Bwat frizè

Content
1. Ki sa ki bwat frizè?
    1.1 Poukisa li enpòtan pou jele selil iminitè yo?
    1.2 Poukisa selil iminitè yo estoke nan bwat frizè?
2. Karakteristik nan bwat frizè
3. Ki jan fè kriyoprezèvasyon selil?
4. Ki jan yo achte bwat frizè?

Cryopreservation selil se youn nan metòd prensipal yo nan prezèvasyon selil yo. Lè w itilize teknoloji lyofilizasyon pou kriyoprezève selil yo nan nitwojèn likid nan -196 °C, selil yo ka retire tanporèman nan kwasans ak pwopriyete selilè yo ka konsève pou selil yo ka reviv pou eksperyans lè sa nesesè. Sa a anpeche selil yo pèdi akòz kontaminasyon selil yo nan kilti oswa lòt evènman inatandi epi li sèvi tou kòm yon ajan prezèvasyon selil. Lè selil yo dirèkteman jele san okenn ajan pwoteksyon adisyonèl, kristal glas yo fòme nan dlo tou de andedan selil yo ak nan anviwònman ekstèn, sa ki ka mennen nan domaj mekanik, elektwolit ki wo, chanjman nan presyon osmotik, dezidratasyon, chanjman PH, denaturasyon pwoteyin, elatriye, ki ka lakòz lanmò selil. Se poutèt sa, lè w konjele ak estoke, yo ta dwe ajoute ajan pwoteksyon nan solisyon kilti a, ki ka diminye pwen konjelasyon an. Anba kondisyon konjelasyon dousman, li ka fè dlo entraselilè a gaye soti nan selil yo anvan lè w konjele. Depo nan nitwojèn likid ka diminye fòmasyon nan kristal glas. Nan pwen sa a, bwat frizè se yon bon chwa.

Depo selil se ekstraksyon selil ki soti nan tisi imen oswa san atravè mwayen teknik espesyal, dirèkteman izole ak pirifye oswa apre kilti in vitro ak anplifikasyon, ki estoke nan anviwònman nitwojèn likid nan -196 ℃. Nan anviwònman tanperati ultra-ba sa a, tout reyaksyon byochimik nan selil yo sispann epi yo retire tanporèman nan eta kwasans lan, epi fonksyon ak aktivite selil yo pa afekte anpil, epi tan prezèvasyon yo ka rive nan plis pase 20 ane.

Kounye a, de kalite prensipal selil yo souvan itilize nan depo selil yo se selil souch ak selil iminitè. Pami yo, selil souch yo gen ladan selil souch ematopoyetik nan san kòd, selil souch kòd lonbrit, selil souch plasenta, selil souch adipoz, selil souch andometri, selil souch kaka dantè, elatriye; selil iminitè yo gen ladan selil iminitè san periferik ak selil iminitè nan kòd lonbrit.

Avèk gwo ensidans kansè jodi a, estoke selil iminitè yo se yon mezi pou sove lavi pou diminye risk kansè yo epi anpeche li rive an premye.

Ògàn iminitè yo diminye ak laj. Egzanp ki pi evidan se glann timis la, ki kòmanse dejenere apre pibète, ki mennen nan yon diminisyon nan selil T yo. Pwofesè Ryo Yasube nan Tokyo University of Science nan Japon, ki moun ki depi lontan etidye iminoloji, te di, "Pi gwo rezon ki fè pou n bès nan iminite a se ogmantasyon nan laj." Apre iminite kò a rive nan pik li nan laj 20, sistèm iminitè a piti piti ale desann ak laj; nan laj 40, iminite se sèlman 1/2 nan pik li yo, ak nan laj 70, li se sèlman 1/10 nan pik li yo. estoke selil iminitè ede entèvni nan pwosesis la nan n bès sistèm iminitè a.

Devlopman anpil maladi gen rapò sere ak n bès nan sistèm iminitè a. Akòz n bès nan sistèm iminitè a nan vyeyès, granmoun aje yo gen tandans fè maladi iminodefisyans tankou enfeksyon, maladi otoiminitè, ak kansè. Se poutèt sa, kèk entelektyèl konsidere aje kòm yon "maladi iminitè epidemi". Youn nan konsekans grav nan n bès nan sistèm iminitè a se ke "je yo fin vye granmoun" erè nòmal tisi oswa selil pou lènmi an ak atake tisi sa yo, sa ki lakòz enflamasyon ak domaj, sa ki lakòz maladi otoiminitè tankou atrit rimatoyid ak lupus sistemik eritematos. Sere selil iminitè yo ak "ravitaye" sistèm iminitè a tout tan ka ede anpeche maladi sa yo ki te koze pa n bès nan sistèm iminitè a.

Syantis yo te jwenn ke n bès nan fonksyon iminitè a ki gen rapò ak aje imen, e konsa yo te pwopoze teyori iminitè a nan aje. Fonksyon sistèm iminitè a diminye ak laj, epi lè li rive nan laj, li pa kapab rekonèt chanjman sibtil nan selil oswa molekil nan kò a, e menm si li kapab, li pa ka mobilize repons iminitè a pou retire yo efektivman. Kòm yon rezilta, ensidans la nan selil malfezan ogmante nan laj fin vye granmoun. Anplis de sa, n bès nan fonksyon iminitè a mennen nan yon febli nan efè stimulation sistèm iminitè a sou sistèm nève yo ak andokrin yo, sa ki lakòz yon diminisyon nan selil nè yo, pèt memwa, pi dousman repons, redwi fonksyon estrès, ak atrofi ak diminye fonksyon an. tèstikul gason ak òvèj fi, pami lòt siy moun aje. Li estoke selil iminitè yo, ranpli yo lè sa nesesè, amelyore fonksyon iminitè a, touye ak retire selil malfezan, selil senesan, ak selil mouri, epi konsa reyalize objektif anti-aje.

Periferik san iminitè selil depo yon sèl koleksyon san se jeneralman 150-200ml, apre separasyon an ak pirifikasyon nan eleman yo se sitou lenfosit, yon ti kantite monosit ak granulosit, elatriye, to an mwayèn rekiperasyon apeprè 80%, nòmal imen an. lenfosit yo jeneralman 1 × 10 ^ 6 ~ 2 × 10 ^ 6 / ml, kidonk selil iminitè final yo ka izole sou 1.5 × 10 ^ 8 ~ 3 × 10 ^ 8 8, se sa ki, 1.6 × 10 ^ 7 a 3.3 × 10 ^ 7 selil pa espesifikasyon konjelasyon tib.

Aktyèl aplikasyon teknoloji selil iminitè yo sitou gen ladan CIK, NK, NKT, CTL, CAR-T, CAR-NK, elatriye kantite selil ki nesesè pou yon aplikasyon sèl se apeprè 30 milyon dola, sa vle di, kantite tib aplikasyon an se 1 a. 2. 9 tib ka konplètman satisfè aplikasyon an kilti selil pou 3 a 4 fwa nan yon kou nan tretman an.

Tib lyofilize ki gen selil yo pa ka mete dirèkteman nan nitwojèn likid epi yo bezwen yon espas ak aparèy sipò nan mitan - yon bwat frizè. Modèl konvansyonèl la nan kasèt lyofilizasyon se yon bwat kare 9 × 9, kote 9 tib selil koresponn ak yon kolòn pou yon echantiyon, ki tou pratik pou jesyon ak itilizasyon nan lavni.

Kapasite yon sèl tib lyofilizasyon fiks, epi twò kèk tib lyofilizasyon ka lakòz twòp selil nan yon sèl tib lè kantite selil yo aplike ki mennen nan fatra selil yo, ak selil yo ki gen twòp dansite lyofilizasyon yo nan yon eta pi pòv. apre reanimasyon ak kantite aplikasyon selil yo redwi. Twòp tib lyofilizasyon ankò fè kantite selil nan yon sèl tib ensifizan pou aplikasyon an, kidonk mande pou reanimasyon miltip, ak twòp solisyon lyofilizasyon ap mennen nan pi ba rekiperasyon epi tou fatra selil. An menm tan an, twòp tib lyofilizasyon vle di twòp kontak, ki gen tandans ogmante risk pou kontaminasyon pandan operasyon reanimasyon. Se poutèt sa, li pi bon pou aplike 1 a 2 tib pou chak reanimasyon epi fè tout itilizasyon selil yo.

a. Kenbe echantiyon ou yo an sekirite

b. Otomatik jesyon echantiyon

c. Fasil pwan

d. Plis opsyon pratik

e. Fasil pou itilize

f. Gratis nan alkòl ak lòt sibstans likid

g. Pi ba pri konpare ak ekipman lyofilizasyon ki baze sou alkòl

h. Pi wo rapò rekiperasyon selil ak viabilite selil

mwen. Bon repwodiksyon

j. Fasil pou itilize, fasil pou estandadize operasyon an

k. Materyèl diferan tankou bwat lyofilizasyon plastik ak papye pou depo alontèm oswa kout tèm.

l. Kote idantifikasyon sou kouvèti tout bwat lyofilize yo.

m. Bwat plastik ki ka otoklav ak itilize nan seri tanperati a nan -196 ° C a + 121 ° C.

n. Partitions ak twou vantilasyon nan pati anba a nan kasèt bwat lyophilization la pou ekoulman likid ak sikilasyon lè.

o. Bay yon varyete espesifikasyon, tankou 81 twou 2 pous, 100 twou 2 pous, elatriye.

Cryopreservation selil se yon teknik pou estoke selil yo nan yon anviwònman tanperati ki ba pou diminye metabolis selil yo epi reyalize depo alontèm. Nan pifò liy selil yo, selil yo akimile chanjman pandan yo laj ak evolye, sa ki lakòz fenotip ak jenotip "kilti drift", ak manyen apwopriye ak kondisyon konjelasyon apwopriye pandan pwosesis konjelasyon an ka diminye chanjman oswa pèt nan karakteristik selilè epi sèvi kòm yon konsèvasyon selilè. zouti. Kidonk, konjelasyon apwopriye ak siksè jwe yon wòl trè enpòtan nan aplikasyon an alontèm nan selil yo.

Selil yo ta dwe nan kondisyon kwasans optimal (nan faz logaritmik oswa eksponansyèl) anvan lyofilizasyon, e depreferans, mwayen an ta dwe chanje 24 èdtan anvan rekòt. Li rekòmande pou teste kilti yo pou kontaminan mikwòb yo, espesyalman mycoplasma, pou asire ke selil yo pa gen okenn kontaminasyon. Pandan koleksyon selil yo, manipilasyon eksperimantal yo ta dwe dou ke posib pou evite domaj selil yo.

Kounye a, teknik ki pi souvan itilize pou kriyoprezèvasyon selil yo se kriyokonservasyon nitwojèn likid, ki sitou itilize yon metòd konjelasyon dousman ak yon kantite lajan ki apwopriye nan ajan pwoteksyon pou friz selil yo epi redwi domaj nan selil yo pandan pwosesis konjelasyon an. Lè selil yo dirèkteman jele san okenn ajan pwoteksyon, dlo a andedan ak deyò selil yo pral byen vit fòme kristal glas, ki pral lakòz yon seri de reyaksyon negatif.

Polyvinylpyrrolidone, ethylene glycol, metanol, ak methyl asetamid se tout kriyoprotektan. Ki pi komen nan kriyoprezèvasyon selil yo se dimethyl sulfoxide (DMSO) ak gliserin, tou de nan yo ki gen ti pwa molekilè, solubility segondè, penetre selil yo fasil, pi ba pwen konjelasyon an, amelyore pèmeyabilite nan manbràn selilè nan dlo, ak absoliman, yo pa siyifikativman. toksik pou selil yo. konsantrasyon abityèl DMSO se 5 - 10% (v/v), ak konsantrasyon optimal varye ak liy selil la. Konsantrasyon final la nan gliserin nan medyòm konjelasyon an se 5 - 15%, ankò, konsantrasyon optimal depann sou liy selil la. Pou amelyore siviv nan pi difisil pou konsève selil yo, konsantrasyon nan serom nan mwayen prezèvasyon an ka ogmante opsyonèlman lè w konjele. Pou kriyoprezèvasyon selil pi vit ak pi estab, yon solisyon kriyokonservasyon selil ta dwe yon bon chwa. Pa gen okenn preparasyon obligatwa, jis ajoute kantite ki apwopriye nan solisyon kriyoprezèvasyon dirèkteman nan selil yo, epi ou ka gen selil viabilite segondè ak yon operasyon senp.

Konjelasyon dousman trè enpòtan pou rekiperasyon viabilite selil yo. Pou pifò selil bèt yo, yon diminisyon nan -1 a -3 ° C pou chak minit pral pèmèt selil yo pi byen adapte yo ak eta a jele. Yon metòd komen yo itilize nan pifò laboratwa jodi a se refwadisman gradyan: 30 min nan 4 ° C, Lè sa a, -20 ° C pou 2 h, ki te swiv pa konjelasyon lannwit lan nan yon frijidè -80 ° C, epi transfere tib yo nan yon tank nitwojèn likid pwochen an. jou pou depo alontèm. Yon kasèt lyofilizasyon selil ki kapab itilize ankò ka sove tan pou transfere selil yo plizyè fwa lè w mete tib lyofilizasyon selil yo prepare nan kasèt la epi transfere yo nan yon tank nitwojèn likid dirèkteman apre lannwit lan nan -80 ° C. Kèlkeswa metòd lyofilizasyon yo itilize a, li enpòtan pou transfè kote depo a dwe fèt byen vit, epi li rekòmande pou mete tib lyofilizasyon yo nan glas sèk nan yon tanperati konstan pou evite efè chanjman tanperati sou viabilite selil yo pandan transfè a.

Tanperati selil la ta dwe toujou kenbe anba a -130 ° C pou siviv optimal. Si tanperati depo a pa byen kontwole, to sivivan an ap diminye ak tan. Li rekòmande ke selil yo dwe estoke nan kondisyon nitwojèn likid pou yon peryòd tan ki long. Sere tank nitwojèn likid la ak ase volim nitwojèn likid la bezwen tcheke manyèlman detanzantan pou evite domaj nan selil yo akòz kondisyon depo yo.

Si ou enterese nan nou an bwat frizè oswa ou gen nenpòt kesyon, tanpri ekri yon imèl bay info@antiteck.com, nou pral reponn ou pi vit ke posib.