Счетчик ячеек
Что такое счетчик ячеек?
Чтобы гарантировать качество клеток для последующих экспериментов, многие лаборатории проверяют концентрацию и жизнеспособность клеток, традиционно с помощью красителя тайпанского синего для клеток млекопитающих и красителя меланина для дрожжей. Оба красителя окрашивают ядро, и когда клетки живы, мембрана избирательно проницаема, и краситель не может проникнуть в клетку. Когда клетка мертва, селективная проницаемость мембраны теряется, и краситель может проникнуть в ядро и окрасить клетку. Это позволяет различать клетки как мертвые или живые. Традиционные счетчики крови со сложной работой и большими погрешностями все чаще заменяются автоматизированными счетчиками клеток. Счетчик ячеек имеет множество функций, обеспечивающих точность и стабильность результатов подсчета.
а. Точная и быстрая базовая функция подсчета. Применение множества технологий, таких как высокое разрешение, автоматическая оптическая фокусировка, многополевой анализ и большой объем статистической выборки, обеспечивает точность и воспроизводимость результатов подсчета.
b. Инновационная функция коррекции агломерированных клеток. Для обычных и агломерированных клеток предусмотрены различные режимы, а также доступна инновационная функция коррекции агломерированных клеток.
c. Тщательная ручная коррекция функции учета примесей. Отклонение результатов, вызванное посторонними примесями, может быть устранено вручную на основе анализа программного обеспечения.
d. Универсальная функция статистического анализа данных. Она включает кривую пролиферации клеток (CTC), распределение диаметров клеток, распределение клеточных узелков, а также наложенный анализ каждого статистического графика.
e. Гибкие и разнообразные функции вывода данных.
f. Расширенные функции защиты данных. Благодаря ключу безопасности программного обеспечения, система устанавливает права доступа пользователя и автоматически сохраняет все результаты экспериментов.
Методы, используемые для подсчета клеток
Счетчик клеток
А. Окрашивание синим тайпаном
Принцип окрашивания заключается в том, что Tissue blue не может проникнуть через неповрежденную клеточную мембрану живых клеток, поэтому живые клетки не окрашиваются; тогда как клеточная мембрана мертвых клеток повреждена, и краситель проникает через клеточную мембрану, делая клетки синими. Однако окрашивание Tissue blue не всегда точно различает ядерные клетки и клеточный дебрис, поэтому оно имеет тенденцию недооценивать общее количество клеток и переоценивать жизнеспособность клеток.
Б. Флуоресцентный подсчет клеток
Принцип окрашивания акридиновым оранжевым/йодидом пропидия (AO/PI): живые клетки флуоресцируют зеленым цветом при окрашивании АО, тогда как мертвые клетки флуоресцируют красным цветом при окрашивании PI. Важно отметить, что клетки со сложным фоном, такие как мононуклеарные клетки периферической крови, содержащие большое количество клеточного дебриса или клеток в кластерах, подсчитывают, избегая обнаружения клеточного дебриса. Этот подход также недавно был применен к приложениям геномики отдельных клеток, где зеленый цвет соответствует интактным клеткам, а красный цвет соответствует успешно выделенным ядрам. Эта стратегия позволяет исследователям рассчитать процент нелизированных остаточных клеток от общего количества клеток, одновременно подсчитывая ядра, предлагая качество образца и помогая исследователям определить, следует ли продолжать процессы геномики отдельных клеток.
C. Автоматический счетчик флуоресцентных клеток
Полностью автоматизированный флуоресцентный анализатор клеток, сочетание яркого поля и двухцветного флуоресцентного канала делает эксперимент проще и быстрее, а также имеет функцию обнаружения трансфекции, которая еще больше расширяет диапазон обнаружения. Обнаружение большего количества клеток применимо не только к простым культивируемым клеткам, но также позволяет быстро подсчитывать и анализировать образцы клеток самого разного типа и происхождения, выделенные из тканей, костного мозга, периферической крови, альвеол и печени. Флуоресцентные цифровые изображения, полученные с помощью микроскопии, автоматически анализируются с помощью технологии флуоресцентной маркировки и технологии распознавания классификации изображений, чтобы получить мертвые или живые статусы клеток, апоптоз и осуществить классификацию клеток.
Технические характеристики
а. Различные режимы обнаружения: подсчет без окрашивания + подсчет с окрашиванием + двухцветный флуоресцентный подсчет + режим ручной калибровки + трансфекция.
b. Автофокус, без ручного вмешательства для регулировки фокуса.
c. Полностью автоматический подающий стол: возможно автоматическое перемещение в направлениях X и Y; соответствует стандартам подсчета микроскопов, автоматически собирает данные из 4 стандартных областей.
d. Пиксели: камера с 10 миллионами цветов.
e. Диапазон определения диаметра клеток: 2-200 мкм.
f. Диапазон измерения концентрации клеток: 0.25×104⁴ - 3×107⁷ клеток/мл.
g. Совместимо с многоразовыми стандартными стеклянными счетными пластинами.
h. Получение изображений: при нажатии кнопки подсчета прибор автоматически делает 4 изображения областей, автоматически выполняя функции сбора, хранения, идентификации, статистики, генерации отчетов и т. д.; изображения могут быть многоканальными, а яркость изображения может регулироваться.
i. В режиме подсчета в двух лунках: программа автоматически получает изображения клеток в двух ячейках образца на одном счетном листе, и автоматически вычисляет среднее значение для получения более точных результатов.
j. Функции распознавания образов: анализ исключения фрагментов клеток; подсчет отдельных клеток в кластерах; подсчет нерегулярных клеток; предоставляются диаграммы анализа данных, включая, помимо прочего: анализ диаметра клеток; анализ среднего диаметра клеток; гистограмма размеров клеток; диаграмма рассеяния диаметра клеток и яркости; контурная диаграмма диаметра клеток и яркости; диаграмма кривой роста; диаграмма распределения кластеров; диаграмма исходных клеток в четырех областях; диаграмма идентификации живых и мертвых клеток в четырех областях; диаграмма сшивания четырех областей; предоставляется инструмент для просмотра головоломок; все данные истории подсчета могут быть в любое время получены для просмотра и отслеживания.
Автоматический счетчик клеток
Использование счетчика клеток
Подсчет клеток является фундаментальным исследованием в области исследования клеточных культур. Это важное средство для понимания состояния роста культивируемых клеток и определения биологических эффектов среды, сыворотки и лекарств. Автоматический счетчик клеток может анализировать культивируемые клетки менее чем за 1 минуту и получать концентрацию клеток, средний объем клеток, жизнеспособность, размер клеток или кривые объемного распределения. Автоматические счетчики клеток также используются для определения водорослей, микроорганизмов и других организмов в диапазоне диаметров счетчиков клеток. По сравнению с методом пластины для подсчета клеток крови, машина для подсчета клеток точнее, быстрее и удобнее, а погрешность меньше.
Применение счетчика клеток в экспериментах
Измеряли концентрацию клеток в культуральной среде в разные периоды времени и строили кривую роста клеток для определения времени удвоения клеток. Это необходимая часть процесса культивирования клеток. Метаболические пути в клетках различны в разные периоды роста.
a. Подсчет клеток. При измерении внутри- и внеклеточных метаболитов можно узнать внутри- и внеклеточные метаболиты каждой клетки, избегая ошибок из-за разного количества клеток в параллельных или контрольных экспериментах.
b. Жизнеспособность клеток. Жизнеспособность клеток может использоваться в таких экспериментах, как эксперименты по цитотоксичности, эксперименты по лечению лекарственными препаратами и эксперименты по апоптозу.
c. Получение гистограмм объема клеток позволяет различать морфологию клеток.
Преимущества счетчика клеток
А. Чрезвычайно удобное управление
Счетчик ячеек прост в эксплуатации и требует всего три простых шага для завершения определения жизнеспособности концентрации клеток.
а. Загрузка образца
б. Вставьте столешницу.
c. Получите результат
Пользователям нужно всего лишь взять 20 мкл образца, вставить монтажную пластину в прибор и нажать «Старт» в течение 20 секунд, чтобы получить концентрацию и жизнеспособность клеток.
B. Ручная фокусировка не требуется.
Все счетчики, основанные на анализе изображений, должны получать четкие изображения клеток с правильным фокусным расстоянием, а затем выполнять анализ изображения для получения результатов подсчета. Если фокусное расстояние не отрегулировано правильно, это серьезно повлияет на концентрацию и оценку выживания. Если фокусное расстояние не отрегулировано должным образом, это серьезно повлияет на решение вопроса о жизни и смерти и повлияет на стабильность результатов подсчета. В процессе использования счетчика клеток нет необходимости в ручной фокусировке, что значительно позволяет избежать влияния погрешности фокусного расстояния на определение жизни и смерти.
C. Хорошая глубина резкости.
Когда объектив находится в резком фокусе на объекте, точки в одной плоскости, перпендикулярной оси объектива в его центре, могут быть достаточно четкими на пленке или приемнике, а точки в определенном диапазоне вдоль передней и задней оси объектива в этой плоскости также могут образовывать относительно четкие точки изображения, приемлемые для глаза. Расстояние между всеми объектами перед и за этой плоскостью называется глубиной резкости камеры.
Глубина резкости для подсчета клеток — это глубина клеточной суспензии, которая может быть четко отображена на ПЗС-матрице. Типичная встречная доска имеет глубину 100-200 микрон, и если глубина резкости у объектива плохая, некоторые ячейки в пределах глубины резкости не смогут отображать изображение. Идеальный счетчик должен иметь возможность визуализировать всю глубину пластины. Сцена сильно зависит от фокусного расстояния, расстояния до объекта, размера апертуры и размера ПЗС. Взвешивая различные факторы, счетчик клеток разработали систему визуализации с большой глубиной резкости, чтобы клетки в планшете для подсчета могли быть четко сфотографированы и чтобы были гарантированы стабильность и точность результатов подсчета.
Как купить счетчик сотовых телефонов?
Если вы заинтересованы в нашем Счетчик ячеек или есть какие-либо вопросы, пожалуйста, напишите по электронной почте info@antiteck.com, мы ответим вам как можно скорее.