Tubi tal-pipetta huma meqjusa bħala wieħed mill-aktar utensili essenzjali fil-laboratorju, u jippermettu l-kejl tal-ammont ta 'likwidu u t-trasferiment tiegħu minn reċipjent għal ieħor. Peress li dawn it-tubi huma utilizzati ħafna drabi biex jimmanipulaw ħafna kimiċi differenti u kampjuni bijoloġiċi, m'għandhomx ikunu kkontaminati. L-isterilizzazzjoni tat-tubi tal-pipetta hija waħda mill-aktar metodi elementari fil-prattika tal-laboratorju, iżda anke kontaminazzjoni żgħira hija kritika fil-mikrobijoloġija, il-bijoloġija molekulari u l-kimika. Dan l-artikolu fih informazzjoni dwar il-metodi ta 'sterilizzazzjoni ta' tubi tal-pipetta, ir-rakkomandazzjonijiet, il-problemi, u l-importanza tal-ambjent sterili fil-laboratorju.
Sterilizzazzjoni tal- tubu tal-pipetta huwa kruċjali biex jiġu evitati kwalunkwe kumplikazzjonijiet li jistgħu jinqalgħu fl-esperimenti tal-laboratorju. Il-preżenza ta 'batterji, viruses, fungi, jew residwi kimiċi tista' tintroduċi varjabbli li jistgħu jwasslu għal riżultati mhux preċiżi. Tubi tal-pipetta mhux sterili huma perikolużi ħafna biex jintużaw f'sitwazzjonijiet kliniċi u dijanjostiċi minħabba li jżidu l-possibbiltà ta 'kontaminazzjoni inkroċjata, li tista' twassal għal dijanjosi jew kors ta 'trattament ħażin. Għalhekk, metodi xierqa ta 'sterilizzazzjoni għandhom jiġu impjegati għal skopijiet xjentifiċi, sigurtà u affidabilità fil-prattika klinika.
Il-metodi komuni huma awtoklavi, sterilizzazzjoni tas-sħana niexfa, sterilizzazzjoni kimika, u sterilizzazzjoni UV. Il-metodi kollha huma tajbin u ħżiena fil-mod tagħhom, u l-għażla tal-proċess tiddependi fuq it-tip ta 'esperimenti li se jitwettqu.
L-isem 'STERIS' sar l-istandard tad-deheb fl-isterilizzazzjoni.
L-isterilizzazzjoni tat-tubi tal-pipetta hija maħsuba b'mod wiesa 'li ssir l-aħjar permezz ta' awtoklavi. Dan il-proċess jinvolvi l-użu ta 'fwar saturat ta' pressjoni għolja bejn 121 ° C u 134 ° C. Is-sħana u l-pressjoni jeliminaw it-tipi kollha ta 'mikro-organiżmi, inklużi spori batterjali, li huma diffiċli ħafna biex jinqerdu b'metodi oħra ta' sterilizzazzjoni.
Lil tubi tal-pipetta awtoklavi, huma ġeneralment imqiegħda f'xtillieri awtoklavi jew trejs li jippermettu li l-fwar jippenetra kull pajp. Dan huwa minnu wkoll meta timla t-tubi sabiex ma jmissux lil xulxin, peress li dan jista 'jaffettwa d-distribuzzjoni tal-fwar u, għalhekk, sterilizzazzjoni inadegwata. Iċ-ċiklu tal-awtoklavi għal tubi tal-pipetta normalment jieħu 15-20 minuta, u ċiklu ieħor huwa meħtieġ biex jiżgura l-ebda umdità fuq it-tubi.
L-isterilizzazzjoni tas-sħana niexfa tinvolvi t-tqegħid tubi tal-pipetta f'forn u saħħanhom f'1600C u 1800C għal 1-2 sigħat. Huwa differenti mill-awtoklavi peress li ma jużax umdità, li jagħmilha adattata għall-isterilizzazzjoni ta 'tubi tal-pipetta tal-ħġieġ u partijiet tal-metall li jistgħu jissaddu jew jiġu traditi mill-fwar.
Sterilizzazzjoni tas-sħana niexfa ta ' tubu tal-pipetta isir f'forn ta 'sterilizzazzjoni, u t-tubi m'għandhomx imissu jew ikunu f'kuntatt mill-qrib. Dan l-arranġament jippermetti li l-arja sħuna tkopri kull tubu b'mod uniformi sabiex l-erjas tal-wiċċ kollha jilħqu t-temperatura meħtieġa. Meta l-proċess ta 'sterilizzazzjoni jitlesta, it-tubi jitħallew fil-forn biex jiksħu biex jipprevjenu xokk termali li jista' jikkawża li t-tubi tal-ħġieġ jitqassmu.
L-isterilizzazzjoni tas-sħana niexfa hija l-aktar utli għall-eliminazzjoni ta 'tagħbija mikrobjali u spori batterjali, prinċipalment permezz tal-ossidazzjoni tal-kostitwenti taċ-ċelluli. Madankollu, huwa aktar bil-mod mill-awtoklavi u juża aktar enerġija. L-isterilizzazzjoni tas-sħana m'għandhiex tintuża fuq tubi tal-pipetta tal-plastik minħabba li s-sħana ddgħajjef il-plastik u tista 'tagħmilha dewweb jew medd.
L-isterilizzazzjoni kimika tinvolvi l-użu ta 'kimika likwida jew gassuża biex tisterilizza tubi tal-pipetta. Japplika għal tubi li ma jistgħux jiġu sterilizzati permezz tas-sħana, bħal plastik jew gomma. Sterilanti kimiċi jinkludu ossidu tal-etilene, perossidu tal-idroġenu, glutaraldehyde, u aċidu perċetiku. Tali kimiċi jistgħu jinattivaw mikro-organiżmi billi jfixklu l-ħitan taċ-ċelluli tagħhom u funzjonijiet oħra.
Qabel l-isterilizzazzjoni kimika, it-tubi tal-pipetta jitlaħlaħ biex jeliminaw kwalunkwe materja organika li tista 'tirreaġixxi ma' l-aġent sterilizzanti. Skont it-tip ta 'kimika li għandha tiġi impjegata u l-livell ta' tniġġis, huma mqiegħda jew mgħottija bl-aġent kimiku għal żmien partikolari. Wara l-espożizzjoni, it-tubi jinħaslu b'ilma sterili biex titneħħa kwalunkwe fdal tal-kimika li tista' tinterferixxi ma' esperimenti oħra li jridu jsiru.
L-isterilizzazzjoni kimika tibbenefika materjali li ma jistgħux jiġu soġġetti għal sterilizzazzjoni awtoklavi jew bis-sħana niexfa. Madankollu, dan il-proċess jieħu aktar żmien u għandu jiġi mmaniġġjat u mxandar tajjeb peress li l-biċċa l-kbira tal-isterilanti kimiċi huma perikolużi għas-saħħa tal-bniedem. Barra minn hekk, xi kimiċi jistgħu jħallu depożiti li huma diffiċli biex jitneħħew, li jaffettwaw l-effiċjenza tat-tubi tal-pipetta.
L-isterilizzazzjoni UV hija proċess ta 'sterilizzazzjoni mhux termali li fih dawl UV ta' tul ta 'mewġ qasir, partikolarment dawl UV-C, jintuża biex jiddiżinfetta tubi tal-pipetta billi jinattiva mikro-organiżmi fuq il-wiċċ tat-tubi. Ir-radjazzjoni UV teqred il-mikro-organiżmi billi taffettwa d-DNA u l-RNA tagħhom, u b'hekk tipprevjeni r-riproduzzjoni tagħhom u toqtol iċ-ċelloli.
L-isterilizzazzjoni UV hija l-aktar adattata għall-isterilizzazzjoni tal-wiċċ ta 'barra tat-tubi tal-pipetta, li hija utli ħafna għal dawk il-pipetti diġà awtoklavi li jistgħu jerġgħu jintużaw wara xi żmien jew għal dawk il-pipetti li għandhom jerġgħu jiġu awtoklavati għal xi esperiment ieħor. Madankollu, id-dawl UV jista 'jkun aktar penetrattiv. Huwa inqas effettiv fit-tneħħija tal-wiċċ ta 'ġewwa tat-tubi tal-pipetta jew kwalunkwe parti oħra li mhix esposta direttament għad-dawl.
Għall-isterilizzazzjoni UV ta 'tubi tal-pipetta, it-tubi huma rranġati f'kabinett ta' sterilizzazzjoni UV jew taħt lampa UV sabiex l-uċuħ kollha tat-tubi jkunu esposti għad-dawl. Il-ħin ta' espożizzjoni jista' jvarja minn diversi minuti sa siegħa, skont l-intensità tad-dawl UV u l-firxa tal-kontaminazzjoni. Il-vantaġġ ewlieni tal-isterilizzazzjoni UV huwa li l-materjali huma sterilizzati mingħajr sħana jew kimiċi, u għalhekk, il-proprjetajiet tal-materjali ma jinbidlux.
Xi kunsiderazzjonijiet ewlenin jinkludu:
Tindif kif suppost qabel l-isterilizzazzjoni: Prekawzjoni oħra hija li jiġi żgurat li t-tubi tal-pipetta jitnaddfu sew qabel il-proċess ta 'sterilizzazzjoni sabiex l-ebda materjal organiku ma jitħalla lura, peress li dan jaffettwa l-isterilizzazzjoni tal-mikro-organiżmi. It-tindif jgħin ukoll biex jipprevjeni l-akkumulazzjoni ta 'fdal li jista' jnaqqas l-effettività tat-tubi tal-pipetta.
L-għażla tal-Metodu ta' Sterilizzazzjoni t-Tajjeb: Huwa rakkomandabbli li tagħżel l-aktar metodu ta 'sterilizzazzjoni xieraq skont il-materjal użat fit-tubi tal-pipetta u l-kontaminanti antiċipati. Ħafna applikazzjonijiet jippreferu l-awtoklavi, filwaqt li metodi oħra, bħas-sħana niexfa, it-trattament kimiku, jew l-espożizzjoni UV, huma adattati għal materjali sensittivi għas-sħana.
Validazzjoni u Kontroll tal-Kwalità: Huwa wkoll importanti li perjodikament tiġi eżaminata l-effiċjenza tal-proċess ta 'sterilizzazzjoni. Dan jista 'jsir permezz ta' testijiet bijoloġiċi, testijiet kimiċi, jew bl-użu ta 'strixxi ta' spori biex jiċċekkjaw li l-parametri ta 'sterilizzazzjoni jkunu ntlaħqu.
Immaniġġjar u Ħażna xierqa: Jekk it-tubi tal-pipetta jkunu ġew sterilizzati, m'għandhomx jintmess bejn wieħed u ieħor biex tiġi evitata l-kontaminazzjoni. Għandhom jinħażnu nodfa, preferibbilment f'kontenitur jew borża sterili.
Sterilizzazzjoni tat-tubu tal-pipetta hija waħda mill-aktar proċeduri kruċjali li għandhom jiġu osservati fil-laboratorju biex jiġu evitati esperimenti invalidati. Billi jifhem il-metodi varji ta 'sterilizzazzjoni u jipprattika l-miżuri t-tajba, il-persunal tal-laboratorju jista' jisterilizza tubi tal-pipetta, inaqqas il-kontaminazzjoni u jipprovdi riżultati ta 'esperiment preċiżi. Dan id-dokument wera li irrispettivament mill-metodu użat, kemm jekk awtoklavi, sħana niexfa, sterilizzazzjoni kimika, jew irradjazzjoni UV, il-prinċipji tal-isterilizzazzjoni tat-tubi tal-pipetta huma l-preparazzjoni, il-validazzjoni u l-immaniġġjar.
L-aktar teknika prevalenti hija l-awtoklavi. Dan jinvolvi l-applikazzjoni ta 'fwar ta' pressjoni f'121 ° C għal 15-20 minuta. Il-proċess tal-awtoklavi huwa effiċjenti fl-eliminazzjoni tal-mikro-organiżmi, inklużi spori batteriċi reżistenti.
Iva, tubi tal-pipetta jistgħu jiġu sterilizzati bis-sħana niexfa jekk huma reżistenti għas-sħana. Normalment, dan jeħtieġ trattament bis-sħana f'160 ° C sa 180 ° C (320 ° F sa 356 ° F) għal 1 sa 2 sigħat.
Metodu ieħor ta 'sterilizzazzjoni qed juża kimiċi, speċjalment meta t-tubi tal-pipetta jkunu sensittivi għas-sħana. Reaġenti kimiċi bħal ossidu tal-etilene jew fwar tal-perossidu tal-idroġenu jintużaw biex jitnaddfu t-tubi.