Ħiter tal-Kolonna HPLC
X'inhu l-ħiter tal-kolonna HPLC?
Dawk li ħafna drabi jagħmlu analiżi tal-fażi likwida għandhom ikunu familjari mal- heater tal-kolonna. Dan minħabba li l - kamra tat-temperatura tal-kolonna jippermetti żamma kromatografika aktar stabbli mingħajr interferenza minn varjazzjonijiet fit-temperatura, li tirriżulta f'riproduċibilità kromatografika aħjar. Fl-istess ħin, għandha effiċjenza aħjar ta 'separazzjoni kromatografika u forma ta' quċċata aktar simmetrika u ttejjeb it-terminu tat-trasferiment tal-massa tal-ekwazzjoni Van Diemen. Il- Ħiter tal-kolonna HPLC għandu l-vantaġġi ta 'tqegħid flessibbli, installazzjoni ta' malajr, osservazzjoni faċli, u disinn sikur li ma jgħaddix ilma minnu.
Prinċipju ta 'ħidma HPLC
Il-komponenti tat-taħlita huma separati u purifikati fil- kolonna kromatografika b'interazzjoni mal-fażijiet stazzjonarji u mobbli. Il-fażi stazzjonarja hija materjal ta 'partiċelli poruż żgħir ħafna preżenti fil-kolonna kromatografika. Il-fażi mobbli hija solvent jew taħlita ta 'solventi li hija sfurzata permezz tal-kolonna taħt pressjoni għolja. Il-kampjun jiġi injettat b'siringa u mħallat mal-fażi mobbli permezz ta 'valv imqabbad mal-linja tal-kampjun, u l-komponenti tal-kampjun imbagħad jiġu mgħoddija mill-kolonna b'rati differenti. Minħabba l-kapaċitajiet ta 'assorbiment differenti bejn il-komponenti u l-fażi stazzjonarja, kull komponent joħroġ mill-kolonna min-naħa tiegħu u d-ditekter xieraq jikkonverti l-konċentrazzjoni tal-komponent f'numru tat-telekomunikazzjoni għat-trażmissjoni lis-softwer HPLC tal-kompjuter. Fl-aħħar tal-ġirja, il-kromatogramma hija disponibbli fis-softwer HPLC.
X'inhu l-ħin ta 'ritenzjoni fl-HPLC
il ħin ta' żamma fl-HPLC huwa l-ħin meħtieġ biex il-kampjun jgħaddi mid-dħul sal-ħruġ tal-kolonna. Sustanzi differenti li joħorġu fuq kolonni differenti b'fażijiet mobbli differenti se jkollhom ħinijiet ta 'żamma differenti, għalhekk il-ħin ta' żamma huwa wieħed mill-parametri l-aktar importanti tal-analiżi kromatografika.
Komponenti tal-kampjuni separati mill-bidu tal-injezzjoni sal-ħin wara l-kolonna meta l-konċentrazzjoni tal-komponent tal-valur massimu, jiġifieri, mill-bidu tal-injezzjoni sal-quċċata ta 'komponent tal-ħin kromatografiku għadda meta l-quċċata, magħrufa bħala l- ħin ta 'żamma ta’ dan il-komponent. Il- ħin ta' żamma ta' HPLC hija espressa b'RT, ħafna drabi f'minuti (min) bħala l-unità tal-ħin. Il-ħin ta 'żamma huwa determinat mill-fatturi termodinamiċi fil-proċess kromatografiku. Taħt ċerti kundizzjonijiet ta 'tħaddim kromatografiku, kwalunkwe sustanza għandha ħin ta' żamma definit, li għandu l-istess rwol bħall-valur ta 'bidla speċifika u jista' jintuża bħala l-bażi għal analiżi kromatografika kwalitattiva.
Għandek tagħti attenzjoni varjazzjoni fil-ħin ta' żamma fl-HPLC. . In Fil Separazzjoni HPLC, jekk il - ħin taż-żamma tal-kromatografija likwida hija qasira wisq, dan ifisser li s-sustanza separata tinżamm ħażin fuq il-fażi stazzjonarja, u huwa possibbli li tinterferixxi mad-determinazzjoni tas-sustanza li għandha titkejjel billi titħallat ma 'impuritajiet li mhumiex miżmuma. Naturalment, din hija biss sitwazzjoni komuni meta jintużaw ditekters li mhumiex speċifiċi ħafna, bħal UV u ELSD. Madankollu, jekk jintuża ditekter bi speċifiċitajiet għoljin bħall-fluworexxenza jew l-ispettrometrija tal-massa, din l-interferenza titnaqqas jew tiġi eskluża ħafna.
Tipi ta' kromatografija tal-kolonna
Il-kromatografija, magħrufa wkoll bħala kromatografija likwida, u analiżi kromatografika, hija metodu ta' separazzjoni u analiżi li għandu applikazzjonijiet wesgħin ħafna fil-kimika analitika, kimika organika, bijokimika, u oqsma oħra. Il-komuni metodi kromatografiċi jinkludu kromatografija tal-kolonna, kromatografija ta 'saff irqiq, kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja, kromatografija tal-gass, u kromatografija ta 'fluwidu superkritiku.
Tipi differenti ta 'kromatografija tal-kolonna
A. Metodu kromatografiku tal-kolonna
L-oriġinal metodu kromatografiku, li tinjetta l-fażi stazzjonarja f'tubu tal-ħġieġ mimli bil-qoton jew filtru karta fit-tarf t'isfel, tifrex it-trab tal-fażi stazzjonarja saturat bil-kampjun fuq nett tat-tubu tal-ħġieġ u tissolidifika mal-fażi mobbli. Hemm żewġ metodi komuni ta' eluzzjoni: wieħed huwa minn fuq għal isfel li jiddependi fuq il-gravità tas-solvent innifsu, u l-ieħor huwa minn isfel għal fuq li jiddependi fuq l-azzjoni kapillari.
Hemm ukoll żewġ metodi differenti biex tinġabar il-frazzjoni pura wara s-separazzjoni. Metodu wieħed huwa li taċċetta s-soluzzjoni effluwent direttament fit-tarf tal-kolonna, u l-metodu l-ieħor huwa li nixxef il-fażi stazzjonarja u mbagħad tissepara mekkanikament il-meded individwali u estratta l-molekuli tal-komponent billi tgħaddas il-fażi stazzjonarja f'solvent adattat.
Kromatografija tal-kolonna tintuża ħafna għas-separazzjoni ta 'taħlitiet, inkluża s-separazzjoni ta' prodotti ta 'sinteżi organika, estratti naturali, u makromolekuli bijoloġiċi.
B. Kromatografija fuq saff irqiq
Thin kromatografija ta' saff huwa metodu kromatografiku użat ħafna. F'dan il-metodu kromatografiku, il-fażi stazzjonarja hija miksija fuq pjanċa tal-metall jew tal-ħġieġ biex tifforma saff irqiq, u l-kampjun huwa spotted fuq tarf wieħed tal-pjanċa b'tubu kapillari, pinna, jew għodda oħra, wara li t-tarf spotted huwa mgħaddas fil-fażi mobbli u s-solvent tal-fażi mobbli jinfirex tul il-pjanċa b'azzjoni kapillari.
Kromatografija ta' saff irqiq huwa metodu rħas u faċli biex jintuża li jintuża għall-kejl mhux raffinat ta 'kampjuni u l-iskoperta ta' proċessi ta 'reazzjoni f'sintesi organika.
Ċ. Kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC)
Fil-preżent, kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC) huwa wieħed mill-metodi ta' analiżi kromatografika l-aktar użati. Sistema ta' kromatografija likwida tikkonsisti minn flixkun tar-riżervwar tal-fażi mobbli, pompa tal-infużjoni, injettur, kolonna, ditekter, u reġistratur, u l-kompożizzjoni ġenerali tagħha hija simili għall-kromatografija tal-gass. Il-pompa tal-infużjoni HPLC teħtieġ volum ta' infużjoni stabbli u bbilanċjat; is-sistema ta' injezzjoni teħtieġ injezzjoni konvenjenti u swiċċjar strett; peress li l-viskożità tal-fażi mobbli likwida hija ħafna iżgħar minn dik tal-gass, il-kolonna tal-kromatografija likwida ġeneralment hija eħxen u t-tul huwa ħafna iżgħar minn dak tal-gass. kolonna tal-kromatografija biex tnaqqas il-pressjoni tal-kolonna. L-HPLC tintuża f'firxa wiesgħa ta' applikazzjonijiet, fi kważi kull qasam ta' analiżi kwantitattiva u kwalitattiva.
D. Kromatografija tal-gass
Kromatografija tal-gass huwa metodu ta 'separazzjoni billi tuża gassijiet bħall-elju jew argon bħala l-gass trasportatur (imsejħa fażi mobbli), u tinjetta l-kampjun tat-taħlita fil-kolonna bil-mili (imsejħa fażi stazzjonarja). Il-komponenti separati huma kkonvertiti f'sinjali elettriċi permezz ta 'ditekter u rreġistrati minn reġistratur.
E. Kromatografija ta' fluwidu superkritiku
Il-kromatografija ta 'fluwidu superkritiku (SFC) hija proċess kromatografiku li juża fluwidu superkritiku bħala l-fażi mobbli biex iwettaq separazzjoni u analiżi billi jiddependi fuq il-kapaċità ta' solventizing tal-fażi mobbli. Hija teknoloġija ġdida żviluppata u pperfezzjonata fis-snin tmenin. Kromatografija fluwidu superkritika huwa aktar faċli li tinkiseb effiċjenza ogħla kolonna milli kromatografija likwida.
Differenza bejn HPLC u kromatografija tal-kolonna
Kromatografija likwida vs kromatografija tal-kolonna
A. Tipi differenti
a. Kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC)
a) Kromatografija ta' Adsorbiment
b) Kromatografija ta' Partizzjoni
ċ) Kromatografija tal-Joni
d) Kromatografija ta' Esklużjoni tad-Daqs
e) kromatografija ta' fażi magħquda
f) Kromatografija ta' Affinità
b. Metodu kromatografiku likwidu
a) Il-fażi stazzjonarja tal-kromatografija tal-adsorbiment hija l-assorbent, u l-proċess ta' separazzjoni tal-kromatografija jitwettaq fuq il-wiċċ tal-assorbent, mingħajr ma jidħol fl-intern tal-fażi stazzjonarja.
b) Fil-kromatografija tal-partizzjoni, kemm il-fażi mobbli kif ukoll dik stazzjonarja huma likwidi. Il-molekuli tal-kampjun jilħqu malajr il-partizzjoni tal-ekwilibriju bejn iż-żewġ fażijiet likwidi u jiġu separati bl-użu tad-differenza fil-koeffiċjenti tal-partizzjoni tal-komponenti fiż-żewġ fażijiet, li huwa simili għal proċess ta' estrazzjoni.
c) Il-kromatografija tal-iskambju joniku ġeneralment tuża reżina tal-iskambju joniku bħala l-fażi stazzjonarja. Ġeneralment, il-joni tal-kampjun jiġu skambjati b'mod riversibbli mal-joni tal-fażi stazzjonarja, u s-separazzjoni tal-kromatografija tinkiseb minħabba l-kapaċitajiet ta' skambju differenti ta' kull jonju tal-komponent.
B. Karatteristiċi differenti
a. Kromatografija likwida ta 'prestazzjoni għolja (HPLC)
a) Pressjoni għolja. Il-fażi mobbli hija likwidu, li huwa soġġett għal reżistenza għolja meta jiċċirkola mill-kolonna. Biex jgħaddi mill-kolonna malajr, trid tiġi applikata pressjoni għolja fuq il-likwidu trasportatur.
b) Veloċità għolja. Analiżi veloċi u rata ta' fluss ta' fluwidu trasportatur mgħaġġla, ħafna aktar mgħaġġla mill-kromatografija likwida klassika. Normalment, tanalizza kampjun f'15 sa 30 minuta, u xi kampjuni jistgħu saħansitra jitlestew f'5 minuti. Il-ħin tal-analiżi ġeneralment ikun inqas minn siegħa.
c) Effiċjenza għolja. Effiċjenza għolja ta' separazzjoni. Il-fażi stazzjonarja u l-fażi mobbli jistgħu jintgħażlu biex jinkiseb l-aħjar effett ta' separazzjoni, li huwa ħafna drabi ogħla mill-effiċjenza ta' separazzjoni tal-kolonni tad-distillazzjoni industrijali u l-kromatografija tal-gass.
b. Metodu kromatografiku likwidu
Bl-użu ta 'likwidu bħala l-fażi mobbli, il-fażi stazzjonarja tista' tkun f'diversi forom, bħal karta, pjanċi rqaq, u sodod mimlija.
Applikazzjonijiet differenti
| Kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC) | Metodu kromatografiku likwidu |
|---|---|
| Minħabba l-vantaġġi ta 'riżoluzzjoni għolja, sensittività għolja, veloċità għolja, użu ripetut ta' kolonni, u ġbir faċli ta 'komponenti effluwenti, kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja ġiet użata ħafna f'diversi oqsma bħall-bijokimika, analiżi tal-ikel, riċerka farmaċewtika, analiżi ambjentali , u analiżi inorganika, u saret l-aktar metodu promettenti biex issolvi problemi ta 'analiżi bijokimika. | Il-kromatografija likwida titħaddem f'temperatura tal-kamra u mhix limitata mill-volatilità u l-istabbiltà termali tal-kampjun. Huwa ideali għas-separazzjoni u l-analiżi ta 'sustanzi b'piż molekulari relattiv kbir, diffiċli biex jiġu vaporizzati, mhux faċilment volatili jew sensittivi għas-sħana, komposti joniċi u polimeri, li jammontaw għal madwar 70% sa 80% ta' sustanzi organiċi. |
Kif tixtri heater tal-kolonna HPLC?
Jekk inti interessat tagħna Ħiter tal-Kolonna HPLC jew għandek xi mistoqsijiet, jekk jogħġbok ikteb e-mail lil info@antiteck.com, aħna nwieġbuk kemm jista 'jkun malajr.