Kryo Tib
Ki sa ki tib kriyo?
Pou asire repwodiktibilite ak kontinwite rezilta yo nan rechèch ak pwosesis byomedikal yo, syantis yo jodi a fè fas ak travay pou prezève selil ak òganis vivan yo ak yon viabilité optimal epi asire ke konpozan subselilè tankou asid nikleyik ak pwoteyin yo pa chanje. Tib kriyo, konnen tou kòm flakon depo kriyojenik, se yon kalite espesyal tib tèsYo ka itilize pou depo kriyojenik echantiyon, prezève echantiyon tankou san konplè, serom, selil, ak sou sa. Yo jeneralman aplike nan endistri byolojik, endistri famasetik, ak endistri alimantè kòm yon transpòtè pou transpò ak depo materyèl byolojik nan tanperati ki ba.
Se pa tout tib kriyo ka itilize pou nitwojèn likid, kriyojenik flakon pou nitwojèn likid yo fèt pou satisfè demann tanperati nitwojèn likid. Yo se kriyotib espesyal ki gen gwo sele ak rezistans ba-tanperati.
Gwosè tib kriyo
Pa gen okenn klasifikasyon espesifik nan kriyo tib, li jeneralman divize selon kapasite jan sa a:
| Gwosè tib kriyo |
|---|
| 0.5 ml flakon kriyojenik |
| 1 ml tib kriyojenik / 1 ml kriyotib |
| 1.5 ml tib kriyojenik / flakon kriyojenik 1.5 ml / tib kriyojenik 1.5 ml |
| 1.8 ml cryotube / cryotube 1.8 ml |
| 2 ml tib kriyojenik / kriyojenik 2ml / kriyotib 2ml / 2ml flakon kriyojenik / flakon kriyojenik 2ml / kriyotib 2ml |
| 4 ml tib kriyojenik |
| 5ml kriyotib / 5ml tib kriyojenik / 5 ml kriyotib / kriyotib 5ml / kriyotib 5ml |
| 7 ml tib kriyojenik |
| 10 ml tib kriyojenik |
Karakteristik nan tib kriyo
Sekirite tib kriyo
Tib kriyo se tib laboratwa yo itilize pou estoke echantiyon yo nan tanperati ki ba. Move itilizasyon kriyotib ka lakòz eksplozyon, sa ki lakòz flit nan materyèl danjere e, nan ka grav, menm blesi. Pou diminye risk pou yo kriyo tib eksplozyon, tanpri peye atansyon sou direktiv sa yo lè w ap itilize li.
a. Cryo tib se anjeneral te fè nan wo-dansite polyethylene oswa polypropylène. Li ka divize an de kategori dapre diferan senaryo itilizasyon. Youn se kriyotib pou kilti selil ak lòt la se kriyotib pou nitwojèn likid. De kalite sa yo kriyotib bezwen ak anpil atansyon distenge anvan achte ak itilize, kòm tanperati ki aplikab yo yo patikilyèman diferan.
| Gwosè tib kriyo |
|---|
| 0.5 ml flakon kriyojenik |
| 1 ml tib kriyojenik / 1 ml kriyotib |
| 1.5 ml tib kriyojenik / flakon kriyojenik 1.5 ml / tib kriyojenik 1.5 ml |
| 1.8 ml cryotube / cryotube 1.8 ml |
| 2 ml tib kriyojenik / kriyojenik 2ml / kriyotib 2ml / 2ml flakon kriyojenik / flakon kriyojenik 2ml / kriyotib 2ml |
| 4 ml tib kriyojenik |
| 5ml kriyotib / 5ml tib kriyojenik / 5 ml kriyotib / kriyotib 5ml / kriyotib 5ml |
| 7 ml tib kriyojenik |
| 10 ml tib kriyojenik |
b. Tout flakon kriyotib ta dwe gen yon gasket silikon, gasket kawotchou, oswa O-bag gasket asire yon sele sere. Tanpri sonje ke bouchon an twò sere ka defòme sele a.
c. Tib kriyo yo ta dwe estoke nan faz gaz la pi wo a nitwojèn likid la epi yo pa benyen nan likid la pou fè pou evite pénétration nan nitwojèn likid la nan tib yo. Yo ta dwe evite twòp moun nan resipyan depo. Si echantiyon yo dwe estoke nan faz likid la, li rekòmande pou itilize yon manch pwoteksyon pwofesyonèl ki soti nan yon founisè serye ki bay yon sele ekstèn adisyonèl.
d. Pandan konjelasyon ak depo selil yo, tanperati konjelasyon tib yo dwe inifòm. Konjelasyon inegal ap lakòz devlopman bouchon glas nan tib la. Bouchon glas yo ka anpeche transfè tanperati likid la sou tou de bò yo, sa ki kreye presyon danjerezman wo epi ki domaje tib la.
e. Pa konjele plis echantiyon pase volim maksimòm travay la. kriyo tib limit.
f. Tout tib kriyo gen posiblite pou eksplozyon. Espesyalman, kriyotib itilize pou genyen echantiyon ki estoke anba nitwojèn likid ka eksploze san avètisman. Yo panse eksplozyon tib la te koze pa nitwojèn likid k ap antre nan tib la nan ti fant yo epi agrandi rapidman lè tib la dekonjle. Se poutèt sa, ekipman sekirite yo ta dwe itilize pandan tout operasyon an nan kriyo flakon glas deyò. Ou ta dwe mete yon plak pwotèj figi, linèt pwoteksyon, gan epè, ak yon rad laboratwa sou pantalon oswa yon jip long lè w ap fè operasyon sa a. Lè w ap dekonjle tib kriyojenik yo, ou ta dwe mete yo nan yon beny dlo 37 °C touswit apre ou fin retire yo. Apre sa, ou ta dwe souke tib la dousman pou dekonjle li nan 1 minit. Fè atansyon pou dlo a pa depase kwen kouvèti tib frizè a, sinon, kontaminasyon ka rive. Akòz tanperati andedan kay la ki wo nan sezon lete a, ou ta dwe pran plis prekosyon lè w ap jwenn aksè nan tiyo refrijerasyon yo.
Kouvèti nan tib kriyo
Kouvèti a nan la kriyo tib divize an de kalite — bouchon vis entèn ak bouchon vis ekstèn.
Entèn bouchon vis nan tib kriyo
Tib kriyo ak bouchon vis entèn yo itilize friz echantiyon byolojik nan nitwojèn likid. Gasket silikone nan bouch tib la amelyore sele tib la, sa ki ka efektivman sispann enfiltrasyon nitwojèn likid.
Ekstèn bouchon vis nan tib kriyo
Tib kriyo ak bouchon vis ekstèn yo itilize pou friz echantiyon nan frijidè a. Bouchon an Threaded ak bouchon vis ekstèn diminye pwobabilite pou kontaminasyon lè w ap manyen echantiyon yo.
Avantaj nan tib kriyo
a. Bouchon an fèt pou l fasil pou vire epi pou l louvri.
b. Tou de bouchon tib la ak kò tib la yo pwodui ak menm pakèt materyèl polipropilèn (PP). PP a dirab epi li reziste pwodui chimik yo. Menm koyefisyan ekspansyon an asire yon sele tib kriyojenik la nan nenpòt tanperati.
c. Gwo zòn pou make pou ekri fasil.
d. Tib la transparan, sa ki fè li fasil pou wè echantiyon an.
e. Ou ka bouyi l epi ou ka itilize l nan otoklav, ou pa gen RNase/DNase, ou pa gen sous chalè.
f. Desen kriyotib la ki gen yon pati anba won fasilite vide likid epi li diminye rezidi.
Itilizasyon tib kriyo
Fonksyon an kriyotib se prezève echantiyon nan tanperati ki ba. Li gen pi bon rezistans ba-tanperati pase tib EP. Anjeneral, materyèl la vin frajil kòm tanperati a diminye, ak tanperati frajil tib la nan frizè a pi ba.
Metòd aktyèl pou konsève selil yo pou yon bon bout tan se konjele yo nan nitwojèn likid (-196 °C) pou yon ane oswa menm plizyè ane. Pifò selil yo ka toujou grandi epi miltipliye lè yo dekonjele nan moman itilizasyon an. Pou yon bon depo, selil yo ta dwe resisite epi kiltive apre yon ane konjelasyon epi answit konjele yo ankò. Yo ta dwe ajoute ajan pwoteksyon lè y ap konjele selil yo, sinon, dlo ki andedan ak deyò selil yo ap fòme kristal glas epi lakòz domaj mekanik nan selil yo. Yo ka bese pwen konjelasyon an lè yo ajoute yon ajan pwoteksyon. Nan kondisyon konjelasyon dousman, dlo ki andedan selil la ap koule anvan yo konjele pou evite domaj kristal glas yo. Anplis de sa, yo ajoute likid kilti a nan... liofilizasyon solisyon pou bay nitrisyon, presyon osmotik, ak pH. Rekiperasyon selilè refere a dekonjle selil ki konjele yo. Dekonjle selil yo ta dwe rapid pou yo ka pase byen vit nan -5 ℃ a 0 ℃ ki pi vilnerab yo.
Itilize nan kriyo tib se pa yon pwosesis senp tankou premye a, louvri a tank nitwojèn likid; dezyèmman, mete tib yo; twazyèmman, fèmen tank la. Gen sèten risk sekirite lè w ap itilize tib kriyo, Se konsa, itilizasyon syantifik ak kòrèk yo ka evite pèt echantiyon yo epi pwoteje sekirite pèsonèl tès yo.
Etap konjelasyon selilè yo
a. Lave selil yo ak yon solisyon PBS ki deja chofe. Kouvri selil yo ak yon solisyon ki gen tripsin ak EDTA lè w ap aspirasyon an, yon ti kouch likid sifi. Konsantrasyon tripsin ak EDTA a bezwen detèmine selon liy selilè a.
b. Enkube selil yo a 37°C pandan 3-5 minit.
c. Apre selil yo fin detache anba a, fini enkubasyon an. Ajoute medyòm ki gen serom nan epi sispann selil yo dousman avèk yon pipèt.
d. santrifujeur sispansyon selilè a (500 xg, 5 min) epi resispann li avèk yon mwayen ki gen seròm.
e. Konte selil.
f. Santrifije sispansyon selilè a (500 xg, 5 min). Retire sipènatant la epi resispann selil yo ak yon volim apwopriye medyòm ki gen seròm.
g. Selil yo ak solisyon liofilizasyon an (60% medyòm, 20% seròm fetal bovin, 20% DMSO) melanje nan yon rapò volim 1:1 epi transfere yo nan tib kriyojenik. Dansite selil konjele yo se 1-5 × 106 selil/ml.
h. Li rekòmande pou tib kriyojenik ki gen selil yo refwadi nan yon vitès -1 K/min epi yo ka mete yo nan yon veso ki gen izopropanol nan -70°C. Si tib yo itilize pou estoke lòt echantiyon, yo ka mete yo dirèkteman nan -20°C, -70°C, oswa nan faz gaz nitwojèn likid la. Pou asire yon konjelasyon inifòm echantiyon yo, tib kriyojenik 4 mL ak 5 mL yo bezwen mete nan yon frijidè -20°C pandan tout lannwit lan anvan yo transfere yo nan -70°C oswa nitwojèn likid nan faz gaz la.
i. Apre sa, transfere tib yo nan yon tank azòt likid. Pou evite kontaminasyon epi pou rezon sekirite, li pi bon pou mete tib kriyojenik yo nan faz gaz azòt likid la, pa mete yo dirèkteman nan faz likid la. (Atansyon: si ou itilize metòd depo ki pa kòrèk, azòt likid ki rete nan tib kriyojenik la ap lakòz eksplozyon oswa flit sibstans byolojik danjere akòz vaporizasyon.)
Etap rekiperasyon selil yo
a. Retire tib kriyojenik la nan nitwojèn likid la avèk yon gwo pens epi mete l nan dlo a yon tanperati 37 ℃ a 42 ℃. Souke l detanzantan pou l ka pase ant -5 ak 0 ℃ byen vit. Souke l san rete pou l ka pase ant -5 ak 0 ℃ byen vit.
b. Nan tab ultra-pwòp la, ou dwe fwote kou tib kriyo a ak yon wou abrazif epi esterilize l ak boul koton ki gen alkòl. Apre sa, ouvri tib kriyo a, aspire sispansyon selilè a nan yon kilti. flakon, dilye li a 10×, epi enkube li nan yon CO2 kouveuzNan denmen, yo ta dwe ranplase medyòm konjelasyon an ak yon medyòm kilti fre.
Ki jan yo achte tib kriyo?
Si ou enterese nan nou an Kryo Tib oswa ou gen nenpòt kesyon, tanpri ekri yon imèl bay info@antiteck.com, nou pral reponn ou pi vit ke posib.