X'inhi pompa bi pressjoni għolja użata fl-HPLC?
Kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC) huwa ġeneralment magħmul minn sistema ta 'infużjoni (pompa), sistema ta' injezzjoni, sistema ta 'separazzjoni (kolonna), sistema ta' sejbien u sistema ta 'proċessar tad-dejta. Pompa hija l-aktar tagħmir importanti biex tiżgura t-tħaddim normali tal-istrument HPLC. L-ammont ta 'separazzjoni jiddependi ħafna fuq il-kapaċità tas-sistema ta' infużjoni li tikseb rata ta 'fluss preċiża u stabbli. Rati ta 'fluss preċiżi jfissru ħinijiet ta' żamma preċiżi. Mingħajr fluss riproduċibbli u kompożizzjoni tal-fażi mobbli, ma jistgħux jingħataw riżultati kwantitattivi. Il-kolonni użati fl-HPLC huma rqaq ħafna (1-6 mm) u d-daqs tal-fażi stazzjonarja użata huwa wkoll żgħir ħafna (ftit μm sa għexieren ta 'μm), għalhekk il-fażi mobbli hija soġġetta għal reżistenza għolja għall-fluss fil-kolonna . Fi pressjoni atmosferika, ir-rata tal-fluss tal-fażi mobbli hija bil-mod ħafna, u l-effiċjenza tal-kolonna hija baxxa u tieħu ħafna ħin. Sabiex tinkiseb separazzjoni veloċi u effiċjenti, għandha tiġi applikata pressjoni kbira għall-fażi mobbli biex taċċellera r-rata tal-fluss tagħha fil-kolonna. Għal dan il-għan, għandha tintuża pompa bi pressjoni għolja għal infużjoni bi pressjoni għolja.
Pompa bi pressjoni għolja użata fl-HPLC huwa li tapplika pressjoni għolja għall-fażi mobbli biex tħaffef il-fluss tagħha fil-kolonna. Pressjoni għolja u veloċità għolja huma waħda mill-karatteristiċi tal-HPLC.
Pompi bi pressjoni għolja użati fl-HPLC għandhom jissodisfaw il-kundizzjonijiet li ġejjin.
a. Rata tal-fluss kostanti, l-ebda pulsazzjoni, u firxa kbira ta 'aġġustament (ġeneralment 1 ~ 10 mL/min).
b. Reżistenti għall-korrużjoni tas-solvent.
c. Li jkollok pressjoni għolja ta 'infużjoni.
d. Għal separazzjoni ġenerali, pressjoni ta '60 × 10 ^ 5Pa hija biżżejjed, filwaqt li għal separazzjoni ta' effiċjenza għolja, pressjoni ta '150 ~ 300 × 10 ^ 5Pa hija meħtieġa.
Prinċipju ta 'ħidma ta' pompa ta 'pressjoni għolja użata fl-HPLC
il
pompa ta 'pressjoni għolja użata fl-HPLC huwa wieħed mill-komponenti ewlenin tal-istrument u huwa maqsum f'żewġ tipi skond il-prinċipju. Wieħed huwa pompa ta 'fluss kostanti, u l-oħra hija pompa ta' pressjoni kostanti.
Irrispettivament minn kif tinbidel ir-reżistenza tal-kolonna, irrispettivament mill-influwenzi esterni, ir-rata tal-fluss tal-ħruġ tal-fażi mobbli mill-pompa ta 'fluss kostanti tista' tibqa 'bażikament mhux mibdula, li hija eżattament ir-rekwiżit bażiku għax-xogħol tas-sistema HPLC.
L-output tal-pompa ta 'pressjoni kostanti hija bażikament pressjoni kostanti. Taħt kundizzjonijiet normali r-reżistenza tas-sistema HPLC ma tinbidilx, għalhekk pressjoni kostanti tista 'tikseb fluss kostanti. Madankollu, peress li l-kolonna u t-temperatura jistgħu jvarjaw, jista 'jikkawża li r-rata tal-fluss tinbidel.
Tip ta 'pompa ta' pressjoni għolja użata fl-HPLC
| Pompa użata fl-HPLC | deskrizzjoni |
| Pompa intermittenti | Pompi intermittenti jistgħu kontinwament iwasslu ċertu volum ta 'solvent sakemm is-solvent ikun eżawrit, għalhekk huma magħrufa wkoll bħala pompi tas-siringi.
Dan it-tip ta 'pompa normalment jintuża meta rata ta' fluss ta 'preċiżjoni għolja jeħtieġ li tinżamm. Pompi intermittenti jinkludu pompi tas-siringi u pompi ta' sostituzzjoni tal-bidu. |
| Pompa kontinwa | Pompi kontinwi huma l-aktar komunement użati u jistgħu kontinwament iwasslu solventi. Pompi tal-pistuni reċiproċi u pompi tad-dijaframma idrawliċi jappartjenu għal dan it-tip ta 'pompa. |
| Pompa parallela tal-planġer doppju | Pompa parallela b'żewġ planġers tgħaddi l-fażi mobbli kontinwament fil-kolonna. Il-pompa topera biż-żewġ plungers 180 grad barra mill-fażi, u l-pulsazzjoni ġġenerata mill-interazzjoni taż-żewġ plungers tnaqqas il-pulsazzjoni totali. Waqt li planġer wieħed qed jaħdem biex idaħħal il-fażi mobbli fil-kolonna, il-planġer l-ieħor qed jaħdem biex jiġbed il-fażi mobbli u jimla l-kamra tal-pompa. |
| Pompa tandem tal-planġer doppju | Pompa tandem tal-planġer doppju għandha solvent 2:1 fil-kavitajiet tal-pompa primarja u sekondarja. Meta l-pompa sekondarja tmigħ il-fażi mobbli fil-kolonna, il-pompa primarja terda likwidu biex timla l-kavità tal-pompa primarja. Meta l-kavità tal-pompa sekondarja titbattal, il-pompa prinċipali mhux biss tagħti likwidu biex timla l-kavità tal-pompa sekondarja iżda wkoll tgħaddi l-fażi mobbli fil-kolonna. |
| Pompa tal-pistun reċiproka/pompa tad-dijaframma | Il-pompa tal-pistun reċiprokanti/pompa tad-dijaframma għandha l-vantaġġ li żżomm il-planġer barra mill-kuntatt mal-fażi mobbli ta 'ħsara waqt l-użu u lubrikazzjoni aħjar tal-planġer. Naħa waħda tal-kisi tal-membrana tal-istainless steel taħżen iż-żejt, filwaqt li n-naħa l-oħra tkun f'kuntatt mal-fażi mobbli. Meta l-planġer reċiproku jsuq iż-żejt kontra d-dijaframma, il-fażi mobbli hija mitmugħa fil-kolonna. Meta l-planġer jinġibed lura, il-pressjoni tisparixxi u l-fażi mobbli tidħol fil-kamra tal-pompa fuq in-naħa tal-punent tad-dijaframma.
Hemm valv tal-ballun fil-pompa tal-pistun reċiprokanti. L-iskop tal-użu ta 'valv tal-ballun jew valv ta' verifika huwa li jiġi żgurat li l-fażi mobbli tiċċirkola f'direzzjoni waħda. Il-komponenti tal-valv tal-ballun jinkludu siegla taż-żaffir, ballun tar-rubini, u molla li tipprovdi tensjoni. Hekk kif il-planġer jiċċaqlaq biex jiġbed is-solvent mill-ġibjun tal-fażi mobbli, il-ballun tar-ruby fid-daħla jiġi mbuttat 'il fuq mir-rebbiegħa, li tippermetti li s-solvent jimla l-kamra tas-solvent. Il-ballun tar-ruby fl-iżbokk jinżamm kontra s-siegla, li tipprevjeni l-fluss lura tas-solvent li qabel daħal fil-kolonna. Hekk kif il-planġer jimxi 'l quddiem, il-fażi mobbli timbotta l-ballun tar-rubini fl-iżbokk tas-siegla. Fl-istess ħin, il-fażi mobbli timbotta l-ballun tar-ruby fid-daħla kontra s-siegla biex tevita li l-fażi mobbli tiċċirkola lura fil-ġibjun. |
Il-planġer fil-pompa ġeneralment ikun magħmul minn żaffir sintetiku, li għandu jiġi ċċekkjat perjodikament għal grif. Biex jinżamm il-ħin ta 'żamma u r-riproduċibbiltà taż-żona tal-quċċata, is-siġill tal-planġer għandu jiġi sostitwit perjodikament.
Ħafna sistemi ta' infużjoni (
pompi bi pressjoni għolja użati fl-HPLC) huma mgħammra b'filtru fil-linja jew filtru plug qabel l-injettur. Dan il-filtru jew l-iskrin iqis il-partiċelli ġġenerati mill-ilbies tas-siġill tal-pompa, li jipprevjeni l-partiċelli milli jagħmlu ħsara lill-valv tal-injezzjoni jew komponenti oħra. Jeħtieġ li jiġi sostitwit perjodikament.
L-għan tal-umidifikatur huwa li tnaqqas il-pulsazzjoni tal-pressjoni kkawżata mill-operazzjoni tal-pompa. L-umidifikatur jikkonsisti f'dijaframma li tifred il-fażi mobbli mil-likwidu kompressabbli u tinsab bejn il-kmamar tal-pompa primarji u sekondarji f'pompa kumpensata bil-planġer doppju.
Karatteristika ta 'pompa ta' pressjoni għolja użata fl-HPLC
Karatteristiċi tal-pressjoni tal-pompa HPLC
A. Reżistenza għall-pressjoni għolja
Ir-reżistenza għall-pressjoni għolja hija waħda mir-rekwiżiti bażiċi tas-sistema HPLC għal pompi bi pressjoni għolja. Ġeneralment, il-pressjoni massima tax-xogħol tal-pompa ta 'l-infużjoni hija 34.47-41.36Mpa (5000-6000psi) meta r-rata tal-fluss tal-fażi mobbli hija 1-3mL/min bl-użu ta' kolonna b'daqs medju ta 'partiċelli ta' madwar 4µm u dijametru ta 'ġewwa ta' madwar 5mm .
B. Stabbiltà tajba u pulsazzjoni żgħira
L-istabbiltà u d-daqs tal-pulsazzjoni tal-infużjoni pompa bi pressjoni għolja se jaffettwa direttament l-istabbiltà tas-sistema HPLC (drift u ripetibbiltà), jaffettwa l-istorbju tas-sistema, u jnaqqas is-sensittività. Iż-żamma ta 'stabbiltà u pulsazzjoni żgħira hija aktar importanti għal sistemi HPLC li jużaw ditekters bħal ditekters elettrokimiċi u differenzjali, jew għal separazzjoni tal-gradjent. Għalhekk, il-pulsazzjoni tal-pressjoni ta 'ħafna kurrenti pompi bi pressjoni għolja jistgħu jiġu kkontrollati sa 1%.
C. Rata tal-fluss aġġustabbli kontinwa u firxa wiesgħa ta 'fluss
Fil-preżent, il-firxa tal-fluss tal- pompa ta 'pressjoni għolja ta' HPLC jista 'jilħaq 0.001-10.0mL/min, u r-rata tal-fluss tal-kromatografija preparattiva hija saħansitra akbar, xi kultant teħtieġ eluf ta' mL/min, li jistgħu fl-istess ħin jissodisfaw ir-rekwiżiti tax-xogħol analitiku ta 'diversi kolonni b'dijametri interni differenti.
D. Ripetibbiltà tajba tar-rata tal-fluss
Ir-ripetibbiltà tal-fluss tal-pompa ta 'pressjoni għolja użata fl-HPLC tista' tilħaq 0.07% (RSD), iżda r-ripetibbiltà hija relatata mal-metodu tat-test.
a. Metodu tal-piż
Il-fluwidu tal-ħruġ għal kull unità ta 'ħin tal-pompa jinġabar u jintiżen direttament fuq il-bilanċ biex jiġġudika r-ripetibbiltà.
b. Metodu tal-ħin taż-żamma
Ir-ripetibbiltà tar-rata tal-fluss hija ġġudikata skont it-tul tal-ħin taż-żamma.
Fix-xogħol analitiku tal-HPLC, l-analiżi kwalitattiva tagħha hija ġeneralment ibbażata fuq il-ħin ta 'żamma. Ir-ripetibbiltà tal- pompa bi pressjoni għolja (RSD) huwa wieħed mill-indikaturi l-aktar importanti, huwa wkoll indikatur ta 'prestazzjoni importanti ħafna li jaffettwa r-ripetibbiltà tas-sistema HPLC kollha.
E. Volum żgħir mejjet
Il-volum mejjet tal- pompa bi pressjoni għolja jaffettwa l-preċiżjoni analitika u l-eżattezza tal-HPLC, speċjalment l-effett tal-eluzzjoni tal-gradjent. Volum mejjet żgħir tal-pompa bi pressjoni għolja jwassal għas-sostituzzjoni rapida tas-solventi u għall-iskariku f'waqtu tal-bżieżaq tal-arja mis-sistema. Għalhekk, l-iżgħar il-volum mejjet, l-aħjar.
F. Preċiżjoni ta 'rata ta' fluss għolja
Pompa ta 'pressjoni għolja HPLC l-eżattezza tar-rata tal-fluss hija importanti minħabba li taffettwa direttament ir-ripetibbiltà tad-dejta tat-test analitiku (affidabbiltà). Ir-ripetibilità tal-fluss tal-pompa HPLC domestika u barranija attwali hija ġeneralment madwar 1% (relatata mal-metodu tat-test), l-aħjar jista 'jilħaq 0.06%.
G. B'funzjoni ta 'eluzzjoni tal-gradjent
Fil-każ ta 'xogħol analitiku li ma jistax jiġi solvut bl-użu ta' elużjoni iżokratika, huwa possibbli li tissolva l-problema sew billi tuża l-metodu ta 'eluzzjoni tal-gradjent. Għalhekk, l-utenti tal-HPLC ħafna drabi jeħtieġu l-pompa ta 'pressjoni għolja tal-istrument biex ikollhom programm ta' rata ta 'fluss u programm ta' elużjoni tal-gradjent.
Kif tixtri pompa ta 'pressjoni għolja użata fl-HPLC?
ANTITECK jipprovdu apparat tal-laboratorju, konsumabbli tal-laboratorju, tagħmir tal-manifattura fis-settur tax-xjenzi tal-ħajja. Jekk inti interessat tagħna
pompa ta 'pressjoni għolja użata fl-HPLC jew għandek xi mistoqsijiet, jekk jogħġbok ikteb e-mail lil
[protett bl-email], aħna se nwieġbuk kemm jista 'jkun malajr.
