Apparat elettroforesi
X'inhu l-apparat tal-elettroforeżi?
Apparat ta' l-elettroforeżi huwa strument li jirrealizza analiżi elettroforetika. Ġeneralment tikkonsisti minn provvista ta 'enerġija, tank tal-elettroforeżi, unità ta' skoperta, eċċ. L-hekk imsejħa elettroforeżi tirreferi għall-moviment ta 'partiċelli ċċarġjati fil-kamp elettriku. Sustanzi differenti jimxu b'veloċitajiet differenti fil-kamp elettriku minħabba l-piżijiet u l-piżijiet molekulari differenti tagħhom, skont liema sustanzi differenti jistgħu jiġu analizzati b'mod kwalitattiv jew kwantitattiv, ċerta taħlita tista 'tiġi analizzata f'komponenti jew komponenti individwali jistgħu jiġu estratti u ppreparati.
L-apparat tal-elettroforeżi jistgħu jintużaw għall- analiżi kwalitattiva jew kwantitattiva ta’ sustanzi differenti, analiżi tal-komponenti ta’ ċerta taħlita, jew estrazzjoni u preparazzjoni ta’ komponenti individwali. Ħafna drabi jintuża f'testijiet tal-laboratorju fil-mediċina klinika jew studji sperimentali xjentifiċi.
Prinċipju ta 'ħidma ta' apparat ta 'elettroforeżi
Il-partiċelli ta’ sustanzi li jistgħu jassorbu mases iċċarġjati jew li għandhom gruppi dissoċjabbli f’soluzzjoni, bħal proteini u aċidi amminiċi, żgur li jiġu attirati minn elettrodi bi proprjetajiet elettriċi opposti u jiċċaqalqu f'kamp elettriku DC taħt ċerti kundizzjonijiet ta' pH. Minbarra l-istat iċċarġjat u s-saħħa tal-kamp elettriku, il-veloċità tal-moviment tal-partiċelli ta' sustanzi differenti fil-kamp elettriku hija wkoll relatata mad-daqs, il-forma u l-viskożità tal-mezz tal-partiċelli. Skont din il-karatteristika, l-applikazzjoni tal-elettroforesi tista' tkun analiżi kwalitattiva jew kwantitattiva ta' sustanzi differenti jew ċerta taħlita għall-analiżi tal-komponenti jew preparazzjoni ta' estrazzjoni ta' komponenti individwali, l-istrument tal-elettroforesi huwa ddisinjat u mmanifatturat abbażi tal-prinċipju ta' hawn fuq.
Hemm ħafna fatturi li jaffettwaw l-elettroforeżi, prinċipalment l-ammont ta 'ċarġ tas-sustanza separata, is-saħħa tal-kamp elettriku, il-pH u s-saħħa jonika tal-buffer, u l-inertezza kimika tal-mezz ta' appoġġ.
Storja ta 'apparat ta' elettroforeżi
Peress li l-ewwel sistema ta 'elettroforeżi li tiċċaqlaq il-konfini kummerċjalizzata ġiet żviluppata mill-kimiku fiżiku Svediż Professur Tiselius fl-1946, l-iżvilupp ta' analizzaturi ta 'elettroforeżi kien estremament mgħaġġel. Sa mis-snin sebgħin, aktar u aktar analizzaturi awtomatizzati tal-elettroforeżi ġew introdotti fil-laboratorji kliniċi u qed ikollhom rwol dejjem aktar importanti fid-dijanjosi klinika u t-trattament ta 'diversi mard.
A. Stadju bikri (qabel ~1970)
Iż-żewġ tipi ewlenin ta 'midja ta' appoġġ huma film tal-aċetat taċ-ċelluloża (imsejjaħ film tal-aċetat) u ġel tal-agarose, u Apparat ta' l-elettroforeżi f'dan il-perjodu kienu l-aktar użati għall-analiżi ta 'proteini bħal proteini tas-serum, lipoproteini, emoglobina, u oġġetti oħra.
B. Stadju tan-nofs (1970~1990)
F'dan il-perjodu, Apparat ta' l-elettroforeżi kienu prinċipalment dawl viżibbli / fluworexxenti sistema doppja elettroforeżi skaners awtomatiċi. L-introduzzjoni ta 'reaġenti fluworexxenti u skaners fluworexxenti ffaċilitat ħafna d-determinazzjoni ta' isoenzimi lactate dehydrogenase (LD) u creatine kinase (CK) fil-prattika klinika.
Ċ. Stadju ta' żvilupp (1990~preżent)
F'dan il-perjodu, l-apparati tal-elettroforesi kienu bbażati fuq awtomazzjoni.
Tip ta' apparat ta' l-elettroforeżi
Apparat tal-elettroforeżi tal-ġel
L-elettroforeżi hija maqsuma f'elettroforeżi ħielsa u elettroforeżi żonali skont jekk jintużax mezz ta 'appoġġ fl-elettroforeżi.
L-elettroforeżi ħielsa ma tużax mezz ta 'appoġġ, u l-elettroforeżi titwettaq f'soluzzjoni. Dan it-tip ta 'elettroforeżi huwa aktar maqsum f'żewġ kategoriji: elettroforeżi ta' interface mhux ħielsa u elettroforeżi ta 'interface ħielsa. L-elettroforeżi tal-interface mhux ħielsa tfisser li l-partiċelli kollha ċċarġjati (bħal diversi ċelloli) sospiżi fis-soluzzjoni jimxu wara l-elettrifikazzjoni u ma tidher l-ebda interface, bħal mikroelettroforeżi. Fl-elettroforeżi tal-interface ħielsa, is-sustanzi separati huma kkonċentrati f'ċertu saff u jiffurmaw l-interface tagħhom għal analiżi kwalitattiva jew kwantitattiva. L-elettroforeżi ta 'interface ħielsa teħtieġ strumenti kurrenti għaljin u sofistikati u tintuża biss fi ftit applikazzjonijiet ta' elettroforeżi speċjali bħal elettroforeżi li tiffoka iżoelettrika u elettroforeżi iżotropika.
L-elettroforesi żonali kollha jużaw mezzi ta' appoġġ, li huma maqsuma fi filtru elettroforesi tal-karta, elettroforesi tal-membrana tal-aċetat, elettroforesi b'saff irqiq, u elettroforesi tal-ġel skont il-mezz ta' appoġġ. Barra minn hekk, il-forom differenti ta' apparati tal-mezz ta' appoġġ jistgħu jinqasmu f'elettroforesi tal-pjanċa orizzontali, elettroforesi tal-pjanċa vertikali, elettroforesi tad-diska vertikali, elettroforesi kapillari, elettroforesi tal-pont, u elettroforesi tal-fluss kontinwu, eċċ.
Diversi tipi komuni ta ' apparat ta' l-elettroforeżi huma kif ġej.
A. Strument ta' elettroforesi b'sistema doppja ta' fluworexxenza/dawl viżibbli kompletament awtomatiku
Sistema doppja ta 'fluworexxenza awtomatika/dawl viżibbli strument elettroforeżi għandha sistema doppja ta 'fluworexxenza/dawl viżibbli, li tuża oġġetti ta' reaġent fluworexxenti, bħal isoenzimi CK, u LD. Għandu l-vantaġġi ta 'sensittività għolja, u preċiżjoni għolja u jadotta sistema ta' pressjoni għolja u temperatura baxxa, li hija mgħaġġla ħafna.
B. Membrana tal-vinil awtomatika
L-istrument tal-elettroforesi tal-film tal-vinil kompletament awtomatizzat huwa sistema waħda tad-dawl viżibbli. Juża folja tal-elettroforesi tal-membrana tal-vinil u għandu l-vantaġġ ta 'awtomazzjoni ogħla. Dan l-istrument huwa l-aktar użat għall-analiżi ta 'elettroforeżi tal-proteini tas-serum ta' rutina klinika.
Ċ. Strument awtomatiku tal-elettroforesi tal-agarose
L-istrument awtomatiku tal-elettroforesi tal-agarose huwa sistema waħda tad-dawl viżibbli. Juża film elettroforesi tal-ġel agarose, li għandu l-vantaġġ ta 'sensittività għolja u jista' jintuża għal testijiet ta 'proteini b'konċentrazzjoni baxxa, bħal proteina tal-awrina u proteina tal-fluwidu ċerebrospinali. Is-separazzjoni tal-isoenzimi hija wkoll pjuttost tajba, u tista 'tagħmel aktar oġġetti b'sensittività ogħla.
D. Sistema awtomatika ta 'analiżi ta' l-elettroforeżi
il strument elettroforeżi tikkonċentra l-vantaġġi ta 'l-istrumenti ta' hawn fuq, awtomatikament spotting, elettroforeżi, kulur (jew tbajja ', decolorization), u tnixxif. Jista 'jintuża għal diversi folji tal-elettroforeżi, inklużi folji tal-agar, folji tal-aċetat, polyacrylamide, eċċ. Jadotta s-sistema doppja ta' dawl viżibbli u preżentazzjoni tal-kulur tal-fluworexxenza, li hija strument tal-elettroforeżi aktar ideali.
Użu ta' apparat ta' elettroforeżi
a. Qabbad iż-żewġ elettrodi tat-tank tal-elettroforesi mal-output DC tal-istrument tal-elettroforesi bil-wajers, oqgħod attent li ma taqlibx il-polarità.
b. Aġġusta s-swiċċ tal-enerġija tal-istrument tal-elettroforesi għall-pożizzjoni mitfija, dawwar il-pum tal-vultaġġ għall-minimu, u agħżel il-firxa tal-vultaġġ u l-kurrent skont il-ħtieġa tax-xogħol.
c. Ixgħel l-enerġija, dawwar bil-mod il-pum tal-aġġustament tal-vultaġġ sakemm tintlaħaq il-vultaġġ meħtieġ, issettja l-ħin tat-terminazzjoni tal-elettroforesi, u mbagħad ibda l-elettroforesi.
d. Wara li x-xogħol ikun lest, dawwar il-pumi u s-swiċċijiet fuq żero jew mitfi, u dawwar il-plagg tal-elettroforesi 'l barra.
Noti dwar l-użu ta 'apparat ta' elettroforeżi
a. Wara l- apparat ta' l-elettroforeżi huwa enerġizzat f'kondizzjoni tax-xogħol, huwa pprojbit għall-ġisem tal-bniedem li jmiss l-elettrodu, l-oġġett ta ' l-elettroforeżi, u partijiet oħra possibbli ċċarġjati elettrikament, u li ma tieħux u tpoġġi l-affarijiet fit-tank ta ' l-elettroforeżi, jekk meħtieġ, l-enerġija għandha tiġi skonnettjata l-ewwel biex evita xokk elettriku. Fl-istess ħin, huwa meħtieġ li l-istrument għandu jkollu tarf tajjeb ta 'l-ert biex jipprevjeni t-tnixxija.
b. Wara li l-istrument ikun enerġizzat, m'għandekx iżżid jew tissettja temporanjament il-plagg tal-wajer tal-ħruġ biex tevita l-fenomenu ta' short circuit, għalkemm l-istrument huwa mgħammar b'fjus intern, il-fenomenu ta' short circuit xorta jista' jwassal għal ħsara fl-istrument.
c. Peress li l-valur tar-reżistenza ta' appoġġi differenti tal-midja huwa differenti, il-fluss elettriku permezz tal-elettroforesi huwa wkoll differenti, u l-veloċità tal-għawm tiegħu u l-ħin meħtieġ biex jgħum sal-punt tat-tmiem huma wkoll differenti, għalhekk l-elettroforesi ta' appoġġi differenti tal-midja m'għandhiex titwettaq fuq l-istess strument tal-elettroforesi fl-istess ħin.
d. Meta l-kurrent totali ma jaqbiżx il-kurrent nominali tal-istrument (il-medda massima tal-kurrent), huwa possibbli li jintużaw slots multipli flimkien, iżda oqgħod attent li ma tagħbiex iżżejjed, inkella dan jaffettwa faċilment il-ħajja tal-istrument.
e. Taħt xi ċirkostanzi speċjali, speċjalment meta l-istrument ikollu bżonn jiċċekkja l-input tal-elettroforesi, huwa permess li l-magna tinbeda mingħajr tagħbija fl-istat ta' stabbilizzazzjoni tal-vultaġġ, iżda fl-istat ta' stabbilizzazzjoni tal-kurrent, it-tagħbija trid tkun imqabbda qabel ma tinbeda l-magna, inkella l-indikatur tal-voltmeter jaqbeż b'mod sinifikanti, li faċilment jikkawża ħsara bla bżonn lill-magna magħmula mill-bniedem.
f. Jekk jinstabu fenomeni anormali waqt l-użu, bħal storbju qawwi, skariku, jew riħa anormali, l-enerġija għandha tinqata' immedjatament u tiġi rranġata biex jiġu evitati inċidenti.
Issolvi problemi komuni ta 'apparat ta' elettroforeżi
A. L-output tal-apparat tal-elettroforesi ma jilħaqx il-valur issettjat
L-istat tal-valur tal-output tal- apparat ta' l-elettroforeżi isegwi l-“liġi ta’ Ohm”: vultaġġ U=kurrent I×(tank tal-elettroforesi) reżistenza R
Jekk ir-reżistenza R hija relattivament kostanti, kwalunkwe parametru wieħed ta 'U, I, u P (qawwa P=kurrent I × vultaġġ U) huwa kostanti, parametri oħra huma wkoll kostanti; u jekk xi parametru wieħed jinbidel, parametri oħra jinbidlu wkoll proporzjonalment.
Jekk il-vultaġġ tal-ħruġ U tal-istrument tal-elettroforeżi ma jilħaqx il-valur issettjat minn qabel, l-ewwel għandek tosserva jekk I jew P kienx kostanti, jew laħaqx il-massimu I jew P speċifikat mill-istrument tal-elettroforeżi (l-istrumenti tal-elettroforeżi JY kollha għandhom sinjali indikaturi ċari ). Jekk il-valur tal-limitu għadu ma ntlaħaqx, żid l-issettjar ta 'I jew P diġà kostanti (sal-valur tal-limitu jekk meħtieġ) biex tkun tista' żżid l-output tal-vultaġġ.
Jekk il-kurrent I tal-istrument tal-elettroforeżi ma jilħaqx il-valur issettjat minn qabel, aġġusta l-vultaġġ U jew il-qawwa P. Jekk il-qawwa P tal-istrument tal-elettroforeżi ma tilħaqx il-valur issettjat minn qabel, aġġusta l-vultaġġ U jew il-kurrent I.
B. Allarm ta' vultaġġ żejjed fl-istrument tal-elettroforesi kkontrollat mill-kompjuter
a. Iċċekkja jekk hux qed jintuża mingħajr tagħbija.
b. Jekk it-tank tal-elettroforesi mhux mimli b'buffer.
c. Jekk il-wajer tal-platinu tat-tank tal-elettroforesi huwiex imkisser.
Ċ. Protezzjoni minn kurrent żejjed
a. Jekk hemmx short circuit fit-tank tal-elettroforesi.
b. Jekk il-bafer huwiex magħżul ħażin.
D. Protezzjoni kontra t-tnixxija
a. Jekk hemmx likwidu mxerred ġewwa l-istrument jew fuq l-interfaċċja tal-ħruġ.
b. Jekk hemmx ħafna trab li jaqa' ġewwa l-istrument.
Kif nixtri apparat tal-elettroforesi?
Jekk inti interessat tagħna Apparat elettroforesi jew għandek xi mistoqsijiet, jekk jogħġbok ikteb e-mail lil info@antiteck.com, aħna nwieġbuk kemm jista 'jkun malajr.