Kolòn Kwomatografi

Content
1. Ki sa ki kolòn kwomatografi?
2. Estrikti kolòn kwomatografi
    2.1 Anbalaj pou kolòn kwomatografik
3. Kalite kolòn kwomatografi
4. Itilizasyon kolòn kwomatografi
5. Ki jan yo achte kolòn kwomatografi?

Kolòn kromatografik ka divize an kolòn chaje ak kolòn louvri-tib. Pifò kolòn kwomatografik yo fèt an metal oswa vè. Gen fòm tib dwat, fòm tib mawonnen, tib ki gen fòm U, ak lòt fòm. Kwomatografi likid anjeneral itilize kolòn chaje. Efè separasyon kolòn kwomatografik depann sou faz estasyonè ki chwazi a, ansanm ak kondisyon preparasyon ak fonksyònman kolòn yo.

Kromatografi se yon mwayen pou separasyon ak analiz, ak separasyon se nwayo a, kidonk kolòn nan, ki responsab pou separasyon an, se kè a nan sistèm nan kwomatografik. Kondisyon yo pou la kolòn kwomatografik yo se efikasite kolòn segondè, bon selektivite, vitès analiz vit, elatriye. Komèsyal ki disponib pou HPLC se yon varyete de anbalaj patikil, tankou silica ki pore ak faz ki baze sou silica, alumina, mikwosfè polymère òganik (ki gen ladan rezin echanj iyon), kabòn ki mouye. , elatriye, pandan y ap gwosè patikil li yo jeneralman 3,5,7,10μm, elatriye, valè teyorik efikasite kolòn ka rive nan 5 ~ 160,000 / m. Analiz jeneral la sèlman bezwen 5000 efikasite kolòn nan kantite plak; analiz homolog ka osi lontan ke 500; plis difikilte pou separe pè materyèl yo ka itilize jiska 20,000 kolòn. Se poutèt sa, yon longè kolòn nan apeprè 10 ~ 30cm se jeneralman ase pou analiz la nan melanj konplèks.

Efikasite kolòn afekte pa faktè andedan ak deyò kolòn nan, ak reyalize pi bon efikasite nan kolòn nan, nan adisyon a yon ti volim mouri deyò kolòn nan, yon estrikti kolòn rezonab (minimize volim nan mouri deyò kabann lan chaje) ak teknoloji chaje. yo obligatwa. Menm ak pi bon teknik loading, ranpli nan pati sant kolòn nan ak sou pati miray la toujou diferan. Pati ki toupre miray la se pi lach, pi fasil yo pwodwi koule tranche, ak vitès koule pi vit, ki afekte fòm nan koule nan ajan an rense ak elaji gwoup la espèk, ki se efè a miray. Zòn miray tib sa a se apeprè 30 fwa epesè gwosè patikil la konte soti nan miray tib la anndan an. Nan yon sistèm chromatografi likid jeneral, efè a nan kolòn nan efè sou efikasite kolòn se pi plis pase efè a nan miray la tib.

Menm ak pi bon teknik loading, ranpli nan pati sant kolòn nan ak sou pati miray la toujou diferan. Pati ki toupre miray la se pi lach, pi fasil yo pwodwi koule tranche, ak vitès koule pi vit, ki afekte fòm nan koule nan ajan an rense ak elaji gwoup la espèk, ki se efè a miray. Zòn miray tib sa a se apeprè 30 fwa epesè gwosè patikil la konte soti nan miray tib la anndan an. Nan yon sistèm chromatografi likid jeneral, efè a nan kolòn nan efè sou efikasite kolòn se pi plis pase efè a nan miray la tib.

Kolòn kromatografik konsiste de yon tib kolòn, bouchon presyon, férule (bag sele), plak Van (plak filtre), jwenti, vis, elatriye. tib kolòn se sitou te fè nan asye pur, epi lè presyon an pa pi wo pase 70 kg / cm2, ka epè-ranpa vè oswa tib kwatz ka itilize tou, ak miray ranpa a nan enteryè nan tib la mande pou yon wo degre de fini. Yo nan lòd yo amelyore efè a kolòn, epi redwi efè a miray, Nerjaveèi asye kolòn miray polisaj. Genyen tou moun ki nan miray kolòn Nerjaveèi asye kouvwi ak plastik fliyò amelyore fini nan miray enteryè, efè a se menm jan ak polisaj. Genyen tou itilize nan silica fusion oswa pawa vè, pou kolòn tib amann. Jwenti kolòn yo nan tou de bout kolòn chromatografik la ekipe ak yon plak Van andedan, ki se Sinter Nerjaveèi oswa alyaj Titàn ak yon ouvèti 0.2 ~ 20μm (5 ~ 10 & μm), tou depann de gwosè patikil filler la, nan lòd. pou anpeche filler la koule soti.

Anbalaj kolòn komen: kolòn kabòn 18 [1] (ODS/C18), kolòn kabòn 8 (MOS/C8), kolòn kabòn 6 (Hexyl/C6), kolòn kabòn 4 (Butyl/C4), kolòn kabòn 1 (Methyl/C1). ), kolòn echanj aniyon (SAX), kolòn echanj kasyon (SCX), kolòn fenil (Phenyl), kolòn amine (Amino/NH2), kolòn ki baze sou cyanide (Cyano/CN/Nitril).

Anbalaj kolòn adsorption komen: kolòn jèl silica.

Kolòn kromatografik ka divize an analyse ak preparasyon, dapre itilizasyon yo ak espesifikasyon gwosè diferan jan sa a.

a. Konvansyonèl kolòn analyse (kolòn konstan), dyamèt enteryè 2 ~ ​​5mm (souvan itilize 4.6mm, domestik 4mm ak 5mm), longè kolòn 10 ~ 30cm.

b. Kolòn dyamèt etwat (twou etwat, ke yo rele tou kolòn dyamèt tib amann, semi-mikrokolòn), dyamèt enteryè 1 ~ 2mm, longè kolòn 10 ~ 20cm.

c. Kolòn kapilè (yo rele tou mikrokolòn), dyamèt enteryè 0.2 ~ 0.5 mm.

d. Kolòn semi-preparatif, dyamèt enteryè> 5mm.

e. Kolòn preparasyon laboratwa ak dyamèt enteryè 20 ~ 40mm ak longè kolòn nan 10 ~ 30cm.

f. Dyamèt entèn kolòn preparasyon pwodiksyon an ka rive jwenn plizyè dizèn santimèt. Dyamèt enteryè kolòn an jeneralman detèmine ki baze sou longè kolòn, gwosè patikil anbalaj ak pousantaj koule ki plwaye, ak objektif pou evite efè miray tib la.

a. Premyèman, ou ta dwe konfime ke konektè yo ak kanalizasyon nan kolòn nan ak enstriman yo matche. Pou diminye volim ki mouri a, sèvi ak yon liy ki gen pi piti dyamèt enteryè posib pou koneksyon ant tiyo piki a, kolòn ak detektè a, epi kontwole longè liy koneksyon ant enjektè, kolòn ak detektè a. Anvan enstale kolòn nan, konfime ke sòlvan an nan sistèm nan chemen koule se nan lòd. Pou analiz la nan echantiyon ki pi konplèks, li rekòmande enstale yon kolòn pwoteksyon.

b. Pou fè pi bon koneksyon ant kolòn nan ak sistèm enstriman an, ou ta dwe eseye sèvi ak bouchon vis ak konektè konektè ki matche ak koòdone kolòn nan. Si konektè orijinal la te matche ak lòt kalite kolòn pou yon tan long, li rekòmande ke matche a ta dwe tcheke anvan konekte kolòn nan nouvo pou fè pou evite lakòz domaj nan kolòn nan oswa flit ki te koze pa dezakò kolòn nan.

c. Sèvi ak ekipman inivèsèl, ki sèlman bezwen sere boulon nan men san yon kle espesifik, lè l sèvi avèk yon presyon nan 5000psi; itilizasyon tanperati a pa dwe depase 100 ℃.

a. Sèvi ak yon faz mobil nan omwen 20 fwa volim kolòn nan konplètman ekilibre kolòn nan anvan ou fè deteksyon echantiyon. Toujou sèvi ak yon sòlvan klas kwomatografik pou faz mobil lan. Si ou itilize tanpon faz akeuz la ta dwe prepare chak jou pou kenbe fre pou evite pwodiksyon bakteri.

b. Faz mobil lan ta dwe filtre nan yon manbràn mikropore anvan ou itilize pou elimine domaj nan sistèm kwomatografik la ak kolòn nan patikil nan faz mobil la. Tanpon an ta dwe re-filtre apre melanje ak lòt faz mobil pou evite nouvo presipitasyon ki te koze pa chanjman nan solubility. Dlo pi pa ta dwe itilize kòm faz mobil pou rense kolòn C18 la pou fè pou evite domaj nan pèfòmans kolòn lan (ajoute 5% sòlvan òganik pou rense kolòn nan ka reyalize efè netwaye sèl tanpon an menm tan an. (Li kapab tou fè kolòn nan pi fasil pou balanse).

c. Faz mobil lan bezwen degaze epi itilize pou evite move operasyon ponp lan ak detektè akòz bul lè. Si faz mobil yo itilize nan tès la siyifikativman diferan de faz mobil yo itilize nan prezèvasyon kolòn nan, li ta dwe ekilibre lè l sèvi avèk fòm overdistribution. Evite domaj nan kolòn ak sistèm enstriman an akòz chanjman toudenkou nan faz mobil ki lakòz ogmantasyon twòp nan presyon kolòn oswa kristalizasyon sèl tanpon faz mobil. Kolòn faz nòmal mande pou yon tan ekilib pi long pase kolòn faz ranvèse.

a. Echantiyon an ta dwe fonn nan yon sòlvan ki mityèlman idrosolubl ak faz mobil la chak fwa sa posib. Sòf si sa presize, rezolisyon kolòn nan ap redwi si yo itilize yon sòlvan fò pou fonn echantiyon an.

b. Solisyon echantiyon an ta dwe pre-filtre lè l sèvi avèk yon filtè zegwi anvan ou bay echantiyon an. Chanjman souvan nan konpozisyon faz mobil ap akselere rediksyon efikasite kolòn.

c. Kolòn chromatografik la chaje pa yon metòd omojenizasyon wo-presyon epi li ka kenbe tèt ak presyon ki wo. Yo nan lòd yo jwenn efè a separasyon pi bon, tanpri pa depase 200kgf lè w ap itilize, epi evite monte presyon toudenkou oswa chanjman, otreman, li pral lakòz destriksyon nan procesna silica ak diminye lavi sa a ki sèvis nan kolòn nan. Tanperati maksimòm operasyon an pa ta dwe depase 60 ° C sof si sa nesesè.

a. Si faz mobil lan gen asid oswa sèl inòganik, li ta dwe premye rense ak dlo deyonize (20 fwa volim nan kolòn). Lè sa a, kolòn nan konsève ak 100% acetonitrile oswa metanol. Finalman, sele kolòn nan ak jwenti li yo epi estoke li nan yon anviwònman ki estab.

b. Kolòn nan ta dwe evite dirèk enpak mekanik oswa jete pou fè pou evite degradasyon nan pèfòmans kolòn.

Kolòn yo te rense ak yon sòlvan ekivalan a 20 fwa volim kolòn nan nan lòd sa a, epi li rekòmande rense nan direksyon flèch la nan kolòn nan, san yo pa backflushing si sa posib. Sekans referans solvang yo itilize nan rense a se dlo, metanol, klowofòm, ak izopropanol.

Si ou enterese nan nou an kolòn kwomatografi oswa ou gen nenpòt kesyon, tanpri ekri yon imèl bay info@antiteck.com, nou pral reponn ou pi vit ke posib.