Ki sa ki ponp presyon ki wo yo itilize nan HPLC?
Kwomatografi likid segondè-pèfòmans (HPLC) se jeneralman konpoze de yon sistèm perfusion (ponp), sistèm piki, sistèm separasyon (kolòn), sistèm deteksyon, ak sistèm pwosesis done. Yon ponp se ekipman ki pi enpòtan pou asire operasyon nòmal HPLC enstriman an. Kantite separasyon an trè depann sou kapasite sistèm perfusion la pou reyalize yon pousantaj koule egzak ak ki estab. Pousantaj koule egzat vle di tan retansyon egzat. San yo pa koule repwodiktif ak konpozisyon nan faz mobil lan, rezilta quantitative pa ka bay. Kolòn yo itilize nan HPLC yo trè mens (1-6 mm) ak gwosè a nan faz nan estasyonè yo itilize tou piti anpil (kèk μm a dè dizèn de μm), kidonk faz mobil lan sijè a gwo rezistans nan koule nan kolòn nan. . Nan presyon atmosferik, pousantaj koule faz mobil la trè dousman, ak efikasite kolòn nan ba ak tan konsome. Yo nan lòd yo reyalize separasyon rapid ak efikas, yo dwe aplike yon gwo presyon nan faz mobil pou akselere vitès koule li yo nan kolòn nan. Pou rezon sa a, yo dwe itilize yon ponp wo-presyon pou perfusion wo-presyon.
Ponp segondè-presyon yo itilize nan HPLC se aplike presyon ki wo nan faz mobil nan pi vit koule li yo nan kolòn nan. Segondè presyon ak gwo vitès se youn nan karakteristik HPLC.
Ponp presyon ki wo yo itilize nan HPLC ta dwe ranpli kondisyon sa yo.
a. Pousantaj koule konstan, pa gen pulsasyon, ak yon seri ajisteman gwo (jeneralman 1 ~ 10 mL / min).
b. Rezistan nan korozyon sòlvan.
c. Gen yon presyon perfusion segondè.
d. Pou separasyon jeneral, yon presyon nan 60 × 10 ^ 5Pa se ase, pandan y ap pou separasyon segondè-efikasite, se yon presyon nan 150 ~ 300 × 10 ^ 5Pa obligatwa.
Prensip k ap travay nan ponp presyon ki wo yo itilize nan HPLC
Jounal
ponp presyon ki wo yo itilize nan HPLC se youn nan eleman kle yo nan enstriman an epi li divize an de kalite dapre prensip la. Youn se yon ponp koule konstan, ak lòt la se yon ponp presyon konstan.
Kèlkeswa jan rezistans nan kolòn chanje, kèlkeswa enfliyans ekstèn, pousantaj koule nan pwodiksyon an faz mobil soti nan ponp lan konstan-koule ka rete fondamantalman chanje, ki se egzakteman kondisyon debaz la pou travay la nan sistèm HPLC la.
Pwodiksyon ponp presyon konstan se fondamantalman yon presyon konstan. Nan kondisyon nòmal rezistans nan sistèm HPLC a pa chanje, kidonk presyon konstan ka reyalize koule konstan. Sepandan, kòm kolòn nan ak tanperati ka varye, li ka lakòz to koule a chanje.
Kalite ponp presyon ki wo yo itilize nan HPLC
| Ponp yo itilize nan HPLC | Deskripsyon |
| Ponp tanzantan | Ponp tanzantan ka kontinyèlman delivre yon sèten volim sòlvan jiskaske sòlvan an fin itilize, kidonk yo rele tou ponp sereng.
Sa a se kalite ponp anjeneral itilize lè yon gwo vitès koule presizyon bezwen kenbe. Ponp tanzantan gen ladan ponp sereng epi kòmanse ponp ranplasman. |
| Ponp kontinyèl | Ponp kontinyèl yo pi souvan itilize epi yo ka kontinyèlman delivre solvang. Ponp piston resipyan ak ponp dyafram idwolik fè pati sa a ki kalite ponp. |
| Double plonje ponp paralèl | Yon ponp paralèl de-plonje manje faz mobil lan kontinyèlman nan kolòn nan. Ponp lan opere ak de plonje yo 180 degre soti nan faz, ak pulsasyon ki te pwodwi pa entèraksyon an nan de plonje yo diminye pulsasyon total la. Pandan ke yon piston ap travay pou nouri faz mobil lan nan kolòn nan, lòt piston an ap travay pou trase faz mobil lan nan epi ranpli chanm ponp lan. |
| Double plonje tandem ponp | Yon ponp tandem piston doub gen yon sòlvan 2:1 nan kavite ponp prensipal ak segondè. Lè ponp segondè a manje faz mobil lan nan kolòn nan, ponp prensipal la souse likid pou ranpli kavite ponp prensipal la. Lè kavite ponp segondè a vide, ponp prensipal la pa sèlman pénétrer likid pou ranpli kavite ponp segondè a, men tou, manje faz mobil lan nan kolòn nan. |
| Resipwòk ponp piston / ponp dyafram | Ponp piston resipwòk / ponp dyafram la gen avantaj pou kenbe plonje a soti nan kontak ak faz mobil danjere pandan itilizasyon ak pi bon lubrification plonje. Yon bò nan manbràn asye pur plating magazen lwil oliv, pandan y ap lòt bò a an kontak ak faz mobil lan. Lè plonje resipwòk la kondui lwil oliv la kont dyafram nan, faz mobil la manje nan kolòn nan. Lè plonje a retracte, presyon an disparèt ak faz mobil la antre nan chanm ponp lan sou bò lwès dyafram la.
Gen yon valv boul nan ponp lan piston resipwòk. Objektif la nan sèvi ak yon valv boul oswa valv chèk se asire ke faz mobil la ap koule nan yon direksyon. Konpozan yo nan valv boul la gen ladan yon gasket safi, yon boul Ruby, ak yon sous ki bay tansyon. Kòm plonje a deplase pou trase sòlvan nan rezèvwa faz mobil lan, boul ruby nan inlet la pouse moute pa sezon prentan an, ki pèmèt sòlvan an ranpli chanm nan sòlvan. Se boul la ruby nan priz la kenbe kont gasket la, ki anpeche rflu nan sòlvan ki te deja antre nan kolòn nan. Kòm plonje a ap avanse, faz mobil la pouse boul la ruby nan priz la nan gasket la. An menm tan an, faz mobil la pouse boul la ruby nan inlet la kont gasket la pou anpeche faz mobil lan koule tounen nan rezèvwa a. |
Se plonje a nan ponp lan anjeneral te fè nan safi sentetik, ki dwe tcheke detanzantan pou reyur. Pou kenbe tan retansyon ak repwodiksyon zòn pik, sele piston an dwe ranplase detanzantan.
Pifò sistèm perfusion (
ponp presyon ki wo yo itilize nan HPLC) yo ekipe ak yon filtè nan liy oswa ploge filtre anvan injektè a. Filtè sa a oswa ekran pran an kont patikil ki te pwodwi pa mete nan sele ponp lan, ki anpeche patikil soti nan domaje valv la piki oswa lòt konpozan. Li bezwen ranplase detanzantan.
Objektif klape a se diminye pulsasyon presyon ki te koze pa operasyon ponp lan. Clapet a konsiste de yon dyafram ki separe faz mobil lan ak likid konpresib la epi li sitiye ant chanm ponp prensipal ak segondè nan yon ponp doub plonje konpanse.
Karakteristik nan ponp presyon ki wo yo itilize nan HPLC
Karakteristik presyon ponp HPLC
A. Segondè rezistans presyon
Rezistans pwesyon anwo nan syèl la se youn nan kondisyon de baz sistèm HPLC pou ponp presyon ki wo. Anjeneral, presyon an maksimòm k ap travay nan ponp perfusion la se 34.47-41.36Mpa (5000-6000psi) lè pousantaj koule faz mobil lan se 1-3mL / min lè l sèvi avèk yon kolòn ki gen yon gwosè patikil mwayèn apeprè 4µm ak yon dyamèt enteryè apeprè 5mm. .
B. Bon estabilite ak ti pulsasyon
Estabilite ak gwosè pulsasyon nan perfusion la ponp segondè presyon pral dirèkteman afekte estabilite nan sistèm nan HPLC (drift ak repetibilite), afekte bri a nan sistèm nan, epi redwi sansiblite a. Kenbe estabilite ak ti pulsasyon pi enpòtan pou sistèm HPLC lè l sèvi avèk detektè tankou detektè elektwochimik ak diferans, oswa pou separasyon gradyan. Se poutèt sa, pulsasyon an presyon nan anpil aktyèl ponp gwo presyon ka kontwole nan 1%.
C. To koule kontinyèl reglabl ak ranje koule lajè
A pwezan, ranje flux de la ponp segondè presyon nan HPLC ka rive nan 0.001-10.0mL / min, ak pousantaj koule nan chromatografi preparasyon se menm pi gwo, pafwa ki mande dè milye de mL / min, ki ka ansanm satisfè kondisyon yo travay analyse nan kolòn divès kalite ak diferan dyamèt entèn yo.
D. Bon repetibilite to koule
Repetibilite koule nan ponp lan wo-presyon ki itilize nan HPLC ka rive nan 0.07% (RSD), men repetibilite a gen rapò ak metòd tès la.
a. Metòd pwa
Se likid ekoulman pwodiksyon an pou chak inite tan ponp lan kolekte epi peze dirèkteman sou balans lan pou jije repetibilite la.
b. Metòd tan retansyon
Yo jije repetibilite to koule a dapre longè tan retansyon an.
Nan travay analyse HPLC, analiz kalitatif li yo jeneralman baze sou tan retansyon an. Repetibilite nan ponp segondè presyon (RSD) se youn nan endikatè ki pi enpòtan yo, li se tou yon endikatè pèfòmans trè enpòtan ki afekte repetibilite tout sistèm HPLC la.
E. Ti volim mouri
Volim a mouri nan ponp segondè presyon afekte presizyon nan analyse ak presizyon nan HPLC, espesyalman efè a nan elisyon gradyan. Yon ti volim mouri nan ponp lan wo-presyon se fezab nan ranplasman an rapid nan solvang ak nan egzeyat alè nan bul lè nan sistèm nan. Se poutèt sa, pi piti volim nan mouri, pi bon an.
F. Segondè presizyon to koule
HPLC-wo presyon ponp presizyon to koule enpòtan paske li dirèkteman afekte repetibilite done tès analyse (fyab). Aktyèl domestik ak etranje HPLC ponp koule repetibilite se jeneralman alantou 1% (ki gen rapò ak metòd tès la), pi bon an ka rive nan 0.06%.
G. Avèk fonksyon elisyon gradyan
Nan ka travay analyse ki pa ka rezoud lè l sèvi avèk elisyon izokratik, li posib pou rezoud pwoblèm nan byen lè l sèvi avèk metòd elisyon gradyan an. Se poutèt sa, itilizatè HPLC souvan bezwen ponp wo-presyon enstriman an pou gen yon pwogram pousantaj koule ak yon pwogram elisyon gradyan.
Ki jan yo achte ponp presyon ki wo yo itilize nan HPLC?
ANTITECK bay ekipman laboratwa, laboratwa consommables, ekipman manifakti nan sektè syans lavi yo. Si ou enterese nan nou an
ponp presyon ki wo yo itilize nan HPLC oswa ou gen nenpòt kesyon, tanpri ekri yon imèl bay
[imèl pwoteje], nou pral reponn ou pi vit ke posib.
