Анализатор аминокислот
Что такое аминокислотный анализатор?
Прибор, используемый для определения аминокислотного состава или содержания белков, пептидов и других фармацевтических препаратов, называется анализатор аминокислот.
Анализатор аминокислот использования катионообменная хроматография Разделение и постколоночная дериватизация с помощью нингидрина для анализа содержания белкового гидролизата и различных свободных аминокислотных компонентов. Базовая структура прибора аналогична структуре обычного ВЭЖХ, но оптимизирована для детального анализа аминокислот, например, защита азотом, инертные трубопроводы, онлайн-дегазация, градиент элюирования и контроль градиента температуры колонки.
Принцип работы анализатора аминокислот
Из-за различий в структуре, кислотности, полярности и молекулярном размере аминокислотных компонентов их можно выделить из катионообменной колонки. В аминокислотные компоненты можно последовательно элюировать, используя буферы с различной концентрацией ионов pH, а затем смешивать один за другим с другим потоком нингидринового реагента, после чего они вместе перетекают в спиральную реакционную трубку. Реакция развития окраски проводится при определенной температуре, обычно от 115 до 120 градусов Цельсия, в результате чего образуется сине-фиолетовый продукт с максимальным поглощением при 570 нм. Гидроксипролин реагирует с нингидрином с образованием желтого продукта с максимальным поглощением при 440 нм.
Анализаторы аминокислот обычно подразделяются на две системы: систему анализа гидролиза белка (система натриевой соли) и систему анализа свободных аминокислот (система соли лития). Среди них система анализа свободных аминокислот использует градиентное элюирование цитратом натрия или лития при различных концентрациях и значениях pH.
Система с натриевой солью анализирует до 25 аминокислот за раз, что быстрее и обеспечивает лучшую прямолинейность базовой линии. Система с литиевой солью анализирует до 50 аминокислот одновременно, ее скорость ниже, а базовый уровень, как правило, не так хорош, как у системы с натриевой солью.
Классификация аминокислотного анализатора
Рутинный анализ аминокислот относится к анализу 20 белково-гидролизованных аминокислот и более 40 свободных аминокислот. С момента своего появления в 1958 г. анализатор аминокислот постоянно обновляется современным аппаратным и программным обеспечением и в настоящее время превратилось в автоматизированное рутинное испытательное оборудование, необходимое для анализа аминокислот в современных пищевых продуктах, кормах, биотехнологиях, медицине и здравоохранении, а также в науках о жизни.
Анализаторы аминокислот можно разделить на два типа в зависимости от их методов разделения и обнаружения.
Первый тип — это классический метод, основанный на разделении с помощью катионообменной колонки и постколоночном фотометрическом определении производных нингидрина — ионообменная хроматография (ИЭХ). Этот тип метода был удостоен Нобелевской премии в 1972 году и сегодня является международным и национальным стандартом, а также используется в арбитражных и зарубежных исследованиях.
Ко второй категории относятся все методы высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), основанные на хроматографическом разделении с обращенной фазой, предколоночной дериватизации, флуоресцентном или УФ-детектировании, а также методы ионной хроматографии (ИХ) с прямым амперометрическим детектированием анионообменного разделения.
Сравнение характеристик методов анализа аминокислот
| IEC | ВЭЖХ | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| Принцип | Катионообменное разделение, фотометрическое определение дериватизации нингидрина после колонки | Высокоэффективная жидкостная хроматография, предколоночная дериватизация, определение фотометрическим методом | |||
| Производный реагент | нингидрина | ПИТЦ | OPA | ФМОК | AQC |
| Помехи подложки | / | ДА | ДА | ДА | ДА |
| Избыток реагента | Невмешательство | Нужно удалить | Невмешательство | Нужно удалить | Невмешательство |
| Детектор | Видимый свет | UV | Флуоресцентный | Флуоресцентный | Флуоресцентный |
| Предел обнаружения | от 3р до 50р моль | 50р моль | 1-5р моль | 1р моль | 3р моль |
| Преимущества | Этот метод является зрелым и надежным, с преимуществами лучшей стабильности, воспроизводимости и линейности, чем метод ВЭЖХ, отсутствием помех от матрицы, длительным сроком службы колонки и возможностью анализа 43 аминокислот за один раз. | Прибор многофункционален и обладает высокой чувствительностью к некоторым аминокислотам при коротком времени анализа. | |||
| Недостаток | Требования к высокой производительности для всей машины, требующие двойного градиента концентрации и температуры Программируемое управление. Инструментальная специализация. | Стабильность реакций и продуктов дериватизации часто нарушается матрицей и избытком реагентов. Стабильность, воспроизводимость, линейность и надежность метода не так хороши, как у нингидринового метода. Короткий срок службы колонки. Реагенты для дериватизации обычно дороги, а метод технически сложен. | |||
В целом МЭК превосходит ВЭЖХ, а прибор МЭК является специализированный автоматический анализатор аминокислот.
Применение анализатора аминокислот
Автоматический анализатор аминокислот
А. Применение в фармацевтической промышленности
Исследовательская физиология клетки Клетка является основной единицей жизнедеятельности. Он состоит из многих видов белков, а содержание белков и состав и содержание аминокислоты в них меняются при разных физиологических состояниях. Поэтому при изучении физиологии клетки необходимо анализировать белок-аминокислоты клетки с помощью анализатора аминокислот.
В лаборатории биохимии им. аминокислотный анализ необходим для изучения состава и строения белков и механизма действия ферментов.
B. Применение в сельском хозяйстве
При возделывании хороших сортов сельскохозяйственных культур необходимо учитывать высокую урожайность и приспособленность к почве, влаге, климату и т. д. Также важно ориентироваться на повышение содержания белка аминокислоты в семенах.
Добавление аминокислот в корм может ускорить производство, поэтому использование анализаторы аминокислот определить содержание аминокислот поможет корректировка рецептуры или добавление кормовых добавок.
Из-за загрязнения окружающей среды пестицидами большое внимание уделяется разработке экологически чистых пестицидов. В последние годы использование аминокислоты в качестве сырья для исследований пестицидов был достигнут большой прогресс, и теперь есть гербициды, изготовленные из глицина. При разработке пестицидов для разработки аминокислотного сырья использование анализаторы аминокислот помогает выполнять многие аминокислотные анализы.
C. Применение в пищевой промышленности
Улучшая переработку пищевых продуктов и разрабатывая новые продукты, разработчики должны учитывать пищевую ценность и вкусовые качества пищи. И вкусность еды связана с аминокислоты, такие как глутаминовая кислота и метиловая кислота, являются кислыми, ее натриевая соль - кислой, а глицин и аланин - сладкими. Пищевая ценность пищевых продуктов в основном определяется белками и аминокислотами, поэтому важно измерять содержание аминокислот в них при переработке пищевых продуктов.
В совершенствовании процесса, аминокислотный анализ необходимо сравнить до и после улучшения процесса, чтобы определить, осуществим ли новый процесс. В опытном производстве новых продуктов, анализаторы аминокислот также необходимы для определения количества аминокислот в новом продукте, определения его пищевой ценности и хороших вкусовых качеств. Кроме того, обогащение пищевых продуктов также требует добавления в пищу аминокислот, поэтому необходимо также проводить анализ аминокислот.
D. Применение в кожевенной промышленности
Мягкость и долговечность кожи зависят от количества содержащегося в ней гидроксипролина. анализаторы аминокислот необходимы при исследовании процесса дубления для определения количества гидроксипролина и других аминокислот.
Е. Применение в области разведки нефти
Содержание аминокислот в нефтяных породах является одним из важных данных для определения богатства нефтяных месторождений, поэтому анализаторы аминокислот часто используются для определения содержания аминокислот в нефтяных породах при разработке месторождений нефти.
Анализатор аминокислот использует
Аминокислотный анализатор slideshare
А. Обработка образца
Для определения различного содержания свободных аминокислот в образцах можно удалить примеси жира, а затем непосредственно проанализировать их на колонке.
Для определения аминокислотный состав белков образец должен быть гидролизован кислотой, чтобы белок полностью превратился в аминокислоты перед анализом на колонке.
Б. Анализ образцов
Обработанные образцы загружают в колонку для анализа. Количество пробы, загружаемой в колонку, определяется чувствительностью используемого автоанализатора. Как правило, это примерно 0.1 мкмоль каждой аминокислоты, а сухая масса гидролизованного образца составляет примерно 0.3 мг. Определение необходимо проводить при рН 5-5.5, 100°С, время реакции 10-15 мин.
Полученное пурпурное вещество измеряют колориметрически при 570 нм. Полученное желтое соединение измеряют колориметрически при 440 нм. Для полного выполнения требуется всего около 1 часа. аминокислотный анализ. Десятки образцов могут быть загружены в прибор одновременно и последовательно проанализированы автоматически, а полученные данные будут рассчитаны автоматически в конце. Градус прибора составляет от ±1 до 3%. Разделение и определение аминокислот на катионообменной колонке.
предосторожность
а. После включения прибора требуется 15-минутная процедура подготовки. Этот этап в основном предназначен для автоматической установки рабочего состояния и параметров каждого компонента, проверки состояния связи рабочей станции и каждого компонента, а также установки температуры и давления, поэтому не следует прерывать этот процесс искусственно.
б. Протеолитические аминокислоты и аминокислоты физиологических жидкостей (20 и 43) могут анализироваться непрерывно. автодозатор, которая автоматически распознается и записывается прибором без каких-либо дополнительных действий со стороны пользователя.
c. После анализа набора образцов прибор автоматически запустит постпрограмму для поддержания работоспособности системы, поэтому, пожалуйста, не завершайте эту программу искусственно.
d. В режиме ожидания автоматически включается стандартная программа цикла для поддержания работоспособности прибора. Расход реагентов в рамках этой программы очень мал (1 мл/час), поэтому пользователю не следует изменять эту настройку.
e. Прибор работает при давлении азота 0.4 бар; если давление азота будет слишком высоким, прибор выйдет из строя.
f. Проверьте, соответствует ли давление в потоке элюента и производного реагента заданным параметрам. автоматический анализатор аминокислот нормально.
g. Для лучшего обслуживания прибора рекомендуется добавить одну или две процедуры очистки или выполнить ручную очистку системы перед завершением программы после каждой партии образцов.
h. Если прибор временно отложен, рекомендуется извлечь колонку, промыть трубопровод прибора с высокой скоростью потока и заполнить трубопровод 40% изопропиловым спиртом.
i. Диапазон концентрации вводимого раствора составляет 0.4–4 нмоль. Из-за высокой чувствительности прибора, если концентрация вводимого раствора слишком высока, это повлияет на результаты анализа и может привести к засорению реактора.
Как купить анализатор аминокислот?
Если вы заинтересованы в нашем Анализатор аминокислот или есть какие-либо вопросы, пожалуйста, напишите по электронной почте info@antiteck.com, мы ответим вам как можно скорее.