Analizzatur ta 'Amino Acid

L-istrument użat biex jiddetermina l-kompożizzjoni jew il-kontenut ta 'aċidu amminiku ta' proteini, peptidi, u preparazzjonijiet farmaċewtiċi oħra jissejjaħ analizzatur tal-aċidu amminiku.

Analizzatur tal-aċidu amminiku juża separazzjoni tal-kromatografija ta 'skambju ta' katjoni u derivatizzazzjoni ta 'wara l-kolonna b'ninhydrin biex janalizza l-kontenut ta' idrolizzat ta 'proteina u diversi komponenti ta' amino acid ħielsa. L-istruttura bażika tal-istrument hija simili għal dik tal-HPLC ordinarja iżda ottimizzata għall-analiżi tal-aċidu amminiku fid-dettall, bħal protezzjoni tan-nitroġenu, pajpijiet inerti, degassing onlajn, gradjent ta 'eluzzjoni u kontroll tal-gradjent tat-temperatura tal-kolonna.

Minħabba d-differenzi fl-istruttura, l-aċidità, il-polarità u d-daqs molekulari tal-komponenti tal-aċidu amminiku, jistgħu jiġu separati mill-kolonna tal-iskambju tal-katjoni. Il- komponenti ta 'aċidu amminiku jistgħu jiġu elużi b'mod sekwenzjali bl-użu ta 'buffers b'konċentrazzjonijiet differenti ta' joni tal-pH, u mbagħad imħallat wieħed wieħed ma 'nixxiegħa oħra ta' reaġent tan-ninhydrin, wara li jiċċirkolaw flimkien fit-tubu ta 'reazzjoni spirali. Ir-reazzjoni tal-iżvilupp tal-kulur titwettaq f'ċerta temperatura, tipikament 115 sa 120 grad Celsius, li tirriżulta fil-formazzjoni ta 'prodott blu-vjola b'assorbiment massimu f'570 nm. L-hydroxyproline jirreaġixxi man-ninhydrin biex jipproduċi prodott isfar b'assorbiment massimu f'440 nm.

Analizzaturi tal-aċidu amminiku huma ġeneralment suddiviżi f'żewġ sistemi, is-sistema ta 'analiżi tal-idroliżi tal-proteini (sistema tal-melħ tas-sodju) u s-sistema ta' analiżi tal-aċidu amminiku ħieles (sistema tal-melħ tal-litju). Fost dawn, is-sistema ta 'analiżi ta' aċidu amminiku ħieles tutilizza l-eluzzjoni tal-gradjent b'ċitrat tas-sodju jew tal-litju f'konċentrazzjonijiet u valuri ta 'pH differenti.

Is-sistema tal-melħ tas-sodju tanalizza sa madwar 25 aċidu amminiku kull darba, li hija aktar mgħaġġla u għandha drittità tal-linja bażi aħjar. Is-sistema tal-melħ tal-litju tanalizza sa madwar 50 aċidu amminiku kull darba, u l-veloċità tagħha hija aktar bil-mod u l-linja bażi ġeneralment mhix tajba daqs dik tas-sistema tal-melħ tas-sodju.

Analiżi ta 'rutina ta' aċidu amminiku jirreferi għall-analiżi ta '20 aċidu amminiku idrolizzat bil-proteina u aktar minn 40 aċidu amminiku ħieles. Mill-introduzzjoni tiegħu fl-1958, il- analizzatur tal-aċidu amminiku ġiet aġġornata kontinwament b'ħardwer u softwer moderni u issa żviluppat f'tagħmir għall-ittestjar ta 'rutina awtomatizzat essenzjali għall-analiżi tal-aċidu amminiku fl-industriji moderni tal-ikel, għalf, bijoteknoloġija, mediċina u saħħa, u xjenza tal-ħajja.

Analizzaturi tal-aċidu amminiku jistgħu jinqasmu f'żewġ tipi skond il-metodi ta 'separazzjoni u skoperta tagħhom.

L-ewwel tip huwa l-metodu klassiku bbażat fuq is-separazzjoni tal-kolonna ta 'skambju ta' katjoni u d-determinazzjoni fotometrika tad-derivattivi tan-ninhydrin wara l-kolonna -- kromatografija tal-kolonna ta 'skambju ta' joni (IEC). Dan it-tip ta 'metodu ngħata l-Premju Nobel fl-1972 u huwa l-istandard internazzjonali u nazzjonali kif ukoll l-arbitraġġ u l-metodu relatat mal-barrani llum.

It-tieni kategorija hija l-metodi kollha ta 'kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC) ibbażati fuq separazzjoni kromatografika b'fażi inversa, derivatizzazzjoni ta 'qabel il-kolonna, fluworexxenza jew skoperta UV, u metodi ta' kromatografija tal-joni (IC) b'detezzjoni amperometrika diretta ta 'separazzjoni ta' skambju anjoniku.

B'mod ġenerali, IEC huwa superjuri għall-HPLC, u l-istrument IEC huwa a analizzatur awtomatizzat dedikat tal-aċidu amminiku.

Iċ-ċellula tar-riċerka fil-fiżjoloġija taċ-ċelluli hija l-unità bażika tal-attività tal-ħajja. Huwa magħmul minn ħafna tipi ta 'proteini, u l-kontenut ta' proteini u l-kompożizzjoni u l-kontenut ta ' aċidi amino fihom ivarjaw b'kundizzjonijiet fiżjoloġiċi differenti. Għalhekk, fl-istudju tal-fiżjoloġija taċ-ċelluli, huwa meħtieġ li jiġu analizzati l-aċidi amminiċi tal-proteini taċ-ċellula b'analizzatur tal-aċidu amminiku.

Fil-laboratorju tal-bijokimika, analiżi tal-aċidu amminiku hija meħtieġa biex tistudja l-kompożizzjoni u l-istruttura tal-proteini u l-mekkaniżmu tal-azzjoni tal-enzimi.

Meta tikkultiva varjetajiet tajbin ta 'uċuħ tar-raba', huwa meħtieġ li tikkunsidra rendiment għoli u adattabilità għall-ħamrija, umdità, klima, eċċ. Huwa wkoll importanti li tiffoka fuq it-titjib tal-kontenut ta 'proteina. aċidi amino fiż-żrieragħ.

Iż-żieda ta 'aċidi amminiċi għall-għalf tista' taċċellera l-produzzjoni, għalhekk l-użu ta ' analizzaturi ta' aċidi amminiċi biex tiddetermina l-kontenut ta 'aċidi amminiċi tista' tgħin biex taġġusta l-formula jew iżżid addittivi ta 'l-għalf.

Minħabba t-tniġġis tal-ambjent mill-pestiċidi, l-iżvilupp ta 'pestiċidi li ma jniġġsux irċieva attenzjoni kbira. F'dawn l-aħħar snin, l-użu ta ' aċidi amino bħala materja prima għar-riċerka tal-pestiċidi għamlet progress kbir, u issa hemm erbiċidi magħmula mill-gliċina. Fl-iżvilupp ta 'pestiċidi għall-iżvilupp ta' materja prima ta 'aċidu amminiku, l-użu ta' analizzaturi ta' aċidi amminiċi jgħin biex iwettaq ħafna analiżi tal-aċidu amminiku.

Fit-titjib tal-ipproċessar tal-ikel u l-iżvilupp ta 'prodotti ġodda, l-iżviluppaturi għandhom iqisu l-valur nutrittiv u t-togħma tal-ikel. U l-deliciousness ta 'l-ikel hija relatata ma' aċidi amino, bħall-aċidu glutamiku u l-aċidu metiliku huma aċidużi, il-melħ tas-sodju tiegħu huwa qares, filwaqt li l-gliċina u l-alanina huma ħelwin. Il-valur nutrittiv tal-ikel huwa ddeterminat prinċipalment minn proteini u aċidi amminiċi, għalhekk huwa importanti li jitkejjel il-kontenut tagħhom ta 'aċidu amminiku fl-ipproċessar tal-ikel.

Fit-titjib tal-proċess, analiżi tal-aċidu amminiku jeħtieġ li jitqabbel qabel u wara t-titjib tal-proċess biex jiġi ddeterminat jekk il-proċess il-ġdid huwiex fattibbli. Fil-produzzjoni ta 'prova ta' prodotti ġodda, analizzaturi ta' aċidi amminiċi huma meħtieġa wkoll biex jiddeterminaw in-numru ta 'aċidi amminiċi fil-prodott il-ġdid biex jiddeterminaw il-valur nutrittiv u t-togħma tajba tiegħu. Barra minn hekk, it-tisħiħ tal-ikel jeħtieġ ukoll li żżid aċidi amminiċi mal-ikel, għalhekk għandha ssir ukoll analiżi tal-aċidu amminiku.

L-irtubija u d-durabilità tal-ġilda huma relatati mal-ammont ta 'hydroxyproline li fih, għalhekk analizzaturi ta' aċidi amminiċi huma meħtieġa fir-riċerka tal-proċess tal-ikkunzar biex jiġi ddeterminat l-ammont ta 'hydroxyproline u aċidi amminiċi oħra.

Il-kontenut ta 'aċidi amminiċi fil-blat taż-żejt huwa wieħed mid-dejta importanti biex tiddetermina r-rikkezza tad-depożiti taż-żejt, għalhekk analizzaturi ta' aċidi amminiċi spiss jintużaw biex jiddeterminaw il-kontenut ta 'aċidi amminiċi fil-blat taż-żejt fir-riċerka dwar l-iżvilupp taż-żejt.

Għad-determinazzjoni ta 'diversi kontenuti ta' aċidu amminiku ħieles fil-kampjuni, l-impuritajiet tax-xaħam jistgħu jitneħħew u mbagħad jiġu analizzati direttament fuq il-kolonna.

Għad-determinazzjoni tal- kompożizzjoni ta 'aċidu amminiku ta' proteini, il-kampjun għandu jiġi idrolizzat bl-aċidu sabiex il-proteina tiġi kompletament trasformata f'aċidi amminiċi qabel ma tiġi analizzata fuq il-kolonna.

Il-kampjuni ttrattati huma mgħobbija fuq il-kolonna għall-analiżi. L-ammont ta 'kampjun li għandu jitgħabba fuq il-kolonna huwa determinat mis-sensittività tal-awtoanalizzatur użat. Ġeneralment, huwa madwar 0.1μ mol ta 'kull aċidu amminiku, u l-piż niexef tal-kampjun idrolizzat huwa ta' madwar 0.3 mg. Id-determinazzjoni għandha titwettaq f'pH 5-5.5, 100 ° C, u l-ħin ta 'reazzjoni huwa 10-15 min.

Il-materjal vjola li jirriżulta huwa mkejjel kolorimetrikament f'570 nm. Il-kompost isfar li jirriżulta huwa mkejjel kolorimetrikament f'440 nm. Huwa jieħu biss madwar siegħa biex tagħmel sħiħ analiżi tal-aċidu amminiku. Għexieren ta 'kampjuni jistgħu jitgħabbew fl-istrument fl-istess ħin u jiġu analizzati awtomatikament f'sekwenza, u d-dejta mogħtija hija kkalkulata awtomatikament fl-aħħar. Il-grad tal-istrument huwa ±1 sa 3%. Separazzjoni u determinazzjoni ta' aċidi amminiċi permezz ta' kolonna ta' skambju ta' katjoni.

a. L-istrument għandu proċedura ta’ preparazzjoni ta’ 15-il minuta wara li jinxtegħel. Din il-fażi hija prinċipalment biex l-istrument jistabbilixxi awtomatikament l-istatus tax-xogħol u l-parametri ta 'kull komponent, jittestja l-istatus tal-komunikazzjoni tal-istazzjon tax-xogħol u kull komponent u jistabbilixxi t-temperatura u l-pressjoni, sabiex ma ttemmx dan il-proċess b'mod artifiċjali.

b. Aċidi amminiċi proteolitiċi u aċidi amminiċi fluwidi fiżjoloġiċi (20 u 43) jistgħu jiġu analizzati kontinwament fuq l-awtosampler, li huwa awtomatikament rikonoxxut u rreġistrat mill-istrument mingħajr ebda operazzjoni addizzjonali mill-utent.

c. Wara li sett ta 'kampjuni jkun ġie analizzat, l-istrument awtomatikament jibda post-programm biex iżomm is-sistema, għalhekk jekk jogħġbok ttemmx dan il-programm b'mod artifiċjali.

d. Il-programm taċ-ċiklu default huwa awtomatikament attivat fil-modalità standby biex jinżamm l-istrument. Il-konsum tar-reaġent tal-programm taċ-ċiklu huwa żgħir ħafna (1 ml/siegħa), għalhekk l-utent m'għandux ibiddel dan l-issettjar.

e. L-istrument jaħdem bi pressjoni tan-nitroġenu ta '0.4 bar; jekk il-pressjoni tan-nitroġenu tkun għolja wisq, l-istrument ikun bil-ħsara.

f. Iċċekkja jekk l-eluwent u l-pressjoni tal-fluss tar-reaġenti derivattivi tal- analizzatur awtomatiku tal-aċidu amminiku huwa normali.

g. Għal manutenzjoni aħjar ta 'l-istrument, huwa rakkomandat li żżid proċedura ta' tindif waħda jew tnejn jew tnaddaf manwalment is-sistema qabel il-programm ta 'wara wara kull lott ta' kampjuni.

h. Jekk l-istrument jitwarrab temporanjament, huwa rakkomandat li titneħħa l-kolonna u tlaħlaħ il-pipeline tal-istrument b'rata ta 'fluss għolja, u timla l-pipeline b'40% alkoħol isopropil.

i. Il-firxa tal-konċentrazzjoni tal-injezzjoni hija 0.4-4 nmol. Minħabba s-sensittività għolja tal-magna, jekk il-konċentrazzjoni tal-injezzjoni tkun għolja wisq, ir-riżultati tal-analiżi jiġu affettwati u r-reattur jiġi misdud faċilment.

Jekk inti interessat tagħna analizzatur tal-aċidu amminiku jew għandek xi mistoqsijiet, jekk jogħġbok ikteb e-mail lil [protett bl-email], aħna se nwieġbuk kemm jista 'jkun malajr.