Машина для тонкослойной хроматографии
Что такое тонкослойная хроматография?
Тонкий слой хроматографический аппарат это своего рода лабораторный сканер для количественного анализа образцов по принципу тонкослойной хроматографии.
Что такое тонкослойная хроматография?
Тонкослойная хроматография назван потому, что разделение выполняется на плоском тонком слое. Тонкослойная хроматография представляет собой метод хроматографического разделения для разделения, идентификации и количественного определения смешанных образцов с использованием подходящего растворителя в качестве подвижной фазы и носителя, нанесенного на опорную пластину, в качестве неподвижной фазы. Это быстрый, простой и микроскопический хроматографический метод, разработанный в конце 1940-х годов.
В 1938 году Измайлор и Шрайбер нанесли тонкий слой оксида алюминия на предметное стекло микроскопа, нанесли на тонкую пластину вещество, которое нужно было разделить, и поместили разрыхлитель вертикально на точку отбора проб ZX с помощью капиллярной трубки, и развёртыватель вытек. из капиллярной трубки, таким образом, успешно разделяя компоненты различных растительных спиртовых экстрактов.
В 1950-х годах К. Ренер и Миллер, основываясь на предыдущих исследованиях, использовали силикагель в качестве адсорбента и гипс в качестве связующего, нанесли силикагель на стеклянную пластину тонким слоем и провели разделение веществ. что также является тонкослойная хроматография в современном понимании.
Основной принцип тонкослойной хроматографии
Тонкослойная хроматография использует разную адсорбционную способность каждого компонента по отношению к одному и тому же адсорбенту, так что в процессе протекания подвижной фазы (растворителя) через стационарную фазу (адсорбент) непрерывно генерируются адсорбция, десорбция, реадсорбция и резорбция, таким образом достигается отделение каждого компонента друг от друга.
Адсорбция – важное свойство поверхностей. Любые две фазы могут образовывать поверхность, и адсорбция — это интенсивное явление вещества одной из фаз или растворенного в ней растворенного вещества на этой поверхности. Адсорбция может происходить на поверхностях между твердыми телами и газами, между твердыми телами и жидкостями, между адсорбированными жидкостями и газами.
Процесс адсорбции обратим, и адсорбированный материал может быть десорбирован при определенных условиях. Между молекулами, адсорбированными на определенном участке поверхности адсорбента, и молекулами, покидающими эту поверхность в одну и ту же единицу времени, может установиться динамическое равновесие, называемое адсорбционным равновесием. Процесс адсорбционной хроматографии представляет собой процесс динамического равновесия, который постоянно создает равновесие и неравновесие, адсорбцию и десорбцию.
Причина, по которой молекулы вещества могут оставаться на поверхности твердого тела, заключается в том, что молекулы (ионы или атомы) на поверхности твердого тела и молекулы внутри твердого тела не одинаково притягиваются друг к другу. Внутри твердого тела силы, взаимодействующие между молекулами, симметричны, и их силовые поля компенсируют друг друга. Силы, действующие на молекулы на поверхности твердого тела, асимметричны: на внутреннюю сторону действует большая сила со стороны молекул внутри твердого тела, а на поверхностный слой действует небольшая сила, и, таким образом, молекулы газа или растворенного вещества притягиваются. остаться, когда они сталкиваются с поверхностью твердого тела в движении этой остаточной силой.
Основным принципом использования силикагеля и оксида алюминия в качестве носителей, например, является различие между силой адсорбции и коэффициентом распределения, что позволяет разделить смесь. При движении растворителя вдоль адсорбента он увлекает с собой компоненты пробы, при этом происходит непрерывная адсорбция и десорбция, а также многократное разделение.
Классификация тонкослойной хроматографии
Тонкослойная хроматография можно разделить на тонкослойный метод распределения, тонкослойный метод адсорбции и тонкослойный метод ионного обмена в зависимости от характера неподвижной фазы и различных механизмов разделения. Среди них наибольшее распространение получили адсорбционный тонкослойный метод и распределительный тонкослойный метод.
А. Метод тонкослойной дисперсии
Распределительный тонкослойный метод использует жидкость в качестве неподвижной фазы. Жидкую неподвижную фазу предварительно прикрепляют к носителю (пористому химически инертному твердому веществу), затем неподвижную фазу наносят на пластину и образец разворачивают.
Б. Метод адсорбции тонкого слоя
Процесс равномерного распределения стационарной фазы (адсорбента) на гладкой поверхности тонкослойной пластины и нанесения анализируемого раствора пробы в соответствующем месте на одном конце пластины называется пятнистостью.
Точка решения пробы называется исходной точкой. Поместите тонкую пластину в закрытую разворачивающуюся емкость (камеру), опустите конец образца в соответствующий официальный растворитель, при капиллярном воздействии адсорбента на тонкую пластину растворитель, несущий разделенные компоненты для продвижения вперед, называется проявкой.
Во время проявления компоненты в образце непрерывно адсорбируются, десорбируются, ресорбируются и десорбируются между неподвижной фазой и проявляющим растворителем. Из-за различной адсорбционной способности различных компонентов неподвижной фазы легко адсорбируемые компоненты перемещаются относительно медленно, тогда как трудно адсорбируемые компоненты перемещаются относительно быстро. Через некоторое время, когда фронт разворачивающего агента достигает заданного положения, тонкослойная пластина удаляется, и компоненты с разной адсорбционной способностью могут образовывать на тонкослойной пластине пятна, отделенные друг от друга. Если компоненты представляют собой бесцветные вещества, их можно позиционировать после проявления окраски физическими или химическими методами.
C. Метод ионообменного тонкого слоя
В тонкослойном ионообменном методе в качестве стационарной фазы используется ионообменная смола. Обычно ионообменная смола измельчается до 200-40 меш, а затем наносится на поверхность стекла, металлического листа или других материалов, чтобы сделать тонкий слой пластины, а затем точечный образец разворачивается.
Компоненты испытуемого вещества заменяются ионообменной смолой. Компоненты с высокой обменной способностью заменяются первыми, а компоненты с плохой обменной способностью уносятся разворачивающим агентом, а затем снова заменяются, так что разные компоненты разделяются.
Классификация тонкослойной хроматографии
Обычный сканер для тонкослойной хроматографии
Традиционный сканер для тонкослойной хроматографии представляет собой полноволновой сканер, предлагающий выбор длин волн в диапазоне 200-800 нм и определяющий содержание вещества путем регистрации интенсивности поглощения света образцом. Сканер также может регистрировать интенсивность флуоресценции, генерируемой УФ-излучением. облучение при 254 нм или 365 нм, что позволяет осуществлять специфическое обнаружение.
Методы сканирования обычных сканеров делятся на однолучевое сканирование, двухлучевое сканирование и сканирование с двумя длинами волн.
А. Однолучевой сканер
При однолучевом сканировании используется один луч. Прибор прост по устройству, но базовая линия нестабильна и редко используется на практике.
Б. Двухлучевой сканер
Двухлучевой сканер использует два луча с одинаковой длиной волны для одновременного сканирования, при этом один луч сканирует канал развертывания образца, а другой луч сканирует пустую область рядом с каналом образца, так что можно вычесть холостое поглощение, частично устраняя ошибка, вызванная неравномерным распределением в направлении развертывания тонкослойной пластины. Однако он не может устранить ошибку, вызванную неравномерным разбрасыванием в направлении разбрасывания.
C. Двухволновой сканер
Два луча с разной длиной волны поочередно сканируют площадь развернутого канала образца. Одна длина волны должна быть установлена при выборе длины волны для положения максимального поглощения образца, а другая – для положения минимального поглощения. Этот метод может в основном устранить ошибку, вызванную неравномерным распространением пластины, поэтому базовая линия сканирования очень стабильна.
Анализатор тонкослойных цифровых изображений
Анализ тонкослойного цифрового изображения — это метод анализа тонкого слоя, в котором используется цифровое оборудование обработки изображений для получения информации об интенсивности света в каждой точке на тонкослойной пластине, а затем анализируется полученное изображение. Существует два типа цифровых устройств обработки изображений, а именно камеры и сканеры. Поскольку в цифровом сканере используется прогрессивная технология обработки изображений, цифровой сканер называется прогрессивным сканером, чтобы отличать точечное сканирование от обычного тонкослойного сканера.
Как и обычные тонкослойные сканеры, обе камеры или прогрессивные сканеры имеют системы обнаружения света, которые представляют собой компоненты, линейно преобразующие количество света в электрический сигнал. Разница в том, что камеры и прогрессивные сканеры могут дополнительно преобразовывать электрический сигнал в компьютеризированное изображение, где цветовые оттенки отдельных точек (пикселей) изображения отражают интенсивность света.
Таким образом, тонкослойное цифровое изображение ближе к наблюдению и обнаружению человеческим глазом, а результаты более интуитивны, что делает его идеальным для идентификации, особенно для картирования отпечатков пальцев растительных лекарственных средств.
Использование тонкослойной хроматографии
а. Смешайте 1 часть стационарной фазы и 3 части воды в ступке в одном направлении. Удалив пузырьки воздуха с поверхности, вылейте смесь в аппликатор. Плавно перемещайте аппликатор по стеклянной пластине для нанесения покрытия (толщина 0.2-0.3 мм). Снимите тонкий слой покрытия со стеклянной пластины, поместите ее на горизонтальный стол для просушки при комнатной температуре, а затем запеките при 110℃ в течение 30 минут. Поместите в сушильный шкаф и отставьте в сторону. Перед использованием проверьте однородность покрытия (ее можно проверить в проходящем и отраженном свете).
b. Образец наносился на тонкослойную пластину с помощью точечной метки, как правило, в виде круглого пятна. Базовая линия образца находилась на расстоянии 2.0 см от нижнего края, диаметр точек образца и расстояние между ними были такими же, как при методе бумажной хроматографии, а расстояние между точками можно рассматривать как разброс пятен, не влияющий на обнаружение. При нанесении образца необходимо соблюдать осторожность, чтобы не повредить поверхность тонкого слоя.
c. Если необходимо предварительно пропитать цилиндр размазывающим составом, добавьте достаточное количество размазывающего состава в цилиндр и приклейте две полоски. фильтр Наклейте на стену бумагу той же высоты и ширины, что и цилиндр, окуните один конец в растекающийся состав, закройте крышку цилиндра и выполните балансировку системы или работайте в соответствии с инструкцией. Поместите образец в проявочный состав проявочного цилиндра и погрузите образец в проявочный состав на глубину 0.5–1.0 см от нижнего края пластины (не погружайте образец в проявочный состав полностью). Закройте крышку цилиндра. После проявления снимите ламинат на заданное расстояние (обычно 10–15 см) и дайте ему высохнуть. Затем проведите испытания в соответствии с требованиями для каждого вида материала.
d. Если хроматографические пятна необходимо сканировать для обнаружения с помощью машина для тонкослойной хроматографии или количественно путем сканирования хроматографических пятен непосредственно на тонком слое, используется метод тонкослойного сканирования.
Как выбрать аппарат для тонкослойной хроматографии?
Если вы заинтересованы в нашем Машина для тонкослойной хроматографии или есть какие-либо вопросы, пожалуйста, напишите по электронной почте info@antiteck.com, мы ответим вам как можно скорее.