Counter selil

Content
1. Ki sa ki kont selilè?
2. Metòd yo itilize pou konte selil yo
3. Otomatik kontwa selilè
    3.1 Itilizasyon kontwa selilè
    3.2 Aplikasyon kont selilè nan eksperyans
    3.3 Aplikasyon kont selilè nan eksperyans
4. Ki jan yo achte kontwa selilè?

Pou asire bon jan kalite a nan selil yo pou eksperyans ki vin apre, anpil laboratwa teste konsantrasyon an ak viabilite nan selil yo, tradisyonèlman pa vle di Taipan lank ble pou selil mamifè ak melanin lank pou ledven. Tou de koloran tach nwayo a, epi lè selil yo vivan, manbràn lan se oaza pèmeyab epi lank la pa ka antre nan selil la. Lè selil la mouri, pèmeyabilite selektif manbràn lan pèdi epi lank la ka antre nan nwayo a epi tach selil la. Sa a pèmèt selil yo dwe distenge kòm mouri oswa vivan. Kontwa san tradisyonèl ak operasyon konplèks la ak gwo erè yo te de pli zan pli ranplase pa kontè selil otomatik yo. Kontwa selilè gen anpil karakteristik ki asire presizyon ak estabilite rezilta konte yo.

a. Fonksyon konte debaz egzat ak rapid. Aplike plizyè teknoloji tankou rezolisyon segondè, konsantre optik otomatik, analiz milti-jaden ak gwo volim echantiyon estatistik pou asire presizyon ak repwodibilite rezilta konte yo.

b. Fonksyon inovatè koreksyon selil agglomerated. Pou selil òdinè ak selil agglomerated, diferan mòd yo prereglaj, ak fonksyon koreksyon selil inovatè agglomerated ki disponib pou selil aglomere yo.

c. Rigour koreksyon manyèl nan fonksyon enpurte. Devyasyon rezilta ki te koze pa matyè enpurte etranje ka retire manyèlman sou baz analiz lojisyèl.

d. One-stop done estatistik fonksyon analiz. Li gen yon koub pwopagasyon selil (CTC), distribisyon dyamèt selil, distribisyon nodil selil, ak analiz sipèpoze chak graf estatistik.

e. Fonksyon pwodiksyon done fleksib ak divès.

f. Fonksyon avanse pwoteksyon sekirite done. Ekipe ak yon kle sekirite operasyon lojisyèl, sistèm lojisyèl an mete privilèj itilizatè yo konekte epi estoke tout rezilta eksperyans otomatikman.

Prensip la tach se ke Tisi ble pa ka antre nan manbràn selilè entak nan selil k ap viv, kidonk selil k ap viv yo pa gen koulè; tandiske manbràn selilè selil ki mouri yo domaje epi lank la anrichi atravè manbràn selilè a pou fè selil yo ble. Sepandan, tisi ble tach pa toujou avèk presizyon distenge ant selil nwayo ak debri selilè, kidonk li gen tandans souzèstime kantite total selil yo ak ègzèstime viabilite selil yo.

Acridine zoranj/propidyòm yodide (AO/PI) prensip tach: selil vivan fliyoresan vèt ak tach AO, pandan y ap selil mouri fliyoresan wouj ak tach PI. Sa ki enpòtan, selil ki gen orijin konplèks, tankou selil mononukleè san periferik, ki gen yon gwo kantite debri selilè oswa selil nan grap yo konte, evite deteksyon an nan debri selilè. Apwòch sa a tou dènyèman te aplike nan aplikasyon genomic sèl-selil, kote vèt koresponn ak selil entak ak wouj koresponn ak nwayo izole avèk siksè. Estrateji sa a pèmèt chèchè yo kalkile pousantaj selil rezidyèl unlysed yo nan konte selil total, pandan y ap konte nwayo, sijere bon jan kalite echantiyon epi ede chèchè yo detèmine si yo kontinye ak pwosesis jenomik yon sèl selil.

Analizè selil fluoresans totalman otomatize, konbinezon chan klere + chanèl fluoresans koulè doub fè eksperyans lan pi fasil ak pi vit, epi tou li gen yon fonksyon deteksyon transfection, ki elaji lajè deteksyon an plis toujou. Deteksyon an nan yon pi gwo varyete selil se pa sèlman aplikab a selil ki senp kiltive, men tou, pèmèt konte rapid ak analiz nan espesimèn selil ki gen anpil diferan kalite ak orijin izole nan tisi, mwèl zo, san periferik, alveoli, ak fwa. Zidòl dijital fliyoresan yo te jwenn pa mikwoskòp otomatikman analize pa teknoloji etikèt fliyoresan ak teknoloji rekonesans imaj klasifikasyon pou jwenn estati selil ki mouri oswa vivan, ak apoptoz ak reyalize klasifikasyon selil yo.

a. Mòd deteksyon divès kalite: konte ki pa tach + konte tach + konte fluoresans de koulè + mòd kalibrasyon manyèl + transfection.

b. Oto-konsantre, pa gen okenn entèvansyon manyèl pou ajisteman konsantre.

c. Tablo konpayi asirans totalman otomatik: mouvman otomatik nan direksyon X ak Y ka reyalize; konfòme yo ak estanda konte mikwoskòp, 4 zòn zòn estanda yo ka kolekte otomatikman.

d. Piksèl: 10 milyon kamera koulè.

e. Deteksyon nan seri dyamèt selil: 2-200μm.

f. Mezire ranje konsantrasyon selilè: 0.25x104- 3 × 107 selil/mL.

g. Konpatib ak plak konte vè estanda ki kapab itilize ankò.

h. Akizisyon imaj: klike sou kle konte a, ak enstriman an otomatikman pran 4 imaj zòn, otomatikman konplete akizisyon an, fonksyon depo, idantifikasyon, estatistik, jenerasyon rapò, elatriye; imaj yo ka sipèpozisyon milti-chanèl, ak klète imaj yo ka ajiste.

mwen. Avèk mòd konte doub-byen: li ka otomatikman jwenn imaj yo nan selil nan de fant echantiyon sou fèy la menm konte, ak lojisyèl an otomatikman kalkile valè an mwayèn pou rezilta pi egzak.

j. Fonksyon rekonesans modèl: analiz eksklizyon fragman selil; konte selil endividyèl nan gwoup selil; konte selil iregilye; tablo analiz done yo bay ki gen ladan men pa limite a: analiz dyamèt selil; dyamèt selil vle di analiz; istogram gwosè selil; selil dyamèt-klere trase gaye; selil dyamèt-klere trase kontou; tablo koub kwasans; tablo distribisyon grap; kat rejyon selil orijinal tablo; kat rejyon selil ki mouri oswa vivan tablo idantifikasyon; kat rejyon asanblaj tablo; bay zouti pou gade devinèt, tout done istwa konte yo ka rekipere nenpòt ki lè pou wè ak trase.

Konte selilè se rechèch debaz nan rechèch kilti selil. Li se yon mwayen enpòtan pou konprann eta kwasans selil kiltive yo epi detèmine efè byolojik medya, serom, ak dwòg. Kontwa selil otomatik la ka analize selil kiltive yo nan mwens pase 1min epi jwenn konsantrasyon selilè, selil vle di gwosè volim, viabilite, gwosè selil, oswa koub distribisyon volim. Kontwa selil otomatik yo itilize tou pou alg, mikwo-òganis ak lòt òganis nan seri kontè selil dyamèt. Konpare ak metòd la plak konte selil san, la machin konte selil se pi egzak, vit ak pratik, ak erè a se pi piti.

Yo te mezire konsantrasyon selil yo nan mwayen kilti a nan diferan peryòd tan, epi yo te trase koub kwasans selil la pou detèmine tan double selil yo. Sa a se yon pati nesesè nan pwosesis kilti selil la. Chemin metabolik yo nan selil yo diferan pandan diferan peryòd kwasans.

a. Konte selilè. Lè w mezire metabolit andedan ak ekstraselilè yo, li posib pou konnen metabolit andedan ak ekstraselilè chak selil, evite erè akòz konte selil diferan nan eksperyans paralèl oswa kontwòl.

b. Viabilite selilè. Viabilite selil yo ka itilize nan eksperyans tankou eksperyans sitotoksisite, eksperyans tretman dwòg, ak eksperyans apoptoz.

c. Ou ka jwenn istogram volim selil yo pou distenge mòfoloji selil yo.

Kontwa selilè se fasil pou opere epi sèlman mande twa etap senp pou konplete detèminasyon viabilite konsantrasyon selil la.

a. Chaje echantiyon

b. Mete kontwa tablo

c. Jwenn rezilta a

Itilizatè yo sèlman bezwen echantiyon 20 mikrolit, mete plak aliye a nan enstriman an, epi klike sou kòmanse nan 20 segonn jwenn konsantrasyon ak viabilite nan selil yo.

Tout kontè ki baze sou analiz imaj bezwen jwenn imaj selil klè nan distans fokal ki kòrèk la, ak Lè sa a, fè analiz imaj pou jwenn rezilta konte. Si longè fokal la pa ajiste kòrèkteman, li pral seryezman afekte konsantrasyon an ak jijman siviv. Si longè fokal la pa byen ajiste, li pral seryezman afekte jijman lavi ak lanmò, epi afekte estabilite rezilta konte yo. Nan pwosesis pou sèvi ak kontwa selil la, pa gen okenn bezwen manyèlman konsantre, ki anpil evite enpak la nan erè distans fokal sou detèminasyon an nan lavi ak lanmò.

Lè lantiy la se byen file konsantre sou yon objè, pwen yo sou menm avyon an pèpandikilè ak aks lantiy la nan sant la nan lantiy la ka byen klè sou fim nan oswa reseptè a, ak pwen yo nan yon seri sèten sou devan an. ak dèyè nan aks lantiy la nan plan sa a kapab tou fòme pwen imaj relativman klè akseptab nan je a. Distans ki genyen ant tout objè devan ak dèyè avyon an rele pwofondè jaden kamera a.

Pwofondè nan jaden pou konte selil la se pwofondè nan sispansyon selil la ki ka byen klè imaj sou CCD la. Yon tablo kontwa tipik gen yon pwofondè nan 100-200 mikron, epi si pwofondè nan pèfòmans jaden nan lantiy la pa bon, kèk selil ki nan pwofondè nan jaden pa yo pral kapab imaj. Kontwa ideyal la ta dwe kapab visualiser tout pwofondè plak la. Sèn nan pwofondman afekte pa longè fokal, distans objè, gwosè ouvèti, ak gwosè CCD. Peze plizyè faktè, la kontwa selilè te fèt yon sistèm D ak yon gwo pwofondè nan jaden asire ke selil yo nan plak la konte yo ka byen klè foto ak ke estabilite ak presizyon nan rezilta konte yo te garanti.

Si ou enterese nan nou an kontwa selilè oswa ou gen nenpòt kesyon, tanpri ekri yon imèl bay [imèl pwoteje], nou pral reponn ou pi vit ke posib.