Колонка для хроматографии
Что такое хроматографическая колонка?
Хроматографическая колонка можно разделить на набивную колонку и колонку с открытой трубкой. Самый хроматографические колонки изготавливаются из металла или стекла. Существуют прямые трубы, спиральные трубы, U-образные трубы и другие формы. В жидкостной хроматографии обычно используются насадочные колонки. Разделительный эффект хроматографических колонок зависит от выбранной неподвижной фазы, а также от подготовки и условий эксплуатации колонок.
хроматография является средством разделения и анализа, а разделение является ядром, поэтому колонка, отвечающая за разделение, является сердцем хроматографической системы. Требования к хроматографическая колонка отличаются высокой эффективностью колонки, хорошей селективностью, быстрой скоростью анализа и т. д. Для ВЭЖХ коммерчески доступны различные наполнители из частиц, такие как пористый кремнезем и связанная фаза на основе кремнезема, оксид алюминия, органические полимерные микросферы (включая ионообменные смолы), пористый углерод. и т. д., в то время как его размер частиц обычно составляет 3,5,7,10, 5, 160,000 мкм и т. д., теоретическое значение эффективности колонки может достигать 5000 ~ 500 20,000 / м. Для общего анализа требуется только 10 колонок с эффективностью от количества тарелок; анализ гомологов может достигать 30; с большей трудностью для разделения пар материалов можно использовать до XNUMX XNUMX столбцов. Поэтому для анализа сложных смесей обычно достаточно колонки длиной около XNUMX–XNUMX см.
Эффективность колонны зависит от факторов внутри и снаружи колонны, и для достижения наилучшей эффективности колонны, в дополнение к небольшому мертвому объему снаружи колонны, разумной конструкции колонны (минимизации мертвого объема вне слоя насадки) и технологии загрузки. необходимы. Даже при наилучшей технике нагружения заполнение в центральной части колонны и вдоль стенки всегда разное. Часть вблизи стенки более рыхлая, в ней легче создать траншейный поток и более высокая скорость потока, что влияет на форму потока ополаскивателя и расширяет спектральную полосу, что является эффектом стенки. Эта площадь стенки пробирки примерно в 30 раз превышает толщину размера частиц, считая от стенки пробирки внутрь. В обычной системе жидкостной хроматографии влияние внеколоночного влияния на эффективность колонки намного больше, чем влияние стенки пробирки.
Даже при наилучшей технике нагружения заполнение в центральной части колонны и вдоль стенки всегда разное. Часть вблизи стенки более рыхлая, в ней легче создать траншейный поток и более высокая скорость потока, что влияет на форму потока ополаскивателя и расширяет спектральную полосу, что является эффектом стенки. Эта площадь стенки пробирки примерно в 30 раз превышает толщину размера частиц, считая от стенки пробирки внутрь. В обычной системе жидкостной хроматографии влияние внеколоночного влияния на эффективность колонки намного больше, чем влияние стенки пробирки.
Структура хроматографической колонки
Хроматографическая колонка состоит из колонной трубки, крышки, обоймы (уплотнительного кольца) и ситовой пластины (фильтр пластина), соединение, винты и т. д. колонная трубка изготавливается в основном из нержавеющей стали, а при давлении не выше 70 кг/см2 также могут использоваться толстостенные стеклянные или кварцевые трубки, причем внутренняя стенка трубки требует высокой степени отделки. Чтобы улучшить эффект колонны и уменьшить эффект стены, полировка стен колонны из нержавеющей стали. Есть также люди в стене колонны из нержавеющей стали, покрытой фторопластом для улучшения внутренней отделки стен, эффект такой же, как полировка. Существует также использование плавленого кварца или стеклянной футеровки для тонких трубчатых колонок. Соединения колонны на обоих концах хроматографической колонки снабжены ситчатой пластиной внутри, изготовленной из спеченной нержавеющей стали или титанового сплава с апертурой 0.2~20 мкм (5~10 мкм), в зависимости от размера частиц наполнителя, чтобы чтобы наполнитель не вытекал.
Насадки для хроматографической колонки
Стандартная упаковка колонки: колонка с углеродом 18 [1] (ODS/C18), колонка с углеродом 8 (MOS/C8), колонка с углеродом 6 (гексил/C6), колонка с углеродом 4 (бутил/C4), колонка с углеродом 1 (метил/C1 ), анионообменная колонка (SAX), катионообменная колонка (SCX), фенильная колонка (Phenyl), аминоколонка (амино/NH2), колонки на основе цианида (циано/CN/нитрил).
Общая упаковка адсорбционной колонны: колонка с силикагелем.
Тип хроматографической колонки
Хроматографическая колонка можно разделить на аналитические и препаративные в зависимости от их использования и различных спецификаций размера следующим образом.
а. Стандартная аналитическая колонка (постоянная колонка), внутренний диаметр 2–5 мм (обычно используется 4.6 мм, в стране — 4 мм и 5 мм), длина колонки 10–30 см.
б. Колонка узкого диаметра (узкий канал, также известная как колонка с тонким трубчатым диаметром, полумикроколонка), внутренний диаметр 1–2 мм, длина колонки 10–20 см.
c. Капиллярная колонка (также называемая микроколонкой), внутренний диаметр 0.2–0.5 мм.
d. Полупрепаративные колонки, внутренний диаметр >5 мм.
e. Лабораторные препаративные колонки с внутренним диаметром 20–40 мм и длиной колонки 10–30 см.
f. Внутренний диаметр колонн для подготовки сырья может достигать нескольких десятков сантиметров. Внутренний диаметр колонны обычно определяется исходя из длины колонны, размера частиц наполнителя и скорости потока в сложенном состоянии, с целью избежать влияния стенок трубы.
Использование хроматографической колонки
Ионообменная хроматография
A. Установка
а. Прежде всего, необходимо убедиться в совместимости соединителей и трубопроводов колонки и прибора. Для уменьшения мертвого объема используйте линию с наименьшим возможным внутренним диаметром для соединения между инжекционным клапаном, колонкой и детектором, а также контролируйте длину соединительной линии между инжектором, колонкой и детектором. Перед установкой колонки убедитесь в исправности растворителя в системе потока. Для анализа более сложных образцов рекомендуется установить защитную колонку.
b. Для обеспечения наилучшего соединения между колонкой и системой приборов следует использовать винтовую крышку и конический соединитель, соответствующие интерфейсу колонки. Если исходный соединитель долгое время использовался с другими типами колонок, рекомендуется проверить соответствие перед подключением новой колонки, чтобы избежать повреждения колонки или утечки, вызванной несоответствием.
c. Используйте универсальные фитинги, которые затягиваются только вручную без специального ключа, при давлении 5000 фунтов на квадратный дюйм; рабочая температура не должна превышать 100 ℃.
B. Подвижная фаза
а. Использовать Мобильная фаза по крайней мере в 20 раз больше объема колонки, чтобы полностью уравновесить колонку перед определением образца. Всегда используйте растворитель для хроматографии в качестве подвижной фазы. Если вы используете водную фазу буфера, его следует ежедневно готовить, чтобы он оставался свежим, чтобы избежать образования бактерий.
b. Перед использованием подвижную фазу следует профильтровать через микропористую мембрану, чтобы исключить повреждение хроматографической системы и колонки частицами подвижной фазы. Буфер следует повторно фильтровать после смешивания с другими подвижными фазами, чтобы избежать образования нового осадка, вызванного изменением растворимости. В качестве подвижной фазы для промывки колонки C18 не следует использовать чистую воду, чтобы избежать ухудшения характеристик колонки (добавление 5% органического растворителя для промывки колонки может одновременно очистить колонку от солей буфера. (Это также может облегчить балансировку колонки)).
c. Подвижную фазу необходимо дегазировать перед использованием, чтобы избежать неправильной работы насоса и детектора из-за пузырьков воздуха. Если подвижная фаза, используемая в тесте, значительно отличается от подвижной фазы, используемой для консервации колонки, ее следует уравновешивать методом перераспределения. Следует избегать повреждения колонки и системы прибора из-за внезапных изменений подвижной фазы, вызывающих чрезмерное повышение давления в колонке или кристаллизацию солей буфера подвижной фазы. Колонки с нормальной фазой требуют более длительного времени уравновешивания, чем колонки с обращенной фазой.
C. Подготовка образца
а. По возможности образец следует растворять в растворителе, который взаимно растворим с подвижной фазой. Если не указано иное, разрешение колонки, вероятно, снизится, если для растворения образца используется сильный растворитель.
b. Перед подачей образца его следует предварительно отфильтровать с помощью игольчатого фильтра. Частые изменения состава подвижной фазы ускорят снижение эффективности колонки.
c. Хроматографическая колонка загружается методом гомогенизации под высоким давлением и выдерживает высокое давление. Для достижения наилучшего эффекта разделения, пожалуйста, не превышайте давление 200 кгс при использовании и избегайте резких скачков или изменений давления, иначе это приведет к разрушению силикагелевой набивки и сократит срок службы колонки. Максимальная рабочая температура не должна превышать 60 °C, если не требуется иное.
D. Сохранить операцию
а. Если подвижная фаза содержит кислоты или неорганические соли, ее следует предварительно промыть деионизированной водой (в 20 раз больше объема колонки). Затем колонку консервируют 100% ацетонитрилом или метанолом. Наконец, колонку герметизируют вместе с соединениями и хранят в стабильных условиях.
b. Следует избегать прямых механических ударов или падений колонки, чтобы предотвратить ухудшение ее характеристик.
Е. Регенерация хроматографических колонок
Колонки промывали растворителем, эквивалентным 20-кратному объему колонки, в следующем порядке, и рекомендуется промывать в направлении стрелки колонки, по возможности без обратной промывки. Эталонная последовательность растворителей, используемых при ополаскивании, представляет собой воду, метанол, хлороформ и изопропанол.
Как купить хроматографическую колонку?
Если вы заинтересованы в нашем Колонка для хроматографии или есть какие-либо вопросы, пожалуйста, напишите по электронной почте info@antiteck.com, мы ответим вам как можно скорее.