Ki sa ki tib kriyo?
Pou asire repwodibilite ak kontinwite rezilta yo nan rechèch ak pwosesis byomedikal, syantis yo jodi a ap fè fas ak travay la pou konsève selil k ap viv ak òganis yo ak viabilite optimal epi asire ke eleman subselilè tankou asid nikleyik ak pwoteyin yo pa chanje.
Tib kriyo, konnen tou kòm
flakon depo kriyojenik, se yon kalite espesyal tib tès. Yo ka itilize pou depo kriyojenik echantiyon, prezève echantiyon tankou san antye, serom, selil, ak sou sa. Yo jeneralman aplike nan endistri byolojik, endistri pharmaceutique, ak endistri manje kòm yon konpayi asirans pou transpò ba-tanperati ak depo materyèl byolojik.
Se pa tout tib kriyo ka itilize pou nitwojèn likid,
kriyojenik flakon pou nitwojèn likid yo fèt pou satisfè demann tanperati nitwojèn likid. Yo se kriyotib espesyal ki gen gwo sele ak rezistans ba-tanperati.
Gwosè tib kriyo
Pa gen okenn klasifikasyon espesifik nan kriyo tib, li jeneralman divize selon kapasite jan sa a:
| Gwosè tib kriyo |
| 0.5 ml flakon kriyojenik |
| 1 ml tib kriyojenik / 1 ml kriyotib |
| 1.5 ml tib kriyojenik / flakon kriyojenik 1.5 ml / tib kriyojenik 1.5 ml |
| 1.8 ml cryotube / cryotube 1.8 ml |
| 2 ml tib kriyojenik / kriyojenik 2ml / kriyotib 2ml / 2ml flakon kriyojenik / flakon kriyojenik 2ml / kriyotib 2ml |
| 4 ml tib kriyojenik |
| 5ml kriyotib / 5ml tib kriyojenik / 5 ml kriyotib / kriyotib 5ml / kriyotib 5ml |
| 7 ml tib kriyojenik |
| 10 ml tib kriyojenik |
Karakteristik nan tib kriyo
Sekirite tib kriyo
Tib kriyo se tib laboratwa yo itilize pou estoke echantiyon yo nan tanperati ki ba. Move itilizasyon kriyotib ka lakòz eksplozyon, sa ki lakòz flit nan materyèl danjere e, nan ka grav, menm blesi. Pou diminye risk pou yo kriyo tib eksplozyon, tanpri peye atansyon sou direktiv sa yo lè w ap itilize li.
a. Cryo tib se anjeneral te fè nan wo-dansite polyethylene oswa polypropylène. Li ka divize an de kategori dapre diferan senaryo itilizasyon. Youn se kriyotib pou kilti selil ak lòt la se kriyotib pou nitwojèn likid. De kalite sa yo kriyotib bezwen ak anpil atansyon distenge anvan achte ak itilize, kòm tanperati ki aplikab yo yo patikilyèman diferan.
| Kalite tib kriyo | Preferans tanperati |
| Tib kriyojenik kilti selil yo | -20℃ / -80℃ |
| Tib kriyojenik nitwojèn likid | -196 ℃ |
b. Tout
flakon kriyotib ta dwe gen yon gasket silikon, gasket kawotchou, oswa O-bag gasket asire yon sele sere. Tanpri sonje ke bouchon an twò sere ka defòme sele a.
c.
Tib kriyo yo ta dwe estoke nan faz gaz la pi wo a nitwojèn likid la epi yo pa benyen nan likid la pou fè pou evite pénétration nan nitwojèn likid la nan tib yo. Yo ta dwe evite twòp moun nan resipyan depo. Si echantiyon yo dwe estoke nan faz likid la, li rekòmande pou itilize yon manch pwoteksyon pwofesyonèl ki soti nan yon founisè serye ki bay yon sele ekstèn adisyonèl.
d. Pandan konjelasyon ak depo selil yo, tanperati konjelasyon tib yo dwe inifòm. Inegal lè w konjele pral lakòz devlopman nan ploge glas nan tib la. Ploge glas ka anpeche transfè tanperati likid sou tou de bò yo, kreye presyon danjerezman wo epi lakòz domaj nan tib la.
e. Pa jele plis echantiyon pase volim maksimòm k ap travay nan
kriyo tib limit.
f. Tout
tib kriyo gen posiblite pou eksplozyon. Espesyalman,
kriyotib itilize pou genyen echantiyon ki estoke anba nitwojèn likid ka eksploze san avètisman. Yo panse eksplozyon tib la te koze pa nitwojèn likid k ap antre nan tib la nan ti fant yo epi agrandi rapidman lè tib la dekonjle. Se poutèt sa, ekipman sekirite yo ta dwe itilize pandan tout operasyon an nan
kriyo flakon glas-soti. Ou ta dwe mete yon plak pwotèj figi, linèt, gan lou, ak yon rad laboratwa bouton sou pantalon oswa yon jip long lè w ap fè operasyon sa a. Lè w dekonjle tib kriyo yo, ou ta dwe mete yo nan yon beny dlo 37 °C imedyatman apre w fin retire yo. Lè sa a, ou ta dwe dousman souke tib la dekonjle li nan 1 minit. Fè atansyon ke dlo a pa depase kwen kouvèti tib frizè a, otreman, kontaminasyon ka rive. Akòz tanperati ki wo andedan kay la an ete, yo ta dwe pran plis atansyon lè w ap antre nan tiyo frijidè yo.
Kouvèti nan tib kriyo
Kouvèti a nan la kriyo tib se divize an de kalite - bouchon vis entèn ak bouchon vis ekstèn.
Entèn bouchon vis nan tib kriyo
Tib kriyo ak bouchon vis entèn yo itilize friz echantiyon byolojik nan nitwojèn likid. Gasket silikone nan bouch tib la amelyore sele tib la, sa ki ka efektivman sispann enfiltrasyon nitwojèn likid.
Ekstèn bouchon vis nan tib kriyo
Tib kriyo ak bouchon vis ekstèn yo itilize pou friz echantiyon nan frijidè a. Bouchon an Threaded ak bouchon vis ekstèn diminye pwobabilite pou kontaminasyon lè w ap manyen echantiyon yo.
Avantaj nan tib kriyo
a. Se bouchon an ki fèt yo dwe fasil vire ak louvri.
b. Tou de bouchon tib ak kò tib yo pwodui nan menm pakèt ak materyèl polypropylène (PP). PP se dirab ak chimik rezistan. Menm koyefisyan ekspansyon an asire yon sele tib kriyo a nan nenpòt tanperati.
c. Gwo zòn make pou ekri fasil.
d. Tib la transparan, sa ki fè li fasil pou wè echantiyon an.
e. Bouyi ak otoklav, RNase/DNase gratis, pa gen okenn sous chalè.
f. Konsepsyon anba wonn kriyotib la fasilite vide likid ak diminye rezidi yo.
Itilizasyon tib kriyo
Fonksyon an kriyotib se prezève echantiyon nan tanperati ki ba. Li gen pi bon rezistans ba-tanperati pase tib EP. Anjeneral, materyèl la vin frajil kòm tanperati a diminye, ak tanperati frajil tib la nan frizè a pi ba.
Metòd aktyèl la pou konsève selil yo pou yon tan long se friz yo nan nitwojèn likid (-196 ° C) pou jiska yon ane oswa menm plizyè ane. Pifò selil yo ka toujou grandi ak miltipliye lè yo dekonjle nan moman yo itilize yo. Pou depo apwopriye, selil yo ta dwe resisite ak kiltive apre yon ane nan lè w konjele epi yo dwe jele ankò. Ajan pwoteksyon yo ta dwe ajoute lè w konjele selil yo, otreman, dlo a andedan ak deyò selil yo pral fòme kristal glas ak lakòz domaj mekanik nan selil yo. Pwen konjelasyon an ka bese lè w ajoute yon ajan pwoteksyon. Anba kondisyon konjelasyon dousman, dlo ki andedan selil la koule soti anvan konjelasyon pou evite domaj kristal glas. Anplis de sa, yo ajoute likid kilti nan solisyon lyofilizasyon an pou bay nitrisyon, presyon osmotik ak pH. Rekiperasyon selil refere a dekonjle selil nan frizè. Selil dekonjle yo ta dwe rapid pou yo pase byen vit nan -5 ℃ a 0 ℃ ki pi vilnerab yo.
Itilize nan kriyo tib se pa yon pwosesis senp tankou premye, louvri tank la nitwojèn likid; dezyèm, mete nan tib yo; twazyèm, fèmen tank la. Gen sèten risk sekirite lè w ap itilize tib kriyo, Se konsa, itilizasyon syantifik ak kòrèk yo ka evite pèt echantiyon yo epi pwoteje sekirite pèsonèl tès yo.
Etap konjelasyon selilè yo
a. Lave selil yo ak yon solisyon PBS pre-chofe. Kouvri selil yo ak yon solisyon ki gen tripsin ak EDTA nan moman aspirasyon an, yon kouch mens likid se ase. Konsantrasyon tripsin ak EDTA bezwen detèmine dapre liy selilè a.
b. Enkube selil yo nan 37 ° C pou 3-5 minit.
c. Apre selil yo detache anba a, mete fen nan enkubasyon an. Ajoute medyòm ki gen serom epi dousman sispann selil yo ak yon pipèt.
d. Santrifize sispansyon selil la (500 xg, 5 min) epi resispann li ak yon mwayen ki gen serom.
e. Konte selilè.
f. Santrifize sispansyon selil la (500 xg, 5 min). Retire supernatant la epi repoze selil yo ak yon volim apwopriye nan mwayen ki gen serom.
g. Selil ak solisyon lyofilizasyon (60% mwayen, 20% serom fetis bovin, 20% DMSO) yo melanje nan yon rapò volim 1: 1 epi yo transfere nan tib kriyojenik. Dansite selil jele se 1-5 × 106 selil / ml.
h. Yo rekòmande tib kriyo ki gen selil yo refwadi nan yon vitès -1 K / min epi yo ka mete yo nan yon veso ki gen izopropanol nan -70 ° C. Si tib yo itilize pou estoke lòt echantiyon yo, yo ka mete yo dirèkteman nan -20 ° C, -70 ° C, oswa nan faz gaz nan nitwojèn likid. Pou asire konjelasyon inifòm echantiyon yo, yo dwe mete tib kriyo 4 mL ak 5 mL nan yon frijidè -20 ° C lannwit lan anvan ou transfere nan -70 ° C oswa nitwojèn likid nan faz gaz la.
mwen. Lè sa a, transfere tib yo nan yon tank nitwojèn likid. Pou evite kontaminasyon ak pou rezon sekirite, li pi bon pou mete tib kriyo nan faz gaz nan nitwojèn likid, pa mete yo dirèkteman nan faz likid la. (Atansyon: si ou itilize metòd depo ki pa kòrèk, nitwojèn likid ki rete nan tib kriyo a ap mennen nan eksplozyon oswa flit nan sibstans byohazardous akòz vaporizasyon.)
Etap rekiperasyon selil yo
a. Retire tib kriyo a nan nitwojèn likid ak gwo forceps epi mete l nan dlo a nan yon tanperati ki nan 37 ℃ a 42 ℃. Souke li de tan zan tan pou fè li pase nan -5 a 0 ℃ byen vit. Toujou ap souke pou fè li byen vit nan -5 a 0 ℃.
b. Nan tab la ultra-pwòp, kou kriyotib la ta dwe fwote ak yon wou abrazif ak esterilize ak boul koton alkòl. Lè sa a, louvri tib kriyo a, aspire sispansyon selil la nan yon flakon kilti, delye li nan 10 ×, epi enkube li nan yon enkibatè CO2. Nan denmen, mwayen konjelasyon an ta dwe ranplase ak yon mwayen kilti fre.
Ki jan yo achte tib kriyo?
ANTITECK bay ekipman laboratwa, laboratwa consommables, ekipman manifakti nan sektè syans lavi yo. Si ou enterese nan nou an
tib kriyo oswa ou gen nenpòt kesyon, tanpri ekri yon imèl bay
[imèl pwoteje], nou pral reponn ou pi vit ke posib.
