Колба для клеточной культуры
Что такое колба для клеточных культур?
Культура клеток является очень важным экспериментальным методом и стал незаменимым методом исследований в области биофармацевтики, наук о жизни и клинической трансплантологии. Культивирование клеток должно осуществляться с помощью расходных материалов для достижения необходимых условий для роста клеток, и колба для клеточной культуры является одним из самых распространенных лабораторных инструментов.
Колбы для клеточных культур обеспечивают успешный рост и размножение клеток микробов, насекомых или млекопитающих. Культура клеток и тканей in vitro стала частью жизненных исследований и практики. Культивируется широкий спектр типов клеток, от вирусов до бактерий и грибков, от клеток человека до клеток животных и растений. Некоторые клетки и ткани можно выращивать в суспензии, но значительная часть клеток млекопитающих требует поверхностной аппозиции. Таким образом, культуральные колбы, планшеты и чашки, используемые для создания среды для культивирования клеток in vitro, не только прозрачны и нетоксичны, но и стерильны. Их также необходимо модифицировать на поверхности, чтобы они могли прикрепляться, делиться и расти.
Колба для суспензионных культур клеток
С вступлением в 21 век биология вступила в прорывную стадию развития, и положение наук о жизни в естественных дисциплинах коренным образом изменилось. Среди них молекулярная биология, генетика, клеточная биология, биология развития, неврология, экология, космические науки о жизни и другие дисциплины постепенно станут ведущими дисциплинами.
Молекулярная биология (включая молекулярную генетику) в русле наук о жизни, как и ее большая роль в содействии развитию наук о жизни в целом, неоспоримы. Клетка является основной структурно-функциональной единицей жизнедеятельности, клеточной биологии как базовой дисциплине статуса биологической науки также необходимо уделить внимание. Говоря о клеточной культуре, согласно действующей классификации клетки в основном делятся на: подвесные клетки и клетки стенки. Культура суспензионных клеток в настоящее время является основной и эффективной клеточной культурой в науках о жизни. Контейнеры, необходимые для экспериментов с суспензионными культурами клеток, также стали основным инструментом в работе ученых.
В настоящее время существует три типа обычных сосудов для суспензионных культур клеток, а именно:
А. Колба Эрленмейера
В 1861 году национальный учёный Эрленмейер, чтобы обеспечить термостойкость образца, провёл реакцию. колбаУсовершенствовали нагревательный сосуд и изобрели коническую колбу. Преимущество конической колбы заключается в её особой форме. По сравнению с круглой колбой... мерный стаканЭта особая форма повышает устойчивость инструмента и снижает вероятность его опрокидывания. Кроме того, во время встряхивания «горлышко» конической колбы уменьшает вероятность разбрызгивания жидкости внутри колбы, благодаря чему культуральный раствор не будет выплескиваться из сосуда во время культивирования суспензионных клеток, обеспечивая тем самым стабильность реакционной системы. В настоящее время типичные культуры клеток CHO, SF9, NK и др. выращиваются в колбах для встряхивания. Теоретически, для обеспечения достаточного количества растворенного кислорода объем культуры в колбе для встряхивания составляет около 10% от объема сосуда, но на практике его можно увеличить.
Б. Культуральная колба для клеток
В культурах клеток млекопитающих и насекомых, где клетки демонстрируют высокую жизнеспособность и экспрессию белка, АНТИТЕК флаконы всех моделей показывают значительное увеличение жизнеспособности клеток и активности в клеточной культуре. Благодаря уникальному спойлеру с низким сдвигом колба для клеточной культуры, эффективность аэрации увеличивается, так что объем наполнения может достигать 60% от общего объема. Другие типы колб для встряхивания могут вмещать только 30% от общего объема.
Команда колба для клеточной культуры обеспечивает здоровый рост клеток, что приводит к увеличению экспрессии целевых продуктов, таких как мембранные белки, секретируемые белки и моноклональные антитела; увеличение экспрессии белков клеток насекомых на 200%. Для некоторых стабильных клеток и клеток с временной экспрессией экспрессия белка может быть увеличена на 300%.
. колбы для клеточных культур, увеличен коэффициент объема наполняющей жидкости и увеличено выражение на единицу объема. Потребление культуральных колб и культуральной среды может быть существенно снижено. Колбы для клеточных культур с высокой воспроизводимостью, масштабируемым ростом субклеток от партии к партии и высокой стабильностью выхода.
К. Фернбах
Команда культуральная колба, названный в честь французского биолога Огюста Фернбаха, на самом деле является усовершенствованием колбы для встряхивания. Площадь дна колбы для встряхивания была увеличена, что увеличило площадь кислородного обмена между культуральной средой и воздухом. Доступны как плоские, так и резьбовые отверстия, поэтому можно выбрать дышащую крышку. Большое отверстие снижает сложность переноса среды. Перегородка на дне увеличивает поток жидкости при встряхивании бутылки, чтобы увеличить вероятность контакта между жидкостью и кислородом. Бутылка Баха увеличивает выход продукта больше, чем обычная бутылка для коктейлей.
Типы колб для клеточных культур
Культура клеток — это метод имитации среды in vitro для выживания, роста, воспроизведения и поддержания основных структур и функций. Для культивирования клеток используются различные расходные материалы для клеточных культур, из которых колбы для клеточных культур являются одними из наиболее интенсивно используемых.
Форма колба для клеточной культуры Бутылка имеет квадратную форму с широким горлышком, что облегчает сбор клеток. Матовая поверхность обычно используется на боковой стороне бутылки для удобства учета оператором. Что касается технических характеристик, то этот расходный материал обычно доступен в размерах 25 см², 75 см², 175 см², 225 см² и т.д. Обычно мы имеем в виду объем культуральной среды, который может вместить бутылка. В зависимости от характеристик существуют различные сценарии применения.
Небольшие бутыли 25 см2 и 75 см2 в основном используются для восстановления клеток и мелкомасштабного размножения, в основном на этапе предварительного культивирования. Его также можно использовать в качестве контейнера для хранения различных эритроцитов. Бутыли большего размера 175 см2 и 225 см2 в основном используются для средних культур клеток или экспрессии эукариотических белков и т. д. Бутыли большего размера 175 см2 и 225 см2 в основном используются для средних культур клеток или экспрессии эукариотических белков. Экспрессия белков — это метод молекулярной биологии, в котором для экспрессии белков экзогенных генов используются бактерии, дрожжи, клетки насекомых, клетки млекопитающих или клетки растений, и он является одним из важных компонентов технологии генной инженерии.
Колбы для клеточных культур в основном используются для культивирования клеток со стенками. Хотя их использование различается по спецификациям, все они должны соответствовать требованиям для роста клеток, таким как отсутствие ДНК-ферментов, отсутствие РНК-ферментов, отсутствие эндотоксинов, отсутствие источников животного происхождения, обработка поверхности ТС и т. д.
Использование колбы для культивирования клеток
Как лучше переваривать клетки в колбах для клеточных культур?
Колба для клеточной культуры является одним из наиболее часто используемых расходных материалов для культивирования клеток. Культивирование клеток — очень серьезная задача, требующая правильных условий для лучшего роста. Сбор клеток происходит, когда рост достигает определенного уровня. Когда используешь колбы для клеточных культур, можно выполнить следующие четыре шага.
а. Слейте старый субстрат и добавьте небольшое количество нового субстрата, чтобы промыть 1-2 раза. Цель этого — смыть как можно больше плавающих мертвых клеток.
б. Добавьте небольшое количество новой среды и один раз продуйте ее, чтобы удалить клетки, которые не прочно прикрепились к стенкам. Снова промойте средой и дважды перемешайте суспензию, чтобы перейти к новой. колба для клеточной культуры.
c. Отсосите оставшуюся жидкость из бутылки, добавьте около 0.3 мл трипсина для однократного промывания, отсосите и выбросьте, затем добавьте около 1 мл трипсина для переваривания. Когда станет очевидным расстояние между клетками, немедленно отсосите и выбросьте трипсин, добавьте новую среду и начните продувать, продуйте 2-3 раза, а затем отсосите суспензию. пробирка или новую бутылку для временного хранения. Промыть 2 мл новой среды и смешать с предыдущей.
d. Продолжите переваривание оставшихся прочно прикрепившихся клеток свежим трипсином, добавленным в колбу. Продолжайте микроскопическое наблюдение, и когда станут видны оставшиеся клеточные пустоты и клетки откроются независимо друг от друга, удалите трипсин, добавьте новую среду, продуйте и перелейте суспензию в новую бутылку для культивирования.
Вышеупомянутые шаги приведут к лучшему качеству клеток, переваренных из колб для клеточных культур, и лучшему состоянию роста во время более поздних пассажей.
Как заменить раствор в колбе для культивирования клеток?
В процессе культивирования клеток замена жидкости является очень рутинной операцией, которая в основном предназначена для удаления различных метаболических отходов, образующихся клетками во время роста, пополнения свежей культуральной среды и стимулирования роста клеток.
Для выполнения следующих шагов требуется спиртовой распылитель, содержащий 75% медицинский стерильный спирт, буфер PBS, среда, содержащая сыворотку, шприц Папаниколау, пипетка и банка для отходов.
а. Поместите оборудование на сверхчистый стол и включите УФ-излучение. облучение Для стерилизации. Если культивируемые клетки чувствительны к температуре, можно поместить флаконы с питательной средой, содержащей сыворотку, в водяную баню при температуре 37°C, чтобы довести температуру среды до 37°C, а затем перенести их на ультрачистый стол для УФ-стерилизации. Кроме того, помещение для культивирования клеток также необходимо облучать УФ-излучением в течение примерно получаса.
б. Извлеките флакон с клеточной культурой из инкубаторПродезинфицируйте поверхность бутылки с помощью распылителя с 75% спиртом, перенесите на идеально чистый стол, откройте крышку, аккуратно отберите старую культуральную среду и добавьте свежую среду, содержащую сыворотку, с помощью пипетки. Обратите внимание, что среду следует добавлять не со стороны придатков клеток, а со стороны боковой стенки, плавными движениями, чтобы не смыть клетки.
c. После добавления питательной среды закройте крышку и нанесите на бутылку такую информацию, как время замены жидкости, тип клеток и имя оператора.
d. Перед помещением бутылок в инкубатор следует еще раз обработать их поверхность спиртом, затем необходимо подготовить операционный стол, тщательно протереть его поверхность спиртом и убрать остатки жидкости и мусор.
При выполнении операции по обмену жидкости обратите внимание на асептику на протяжении всего процесса. Операторы должны носить стерилизованную одежду, стерилизованные перчатки и маски и должны быть осторожны, когда их руки касаются рта аппарата. бутылка для клеточной культуры чтобы избежать загрязнения.
Как купить колбу для клеточных культур?
Если вы заинтересованы в нашем Колба для клеточной культуры или есть какие-либо вопросы, пожалуйста, напишите по электронной почте info@antiteck.com, мы ответим вам как можно скорее.