Криотрубки
Что такое криопробирки?
Для обеспечения воспроизводимости и непрерывности результатов в научных исследованиях и биомедицинских процессах перед современными учеными стоит задача сохранения живых клеток и организмов с оптимальной жизнеспособностью и обеспечения неизменности субклеточных компонентов, таких как нуклеиновые кислоты и белки. Криопробирки, также известный как криогенные флаконы для храненияявляются особым типом пробиркаОни могут использоваться для криогенного хранения образцов, сохраняя такие образцы, как цельная кровь, сыворотка, клетки и т. д. В биологической, фармацевтической и пищевой промышленности они обычно применяются в качестве носителей для низкотемпературной транспортировки и хранения биологических материалов.
Не все криопробирки можно использовать для работы с жидким азотом. криогенный флаконы для жидкого азота предназначены для удовлетворения требований температуры жидкого азота. Это специальные криопробирки с высокой герметичностью и устойчивостью к низким температурам.
Размеры криопробирок
Не существует конкретной классификации крио трубка, он обычно делится в зависимости от емкости следующим образом:
| Размеры криопробирок |
|---|
| 0.5 мл криогенные флаконы |
| 1 мл криогенные пробирки / 1 мл криопробирки |
| 1.5 мл криогенные пробирки / криогенные флаконы 1.5 мл / криопробирки 1.5 мл |
| криопробирка 1.8 мл / криопробирка 1.8 мл |
| 2 мл криогенные пробирки / криопробирки 2 мл / криопробирки 2 мл / 2 мл криогенные флаконы / криогенные флаконы 2 мл / криопробирки 2 мл |
| 4 мл криогенные пробирки |
| криопробирки 5 мл / криогенные пробирки 5 мл / криопробирки 5 мл / криопробирки 5 мл / криопробирки 5 мл |
| 7 мл криогенные пробирки |
| 10 мл криогенные пробирки |
Особенности криопробирок
Безопасность криопробирок
Криопробирки Лабораторные пробирки, используемые для хранения образцов при низких температурах. Неправильное использование криотрубка может вызвать взрыв, что приведет к утечке опасных материалов и, в тяжелых случаях, даже к травмам. Чтобы снизить риск крио трубка взрыва, пожалуйста, обратите внимание на следующие рекомендации при его использовании.
a. Криотрубка обычно изготавливается из полиэтилена высокой плотности или полипропилена. Его можно разделить на две категории в соответствии с различными сценариями использования. Один криопробирки для клеточных культур а другой криопробирки для жидкого азота. Эти два типа криопробирки должны быть тщательно различены перед покупкой и использованием, так как их применимые температуры особенно различаются.
| Размеры криопробирок |
|---|
| 0.5 мл криогенные флаконы |
| 1 мл криогенные пробирки / 1 мл криопробирки |
| 1.5 мл криогенные пробирки / криогенные флаконы 1.5 мл / криопробирки 1.5 мл |
| криопробирка 1.8 мл / криопробирка 1.8 мл |
| 2 мл криогенные пробирки / криопробирки 2 мл / криопробирки 2 мл / 2 мл криогенные флаконы / криогенные флаконы 2 мл / криопробирки 2 мл |
| 4 мл криогенные пробирки |
| криопробирки 5 мл / криогенные пробирки 5 мл / криопробирки 5 мл / криопробирки 5 мл / криопробирки 5 мл |
| 7 мл криогенные пробирки |
| 10 мл криогенные пробирки |
б. Все криопробирки флаконы должны иметь силиконовую прокладку, резиновую прокладку или уплотнительное кольцо для обеспечения герметичности. Обратите внимание, что чрезмерное затягивание крышки может привести к деформации уплотнения.
c. Криопробирки следует хранить в газовой фазе над жидким азотом и не погружать в жидкость во избежание проникновения жидкого азота в пробирки. Следует избегать переполнения контейнеров для хранения. Если образцы должны храниться в жидкой фазе, рекомендуется использовать профессиональный защитный рукав от надежного поставщика, обеспечивающий дополнительное внешнее уплотнение.
d. Во время замораживания и хранения клеток температура замерзания в пробирках должна быть равномерной. Неравномерное замерзание приведет к образованию ледяных пробок в пробирке. Ледяные пробки могут препятствовать передаче температуры жидкости с обеих сторон, создавая опасно высокое давление и повреждая пробирку.
e. Не замораживайте больше образцов, чем максимальный рабочий объем. крио трубка предел.
падать криотрубки иметь возможность взрыва. Особенно, криопробирки используется для хранения образцов, хранящихся в жидком азоте, может взорваться без предупреждения. Считается, что взрыв трубки был вызван тем, что жидкий азот попал в трубку через крошечные трещины, а затем быстро расширился по мере оттаивания трубки. Поэтому во время работы необходимо использовать средства безопасности. крио флакон Ледяной покров сходит. Вам следует надеть защитная масказащитные очки, толстые перчатки и застегнутая на пуговицы рубашка лабораторный халат При проведении этой операции надевайте поверх брюк или длинной юбки. При размораживании криопробирок следует сразу после извлечения поместить их в водяную баню при температуре 37 °C. Затем следует осторожно встряхнуть пробирку, чтобы разморозить ее в течение 1 минуты. Следите за тем, чтобы вода не выходила за края крышки морозильной камеры, иначе может произойти загрязнение. Из-за высокой температуры в помещении летом следует проявлять особую осторожность при доступе к охлаждающим трубам.
Крышки криопробирок
Крышка крио трубка Они делятся на два типа — с внутренней и внешней винтовой крышкой.
Внутренняя завинчивающаяся крышка криопробирок
Криопробирки с внутренними завинчивающимися крышками используются для замораживания биологических образцов в жидком азоте. Силиконовая прокладка на горловине трубки усиливает герметизацию трубки, что может эффективно остановить проникновение жидкого азота.
Внешняя завинчивающаяся крышка криопробирок
Криопробирки с внешними завинчивающимися крышками используются для замораживания образцов в холодильнике. Резьбовая крышка с внешней резьбовой крышкой снижает вероятность загрязнения при работе с образцами.
Преимущества криопробирок
а. Крышка сконструирована таким образом, чтобы ее было легко поворачивать и открывать.
b. И крышка, и корпус трубки изготовлены из одной и той же партии полипропилена (ПП). ПП — прочный и химически стойкий материал. Одинаковый коэффициент теплового расширения обеспечивает герметичность криотрубки при любой температуре.
c. Большая область для удобного письма.
d. Пробирка прозрачная, что облегчает осмотр образца.
e. Можно кипятить и автоклавировать, не содержит РНКазы/ДНКазы, не требует нагрева.
f. Круглое дно криотрубки облегчает переливание жидкостей и уменьшает образование осадка.
Использование криопробирок
Функция криопробирки заключается в сохранении образцов при низких температурах. Обладает лучшей устойчивостью к низким температурам, чем трубы EP. Как правило, материал становится хрупким при понижении температуры, а температура хрупкости замороженной трубки ниже.
Современный метод длительного сохранения клеток заключается в их замораживании в жидком азоте (-196 °C) на срок до одного года или даже нескольких лет. Большинство клеток способны расти и размножаться после размораживания перед использованием. Для надлежащего хранения клетки следует реанимировать и культивировать после года замораживания, а затем снова заморозить. При замораживании клеток следует добавлять защитные агенты, иначе вода внутри и снаружи клеток образует кристаллы льда и вызовет механическое повреждение клеток. Температуру замерзания можно понизить, добавив защитный агент. В условиях медленного замораживания вода внутри клетки вытекает до замерзания, чтобы избежать повреждения кристаллами льда. Кроме того, в культуральную среду добавляют культуральную жидкость. лиофилизация Раствор обеспечивает питание, осмотическое давление и pH. Восстановление клеток подразумевает размораживание замороженных клеток. Размораживание клеток должно быть быстрым, чтобы они быстро прошли через наиболее уязвимые температуры от -5℃ до 0℃.
Использование крио трубка Это не такой простой процесс, как, например, первое открытие. резервуар с жидким азотомВо-вторых, установка трубок; в-третьих, закрытие резервуара. При использовании существуют определенные риски для безопасности. криотрубки, поэтому их научное и правильное использование может избежать потери образцов и защитить безопасность испытательного персонала.
Этапы замораживания клеток
а. Промойте клетки предварительно подогретым раствором PBS. Во время аспирации покройте клетки раствором, содержащим трипсин и ЭДТА; достаточно тонкого слоя жидкости. Концентрацию трипсина и ЭДТА необходимо определять в зависимости от клеточной линии.
б. Инкубируйте клетки при 37°C в течение 3-5 минут.
c. После того, как клетки отделятся от дна, прекратите инкубацию. Добавьте среду, содержащую сыворотку, и осторожно суспендируйте клетки с помощью пипетки.
d. центрифуга Клеточную суспензию (500 xg, 5 мин) ресуспендировать в среде, содержащей сыворотку.
т. е. Подсчет клеток.
f. Центрифугируйте клеточную суспензию (500 xg, 5 мин). Удалите надосадочную жидкость и ресуспендируйте клетки в соответствующем объеме среды, содержащей сыворотку.
g. Клетки и лиофилизационный раствор (60% среды, 20% фетальной бычьей сыворотки, 20% ДМСО) смешивают в объемном соотношении 1:1 и переносят в криогенные пробирки. Плотность замороженных клеток составляет 1-5×106⁶ клеток/мл.
h. Криопробирки с клетками рекомендуется охлаждать со скоростью -1 К/мин и помещать в контейнер с изопропанолом при -70°C. Если пробирки используются для хранения других образцов, их можно помещать непосредственно при -20°C, -70°C или в газовую фазу жидкого азота. Для обеспечения равномерного замораживания образцов криопробирки объемом 4 мл и 5 мл необходимо поместить в холодильник при -20°C на ночь перед переносом в холодильник при -70°C или в газовую фазу жидкого азота.
i. Затем перенесите пробирки в резервуар с жидким азотом. Во избежание загрязнения и из соображений безопасности лучше помещать криопробирки в газообразную фазу жидкого азота, а не непосредственно в жидкую фазу. (Внимание: при использовании неправильных методов хранения оставшийся в криопробирке жидкий азот может привести к взрыву или утечке биологически опасных веществ из-за испарения.)
Этапы восстановления клеток
а. Извлеките криопробирку из жидкого азота с помощью больших щипцов и поместите ее в воду при температуре от 37℃ до 42℃. Периодически встряхивайте ее, чтобы она быстро прошла диапазон температур от -5 до 0℃. Постоянно встряхивайте, чтобы она быстро прошла диапазон температур от -5 до 0℃.
б. На сверхчистом столе горлышко криопробирки следует протереть абразивным кругом и стерилизовать спиртовыми ватными шариками. Затем открыть криопробирку и откачать клеточную суспензию в культуральную среду. колбаРазбавьте его в 10 раз и инкубируйте в атмосфере CO2. инкубаторНа следующий день среду для замораживания следует заменить свежей культуральной средой.
Как купить криопробирки?
Если вы заинтересованы в нашем Криотрубки или есть какие-либо вопросы, пожалуйста, напишите по электронной почте info@antiteck.com, мы ответим вам как можно скорее.