Catalogue: Ekipman pou Elisa Kit Faktori
Youn nan pwen kritik yo nan optimize ELISA se lave a ELISA mikroplak. etap lave plak ELISA diminye siyal background ki te koze pa antikò ki pa mare, kidonk ogmante rapò siyal-a-bri analiz la. Lave ant degre asire ke se sèlman evènman obligatwa espesifik yo kenbe, jenere yon siyal nan etap final la. Lave ensifizan ka mennen nan diferans ak background segondè, sa ki lakòz rezilta ki pa pi bon.
Lè w ap fè eksperyans ELISA, gen de fason pou lave mikroplak ELISA: metòd manyèl lave plak ELISA ak rondèl plak pou lave plak ELISA. Pa gen okenn diferans esansyèl ant de la, osi lontan ke operasyon an se nan liy ak kondisyon yo, tou de ka jwenn rezilta kòrèk ak serye.
Lave manyèl ELISA plak faktè imen se relativman gwo, eksperimantè a dwe fè eksperyans, kantite lave yo dwe ase, enpak la se pa twò gwo, ajoute kantite lajan an nan solisyon lave jis plen reyaksyon byen kòm yon limit yo anpeche bouch la pò ak anzim gratis echwe lave, pandan y ap anpeche kwa a likid ant pò a ak twou a. Li enpòtan tou pou kenbe sèk apre lave, otreman, li fasil pou lakòz fo pozitif. Apre chak lave, dousman tape plak la sèk sou papye dezenfekte, epi tape plak la vètikal pou evite enfeksyon kwa. Fòs la pa ta dwe twò vyolan pou anpeche konplèks antijèn-antikò detache; yo ta dwe itilize papye dezenfekte a yon fwa, epi yo ta dwe itilize papye absorbant ki pa fasil pou koule debri jan sa apwopriye. Konjige anzim la pa rezistan a siye, espesyalman nan tanperati ki pi wo, li gen plis chans pou yo inaktive, kidonk plak reyaksyon sèk la ta dwe tape pou diminye tan ekspoze a nan lè a otank posib, pi long la tan an, pi ba a. valè absorpsyon an.
Imèsyon
1. Aspire oswa souke sèk solisyon an reyaksyon nan la ELISA mikroplak.
2. Lave plak la yon fwa ak solisyon lave (apre yo fin ranpli pwi yo ak solisyon lave, apresa souke).
3. Tranpe, sa vle di ranpli pwi yo ak solisyon lave, mete pou 1 ~ 2 minit, souke tanzantan, tan tranpe pa ta dwe vin pi kout abitrèman.
4. Aspirasyon sèk likid la nan twou a. Aspirasyon sèk yo ta dwe bon jan, disponib ponp oswa Ponp vakyòm aspirasyon, kapab tou souke likid la nan yon sèvyèt pwòp oswa papye absòbe pat sèk.
5. Repete etap operasyon 3 ak 4, lave 3 a 4 fwa (oswa jan sa espesifye nan enstriksyon yo). Nan metòd endirèk la si background nan pi wo, ou ka ogmante kantite lave oswa pwolonje tan an tranpe.
Mikwo titrasyon plak se sitou itilize pa metòd lave imèsyon. Solisyon lave a se sitou yon tanpon net ki gen detèjan ki pa iyonik. Konbinezon polystyrène konpayi asirans ak pwoteyin se idrofob, ak detèjan ki pa iyonik la gen tou de gwoup idrofob ak idrofil, ki gen gwoup idrofob yo konbine avèk gwoup idrofob pwoteyin pa lyezon idrofob, konsa febli konbinezon an nan pwoteyin ak solid-faz konpayi asirans, ak ak konbinezon an nan gwoup idrofil ak molekil dlo, pwoteyin nan retounen nan eta a nan solisyon akeuz, epi li se konsa separe de konpayi asirans lan solid-faz.
Detèjan ki pa iyonik nan solisyon lave a se jeneralman Tween 20, konsantrasyon ki ka ant 0.05% ak 0.2%, pi wo pase 0.2%, ka fè antijèn oswa antikò an encapsulé nan desorption faz solid la epi redwi sansiblite a. tès.
Kalite flòch dlo k ap koule
Se metòd la rense dlo ap koule tankou dlo okòmansman itilize pou lave ti transpòtè chaplèt, ak solisyon an lave se sèlman dlo distile oswa menm dlo tiyo. Lè lave, yo tache yon aparèy espesyal, pou ti pèl yo kontinyèlman woule ak douch anba enpak dlo k ap koule, epi apre rense kontinyèl pou 2 minit, likid la vide, ak Lè sa a, tranpe nan dlo distile pou 2 minit epi vide. . Kalite tranpe se tankou yon beny basen, kalite rense dlo se tankou yon douch, efè lave li yo pi bon, epi tou senp, vit.
Eksperyans yo te montre ke kalite rense a aplikab tou pou lave plak mikwo titrasyon ELISA. Lè w ap lave, eseye ogmante koule dlo a oswa ogmante presyon dlo a, kite dlo a enpak sou sifas twou plak la, efè lave a pi bon.
Machin pou lave plak la lave ELISA plak ak kèk faktè imen, kondisyon rapid ak konstan, men twa pwen kle sa yo ta dwe remake lè w ap itilize machin pou lave plak la pou lave plak.
Paramèt prensipal la pou lave microplates ELISA se volim lave. Machin pou lave plak otomatik la dispanse solisyon lave a. Si ou te fè eksperyans gwo background anvan, Lè sa a, pa ezite mete volim lave a wo, de preferans pi wo pase volim anvlòp la. Twòp solisyon lave pral kite yon pòsyon nan sifas analize a san lave, kidonk siyifikativman ogmante background nan. Volim lave a dwe menm pou tout twou reyaksyon yo.
Paramèt prensipal ki afekte efikasite lave microplates ELISA se kantite sik lave yo. Natirèlman, pi wo kantite lave, pi ba background nan. Sepandan, twòp lave ka diminye entansite siyal la epi fè li difisil pou fè tès. Li se pratik komen pou repete lave a twa fwa apre chak enkubasyon antikò oswa antijèn. Sepandan, an jeneral, plak vlope mande pou mwens lave pase plak ki vlope itilizatè yo. Pou mikroplak ELISA ki kouvwi itilizatè yo, yo dwe optimize frekans lave yo.
Yon lòt fason pou kontwole kantite ak kantite lave se ajoute yon eksè solisyon lave. Tipikman, yon plak 96-pou kenbe 330 a 460 µl pou chak pi. sepandan, kèk machin pou lave plak otomatik yo ka pwograme yo dispanse pi plis pase kantite lajan sa a nan solisyon lave, pou egzanp 1 ml. ki jan li fè sa? Li se aktyèlman byen senp: se fonksyon an aspirasyon vire sou an menm tan an kòm dispans. Nan lòt mo, kòm distribitè a dispanse plis likid, aspiratè a tou souse likid la soti. Teknik sa a ogmante kantite lave, men san yo pa koule nan lòt pwi.
Genyen tou yon kantite paramèt ki afekte efikasite etap lave yon plak ELISA. Paramèt sa yo gen ladan wotè aspirasyon ak pozisyon aspirasyon, tou de yo ka ajiste pou diminye background (volim rezidyèl) ak varyasyon.
Likid rezidyèl yo gen antijèn oswa antikò ki dekonpoze, ki ogmante siyal background nan. Pi piti volim rezidyèl la, mwens likid rezidyèl gen ak likid la mwens entèfere transfere nan pwochen etap la.
Wotè aspirasyon an ka siyifikativman afekte volim rezidyèl la; si distans ki genyen ant pwent lave a ak anba a nan byen reyaksyon an se yon ti kras pi gwo, Lè sa a, volim nan rezidyèl ap ogmante dramatikman. Kontrèman, si pwent lave a bourade kont anba a nan reyaksyon an byen, Lè sa a, li pral tou fè aspirasyon an mwens efikas ak kantite lajan rezidyèl la ap ogmante.
Machin aktyèl pou lave plak ELISA jeneralman itilize de kalite tèt lave: rijid ak k ap flote. Tèt pou aspirasyon nan yon tèt lave k ap flote ka deplase libreman leve, li desann pandan pwosesis lave a, pandan y ap yon tèt lave rijid fiks nan pozisyon apwopriye. Operasyon lave ak tèt lave rijid yo pi konplike pou optimize paske ou bezwen ajiste wotè pou aspirasyon ak anpil atansyon. Si laboratwa ou a sèvi ak plizyè plak diferan, li ka pran anpil tan. Lè w ap itilize yon tèt lave k ap flote, la tip pipèt pral tonbe nan pati anba a nan reyaksyon an byen. Ajiste wotè a pa ta trè enpòtan, kidonk tèt lave a ta tonbe nan pati anba a.
Pozisyon aspirasyon an tou gen yon efè enpòtan sou volim rezidyèl la; si se sèlman yon pwen pou aspirasyon yo itilize pou chak pi (ki se komen paske li se pi vit), Lè sa a, pozisyon nan aspirasyon an bezwen optimize. Kote ki pi bon an depann de karakteristik nan tèt lave a, men li se diman nan mitan an nan reyaksyon an byen, menm si sa a se kote ki pi komen default pou tout lave. An jeneral, kote ki pi bon an se yon kote ant mitan twou a ak miray ranpa a nan twou a.
Fòm nan pwi reyaksyon yo tou afekte kantite rezidyèl la. mikroplak ki gen fòm C (fond plat ak kwen awondi) pral jeneralman gen pi ba kantite rezidyèl pase sa yo ki gen anba plat ak kwen byen file.
a. Kantite piki likid ak kantite likid rezidyèl yo ta dwe korije chak jou, ak kantite likid rezidyèl apre lave pa ta dwe pi gran pase 2 μl.
b. Ranplase zegwi aspirasyon ki kase a nan tan pou evite domaje kouch substra a.
c. Peye atansyon a ajiste wotè a gout nan tèt la aspirasyon pou manifaktirè diferan nan plak anzim pou evite zegwi a rense soti nan bloke plak la.
d. Peye atansyon a ajiste kantite solisyon lave, twòp solisyon lave pral debòde ak twò piti pa pral reyalize efè a lave.
e. Sèvi ak dlo distile pou kole tiyo a anvan ou fèmen machin nan pou evite pwoblèm nan cristalline nan solisyon lave a soti nan bloke tiyo a.
f. Li entèdi pou melanje solisyon lave diferan twous yo.
Yo nan lòd yo fè la ELISA plak lave efè pi byen, laboratwa a ka itilize yon konbinezon de machin ak metòd lave manyèl, apre yo fin lave machin nan ak Lè sa a, plak lave manyèl 1 a 2 fwa, ka reyalize efè a lave ideyal. Rezilta yo garanti!
Sèvi ak dlo distile pou kole tiyo a anvan ou fèmen machin nan pou evite pwoblèm nan cristalline nan solisyon lave a soti nan bloke tiyo a.
Li entèdi pou melanje solisyon lave diferan twous yo.
