Catalogue: Ekipman-pou-Elisa-Kit-Fabrication
Prensip la (ELISA) tès imunosorban ki lye ak anzim) se jan sa a:
Immunoassay se yon metòd ki itilize prensip rekonesans trè selektif ak espesifik ak lyezon yon antikò espesifik nan yon antijèn oswa semi-antijèn pou analize ak detèmine antikò oswa antijèn yo dwe mezire.
Nan ELISA, rekonesans iminitè fèt nan kouvwi yon plak 96-byen ak antikò ki fèt ak polistirèn ak Lè sa a, sèvi ak antikò yo rekonèt antijèn yo dwe mezire (anjeneral yon biomarker pwoteyin nan maladi, viris, bakteri, elatriye) ak adsorbing antijèn nan. soti nan solisyon an konplèks yo dwe mezire sou sifas la nan plak la 96-pi. Apre sa, antikò ak peroksidaz refor (HRP), antikò fliyoresan oswa radyo-etikèt yo itilize pou pwodiksyon siyal rekonesans la swa dirèkteman oswa endirèkteman. Finalman, konsantrasyon antijèn sib la nan echantiyon an yo dwe mezire lè l sèvi avèk enfòmasyon tankou entansite siyal ak gradyan konsantrasyon echantiyon estanda a.
Antikò a encapsulé sou yon plak 96-pou. Depi nan ELISA, plak la fèt ak polystyrène, ki gen yon bag benzèn ak résidus asid amine nan antikò a ak yon fòs gravitasyonèl ki sanble ak aksyon anpile π-π, konbine avèk efè elektwostatik ak idrofob, antikò a ka adsorbed sou sifas li. . Lè sa a, antikò ki pa adsorbe yo lave ak tanpon epi yo ajoute yon solisyon bloke ki gen jelatin oswa albumin serik bovin (BSA) pou sele pòsyon antikò ki pa lye nan plak anzim la. Objektif ajoute solisyon an fèmen se anpeche lòt pwoteyin soti nan adsorbing sou plak la 96-byen akòz efè elektwostatik oswa idrofob, sa ki lakòz fo siyal pozitif ak entèfere ak eksperyans ki vin apre yo.
Iminorekognisyon Apre kouch plak la 96-pi ak antikò, yo ajoute echantiyon an yo dwe teste ak enkube nan 37 ° C pou kèk tan, anjeneral, 1-2 èdtan. Nan moman sa a, antikò ki sou plak ki make anzim la mare nan antijèn yo dwe teste pou rekonesans espesifik. Bon jan kalite a nan antikò a se kritik isit la, kòm yon antikò bon pral mare antijèn nan espesyalman ak efikasite san yo pa afekte pa lòt eleman nan echantiyon an yo dwe teste, tankou byomolekil, pwoteyin, ak sèl inòganik.
Lave plak ki nan ELISA. Lave antijèn ki pa lye a, ajoute antikò rekonesans ki koresponn ak antijèn sa a epi kontinye enkubasyon a 37 °C pou 1-2 èdtan, epi lave antikò ki pa tache ak antijèn nan.
Pwodiksyon siyal anzim ki make anzim segondè antikò ak etikèt peroksidaz refor (HRP) ajoute pou lye nan antikò estanda a. Apre 30 minit enkubasyon, antikò segondè ki pa konjige a lave epi yo ajoute yon pwomotè koulè pou devlope koulè a. Se konsantrasyon an nan antijèn yo detèmine ki baze sou rezilta a nan devlopman koulè. Yo jeneralman kwè ke konsantrasyon nan antijèn pozitivman korelasyon ak entansite nan luminesans apre devlopman koulè.
Nan ka antijèn ki fè konpetisyon, pa egzanp, imedyatman apre adisyon antijèn yo dwe teste nan dezyèm etap la nan operasyon imunosandwiching ki anwo a, antijèn ki make anzim yo ajoute pou li fè konpetisyon ak antijèn pou fè tès la. rekonèt antikò ki sou plak ki make anzim la. Lè konsantrasyon antijèn yo dwe teste a pi wo, mwens antikò ki make anzim yo ka tache ak antikò yo sou plak anzim la, epi mwens siyal yo pral pwodiksyon. Nan fason sa a, konsantrasyon echantiyon an yo dwe teste envèsman korelasyon ak siyal la chromogenic anzim.