estab, yon solisyon kriyoprezèvasyon selilè ta yon bon chwa. Pa gen okenn preparasyon ki nesesè, jis ajoute kantite solisyon kriyoprezèvasyon ki apwopriye a dirèkteman nan selil yo, epi ou ka gen selil ki gen gwo viabilité ak yon operasyon senp.
C. Vitès konjelasyon dousman
Konjelasyon dousman trè enpòtan pou rekiperasyon viabilité selil yo. Pou pifò selil bèt yo, yon diminisyon -1 a -3°C pa minit ap pèmèt selil yo pi byen adapte ak eta konjelasyon an. Yon metòd komen yo itilize nan pifò laboratwa jodi a se refwadisman gradyan: 30 min a 4°C, answit -20°C pandan 2 èdtan, epi konjelasyon lannwit nan yon frijidè -80°C, epi transfere tib yo nan yon tank nitwojèn likid jou kap vini an pou depo alontèm. Yon kasèt liofilizasyon selil ki ka itilize ankò ka ekonomize tan transfè selil plizyè fwa lè w mete tib liofilizasyon selil yo prepare nan kasèt la epi transfere yo nan yon tank nitwojèn likid dirèkteman apre lannwit lan nan -80°C. Kèlkeswa metòd liofilizasyon ki itilize a, li enpòtan pou transfè kote depo a fèt byen vit, epi li rekòmande pou mete tib liofilizasyon yo nan glas sèk nan yon tanperati konstan pou evite efè chanjman tanperati yo sou viabilité selil pandan transfè a.
D. Depo kontinyèl nan tanperati ki ba
Tanperati selil la ta dwe toujou kenbe anba a -130 ° C pou siviv optimal. Si tanperati depo a pa byen kontwole, to sivivan an ap diminye ak tan. Li rekòmande ke selil yo dwe estoke nan kondisyon nitwojèn likid pou yon peryòd tan ki long. Sere tank nitwojèn likid la ak ase volim nitwojèn likid la bezwen tcheke manyèlman detanzantan pou evite domaj nan selil yo akòz kondisyon depo yo.
Ki jan yo achte bwat frizè?
Si ou enterese nan nou an Bwat frizè oswa ou gen nenpòt kesyon, tanpri ekri yon imèl bay info@antiteck.com, nou pral reponn ou pi vit ke posib.